秦信蓉， 喻時(shí)周， 高志宏， 張星星， 梁龍兵1， 杜才富

(1.貴州省農(nóng)業(yè)科學(xué)院油菜研究所， 貴陽(yáng) 550008； 2.貴州禾睦福種子有限公司， 貴陽(yáng) 550008)

油菜是我國(guó)南方的主要冬季作物，早熟高產(chǎn)油菜品種的育成，對(duì)爭(zhēng)季節(jié)奪取全年糧油雙豐收有重要意義。寶油早12系貴州省農(nóng)業(yè)科學(xué)院油菜研究所和貴州禾睦福種子有限公司選育的甘藍(lán)型隱性核不育雜交油菜品種，是集早熟優(yōu)質(zhì)豐產(chǎn)的一個(gè)甘藍(lán)型雜交油菜品種。

甘藍(lán)型油菜隱性細(xì)胞核雄性不育(GMS)兩系制種，人工拔除50%的可育株，不但制種成本高，而且制種產(chǎn)量低；化學(xué)雜交劑誘導(dǎo)雄性不育制種具有經(jīng)濟(jì)有效的優(yōu)點(diǎn)[1-3]，利用化學(xué)殺雄技術(shù)使GMS中的可育株雄性敗育(化殺除雜)，使其雜交結(jié)實(shí)，提高制種單產(chǎn)，降低制種成本，保證了種子純度，其純度可達(dá)95%以上，2種制種方式所得雜交種其雜種優(yōu)勢(shì)無(wú)顯著差異。從而使GMS兩系制種由“人工除雜”向“化殺除雜”轉(zhuǎn)變，實(shí)現(xiàn)GMS系統(tǒng)的高產(chǎn)、低成本制種。

油菜化學(xué)殺雄制種技術(shù)是通過(guò)利用化學(xué)藥劑使油菜中的乙烯、可溶性蛋白含量、游離氨基酸、游離脯氨酸、氧化酶這些生理生化指標(biāo)的變化失調(diào)導(dǎo)致了雄蕊畸形、小孢子發(fā)生異常、花粉粒發(fā)生敗育、形成無(wú)活力的花粉或不能形成花粉[4]。影響了育性的正常表達(dá)，從而達(dá)到不拔除可育株制種的目的。

化殺制種的關(guān)鍵是化學(xué)殺雄，而化學(xué)殺雄過(guò)程是指對(duì)母本正常發(fā)育花粉經(jīng)過(guò)雜交劑處理后使花粉發(fā)育從正?！讲徽！氩挥綇氐撞挥倪^(guò)程。

1 主要特征特性

1.1 不育系YD 3361 AB的特征特性

YD 3361 AB屬于甘藍(lán)型弱冬性、早熟高油黃籽雙低不育系。直播條件下生育期為186 d；密度為10.5萬(wàn)株·hm-2時(shí)，株高180 cm，單株一次有效分枝數(shù)10.33個(gè)，單株有效角果數(shù)940個(gè)，角長(zhǎng)5.35 cm，角粒數(shù)21.35粒，千粒重3.87 g。2011—2012年連續(xù)檢測(cè)，種子芥酸含量平均0.97%，硫甙含量平均24.92μmol·g-1，平均含油量45.63%[5]。

1.2 恢復(fù)系YD 1021 R的特征特性

YD 1021 R屬甘藍(lán)型、半冬性、雜黃籽雙低高油份恢復(fù)系；株高中等(172.40 cm)，分枝位低，抽薹開(kāi)花整齊，單株一次有效分枝數(shù)8.36個(gè)，單株有效角531個(gè)，角粒數(shù)21.8粒，千粒重4.19 g，芥酸0.15%，硫甙27.52μmol·g-1，含油量47.49%。

1.3 寶油早12特征特性

寶油早12具有早熟優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)等特性。該組合為甘藍(lán)型油菜弱冬性隱性核不育兩系雜交種，在2011—2013年2年貴州省早熟油菜區(qū)域試驗(yàn)的平均全生育期為189.69 d，比所有參試品種的平均全生育期晚熟0.3 d，平均株高162.87 cm，一次有效分枝部位96.03 cm，一次有效分枝數(shù)5.58個(gè)；單株有效角果數(shù)為191.17個(gè)，每角粒數(shù)為18.26粒，千粒重3.30 g，單株產(chǎn)量為10.48 g。種皮色為黃褐色?？沟剐詮?qiáng)。芥酸含量為0.60%，硫甙含量為32.54μmol·g-1，含油量平均為44.46%，居2年所有20個(gè)參試早熟品種首位[5]。

表1 寶油早12父母本及品種特征特性

材料名稱(chēng)生育期/d株高/cm一次有效分枝/cm單株有效角/個(gè)每角粒數(shù)千粒重/g芥酸/%硫甙/(μmol·g-1)含油量/%YD3361AB186.00180.0010.33940.0021.353.870.9724.9245.63YