趙昌東，趙紅艷，柯希權(quán)，張小節(jié)，張 輝，王淑芳，李 雪

1.蚌埠醫(yī)學(xué)院附屬連云港市第二人民醫(yī)院消化內(nèi)科，江蘇 連云港 222023； 2.連云港市中醫(yī)院超聲科； 3.蚌埠醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院消化內(nèi)科

潰瘍性結(jié)腸炎(ulcerative colitis，UC)是消化內(nèi)科常見病，其發(fā)病率有逐年升高的趨勢。目前，該病病因和發(fā)病機制尚不明確，多數(shù)學(xué)者認(rèn)為可能由遺傳、免疫、環(huán)境等多種因素相互作用所致；另外，近年一些研究表明，UC的發(fā)病可能還與精神心理因素有關(guān)，有學(xué)者認(rèn)為，焦慮、抑郁心理可能與UC的誘發(fā)、活動、復(fù)發(fā)及病情嚴(yán)重程度有關(guān)[1-3]。但焦慮、抑郁心理通過何種機制影響UC的發(fā)病，目前鮮見報道。基于國內(nèi)外研究現(xiàn)狀，我們提出假說：焦慮、抑郁心理可能通過改變5-羥色胺(5-hydroxy tryptamine，5-HT)等神經(jīng)遞質(zhì)的分泌，經(jīng)神經(jīng)-內(nèi)分泌-免疫網(wǎng)絡(luò)改變腦-腸軸功能，影響免疫系統(tǒng)IL-6、IL-8、IL-2等細(xì)胞因子的分泌，參與UC的發(fā)病。

為了驗證這一假說，本研究擬運用臨床心理測評工具測評UC患者焦慮、抑郁心理的發(fā)病情況，并通過ELISA法檢測這些患者血液中的5-HT、IL-6、IL-8、IL-2的含量，探討其與疾病的活動關(guān)系，將UC患者的焦慮、抑郁心理評分與5-HT、IL-6、IL-8、IL-2的含量進(jìn)行Pearson相關(guān)分析，探討焦慮、抑郁心理影響UC發(fā)病的可能機制，為UC的綜合治療提供精神心理學(xué)及神經(jīng)內(nèi)分泌免疫學(xué)依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料病例組：選擇2013年1月至2018年3月在連云港市第二人民醫(yī)院和蚌埠醫(yī)學(xué)院附屬第一人民醫(yī)院消化內(nèi)科就診的門診及住院UC患者121例，男68例，女53例，年齡(40.20±9.64)歲(25～67歲)。UC的診斷、分期及嚴(yán)重程度的分級標(biāo)準(zhǔn)符合《炎癥性腸病診斷與治療的共識意見2012年·廣州》的標(biāo)準(zhǔn)，其中病情分期及嚴(yán)重程度分級采用改良Mayo評分[4]。按病情分期及病情嚴(yán)重程度分級標(biāo)準(zhǔn)分為：A組：緩解期患者；B組：活動期患者；其中B組活動期患者又分為：C組：輕度活動期患者；D組：中-重度活動期患者。其中A組26例，B組95例；C組64例，D組31例。對照組：選取同期健康體檢者，共30名，男18名，女12名，年齡(38.97±11.50)歲(24～65歲)。各組在性別、年齡、職業(yè)、婚姻狀況、教育程度等構(gòu)成比上差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 納入及排除標(biāo)準(zhǔn)納入標(biāo)準(zhǔn)：年齡18～70歲，且具有自主民事能力，所有研究對象均進(jìn)行臨床流行病學(xué)調(diào)查并登記，并經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)，根據(jù)個人意愿簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：兩組均排除其他自身免疫性疾病、缺血性腸病、腸道感染、放射性腸炎、消化道腫瘤等疾病，6周內(nèi)均未服用過抗抑郁或焦慮等精神藥物史，無智力、語言障礙者。

1.3 臨床心理測評工具采用漢密爾頓焦慮量表(HAMA)和漢密爾頓抑郁量表(HAMD)對上述病例組及健康對照組逐項詢問并記錄，進(jìn)行評分，評估被測者是否存在焦慮和(或)抑郁狀態(tài)；HAMA共有14項評價指標(biāo)，HAMA標(biāo)準(zhǔn)分>14分為焦慮狀態(tài)，評分越高，表明焦慮癥狀越明顯；HAMD共有17項評價指標(biāo)，HAMD 標(biāo)準(zhǔn)分>17分為抑郁狀態(tài)，評分越高，表明抑郁癥狀越明顯[5]。

1.4 方法

1.4.1 臨床觀察指標(biāo)：觀察所有患者的排便次數(shù)、大便帶血情況、體溫、脈搏、血紅蛋白、血沉、內(nèi)鏡下黏膜表現(xiàn)、HAMA及HAMD評分。

1.4.2 酶聯(lián)免疫吸附試驗法(ELISA)檢測：兩組研究對象于采血前72 h避免進(jìn)食酪胺含量高的食物。于清晨空腹靜息30 min后，坐位取肘靜脈血5 ml，將注入血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2 h，然后1 000×g離心20 min，取上清置于-20 ℃冰箱保存，待批量后采用 ELISA法檢測5-HT、IL-6、IL-8、IL-2的含量(ELISA試劑盒購自南京賽研生物技術(shù)有限公司)。

1.4.3 質(zhì)量控制：采用定式問卷、統(tǒng)一調(diào)查用語、統(tǒng)一填表方式，所有參研人員均經(jīng)我院神經(jīng)心理科副主任醫(yī)師以上職稱的醫(yī)師進(jìn)行培訓(xùn)；標(biāo)本檢測嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行。

2 結(jié)果

2.1 病例組與對照組HAMA、HAMD評分及5-HT、IL-6、IL-8、IL-2含量的比較兩組HAMA、HAMD評分比較顯示：病例組焦慮發(fā)生率為48.76%(59/121)，對照組焦慮發(fā)生率為10.00%(3/30)，兩組HAMA評分比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)；病例組抑郁發(fā)生率為42.15%(51/121)，對照組抑郁發(fā)生率為6.67%(2/30)，兩組HAMD評分比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。兩組5-HT、IL-6、IL-8、IL-2含量比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)(見表1)。

表1 病例組與對照組HAMA、HAMD評分及5-HT、IL-6、IL-8、IL-2含量比較Tab 1 Comparison of the scores of HAMA and HAMD and the levels of 5-HT, IL-6, IL-8 and IL-2 between case group and

2.2 A組與B組HAMA、HAMD評分及5-HT、IL-6、IL-8、IL-2含量的比較A組與B組HAMA、HAMD評分比較顯示：A組HAMA、HAMD評分低于B組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。兩組5-HT、IL-6、IL-8、IL-2含量比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)(見表2)。

表2 A組與B組HAMA、HAMD評分及5-HT、IL-6、IL-8、IL-2含量比較Tab 2 Comparison of the scores of HAMA and HAMD and the levels of 5-HT, IL-6, IL-8 and IL-2 between group A and

2.3 C組與D組患者HAMA、HAMD評分及5-HT、IL-6、IL-8、IL-2含量的比較C組與D組患者HAMA、HAMD評分比較顯示：C組HAMA、HAMD評分低于D組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。兩組5-HT、IL-6、IL-8、IL-2含量比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)(見表3)。

表3 C組與D組HAMA、HAMD評分及5-HT、IL-6、IL-8、IL-2含量比較Tab 3 Comparison of the scores of HAMA and HAMD and the levels of 5-HT, IL-6, IL-8 and IL-2 between group C and

2.4 病例組HAMA、HAMD評分與5-HT、IL-6、IL-8、IL-2的相關(guān)性分析Pearson相關(guān)分析表明，病例組HAMA評分、HAMD評分均與5-HT、IL-6、IL-8的含量呈顯著正相關(guān)，與IL-2呈顯著負(fù)相關(guān)(見表4)。

表4 病例組HAMA、HAMD評分與5-HT、IL-6、IL-8、IL-2含量的相關(guān)性分析Tab 4 Correlation analysis of the scores of HAMA and HAMD and the levels of 5-HT, IL-6, IL-8 and IL-2 in case group

3 討論

臨床研究發(fā)現(xiàn)，UC患者多存在不同程度的精神心理疾病，其中焦慮、抑郁最為常見，其發(fā)生率均高于正常人群[6-8]。國外有研究[7,9]發(fā)現(xiàn)，精神心理因素與UC的病情嚴(yán)重程度有關(guān)，其中焦慮、抑郁心理與UC的誘發(fā)、活動、復(fù)發(fā)及惡化有關(guān)。越來越多的研究[1]表明，精神心理因素可能通過腦-腸軸功能的改變影響UC的發(fā)病。

本研究結(jié)果表明，病例組HAMA、HAMD評分均顯著高于對照組，活動期UC患者HAMA、HAMD評分顯著高于緩解期，中-重度UC患者HAMA、HAMD評分顯著高于輕度UC患者，這與其他研究相一致。因此，我們認(rèn)為UC患者焦慮、抑郁發(fā)生率高于健康人群，焦慮、抑郁心理與UC患者的病情嚴(yán)重程度呈正相關(guān)，提示精神心理因素可能參與了UC的發(fā)病。但焦慮、抑郁心理通過何種途徑影響UC的發(fā)病，目前鮮見報道。

5-HT是一種廣泛分布于中樞神經(jīng)系統(tǒng)和胃腸道的單胺類腦腸肽，5-HT及其受體被認(rèn)為與焦慮、抑郁及胃腸功能的調(diào)節(jié)關(guān)系密切，約90%合成和分布于腸嗜鉻細(xì)胞和腸神經(jīng)元內(nèi)。5-HT主要通過與其受體結(jié)合激活效應(yīng)細(xì)胞調(diào)節(jié)腸道的敏感性、平滑肌收縮、運動功能、神經(jīng)遞質(zhì)的釋放及痛覺傳導(dǎo)，參與UC的腸道免疫[10-11]。5-HT在UC的發(fā)病機制中可能起重要作用，有研究[12-14]表明，5-HT可促進(jìn)炎癥細(xì)胞的聚集，調(diào)節(jié)T細(xì)胞的功能，刺激免疫細(xì)胞分泌IL-6、IL-2、IFN-γ等細(xì)胞因子，這些細(xì)胞因子可反過來影響腸神經(jīng)系統(tǒng)。有研究[15]發(fā)現(xiàn)，在DSS誘導(dǎo)的UC模型中，5-HT水平與UC的病情嚴(yán)重程度呈正相關(guān)。

IL-6主要由活化的巨噬細(xì)胞、樹突細(xì)胞、B細(xì)胞、T細(xì)胞等細(xì)胞分泌，介導(dǎo)炎癥反應(yīng)，在UC的發(fā)病中起重要作用。IL-6過度表達(dá)可影響腸上皮細(xì)胞電解質(zhì)的分泌，使其通透性增加，從而使中性粒細(xì)胞游出并浸潤到炎癥部位[16]。ZHANG等[17]研究發(fā)現(xiàn)，IL-6在DSS誘導(dǎo)的小鼠UC模型中過度表達(dá)并參與疾病進(jìn)展。

IL-8主要由活化的單核細(xì)胞、表皮細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞及淋巴細(xì)胞產(chǎn)生，其主要生物學(xué)作用是趨化并激活中性粒細(xì)胞，增強其溶酶體酶的活性和吞噬作用，對T細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞也有一定的趨化作用。KOROLKOVA 等[18]研究發(fā)現(xiàn)，UC患者高表達(dá)IL-8，其濃度依UC炎癥程度顯著改變。

IL-2是Th1細(xì)胞分泌的一種細(xì)胞因子，與其受體結(jié)合后，能引起 T 細(xì)胞的活化、增殖及分化，在免疫調(diào)節(jié)方面具有重要作用。EBRAHIMPOUR等[19]研究認(rèn)為，UC患者IL-2+T細(xì)胞水平升高可能是導(dǎo)致疾病發(fā)病的原因之一。SAVI MLAKAR 等[20]研究發(fā)現(xiàn)，緩解期UC患者結(jié)腸黏膜IL-2水平較活動期升高，提示IL-2水平增加可能對調(diào)節(jié)性T細(xì)胞有保護(hù)作用。VAN ASSCHE等[21]研究發(fā)現(xiàn)，在活動期UC患者中，應(yīng)用抗IL-2受體抗體，患者的臨床癥狀及內(nèi)鏡下炎癥表現(xiàn)均得到了緩解。

本研究發(fā)現(xiàn)，病例組5-HT、IL-6、IL-8含量較對照組明顯升高，IL-2含量明顯降低；活動期UC患者5-HT、IL-6、IL-8含量較緩解期明顯升高，IL-2含量明顯降低；活動期中-重度UC患者5-HT、IL-6、IL-8含量較輕度UC患者明顯升高，IL-2含量明顯降低，這與其他研究相一致。Pearson相關(guān)分析表明，病例組HAMA評分、HAMD評分均與5-HT、IL-6、IL-8呈顯著正相關(guān)，與IL-2呈顯著負(fù)相關(guān)。因此，我們推測：焦慮、抑郁心理可能通過改變5-HT等神經(jīng)遞質(zhì)的分泌，經(jīng)神經(jīng)-內(nèi)分泌-免疫網(wǎng)絡(luò)改變、腦-腸軸功能，影響免疫系統(tǒng)、IL-6、IL-8、IL-2等細(xì)胞因子的分泌，參與UC的發(fā)??；而上述細(xì)胞因子的變化也可能通過改變腦-腸軸功能進(jìn)而影響腦內(nèi)5-HT的分泌，引起或加重焦慮、抑郁心理(見圖1)。

圖1 焦慮、抑郁心理對UC患者神經(jīng)-內(nèi)分泌-免疫的影響Fig 1 The effects of anxiety and depression on immune-neuroendocrine network in patients with UC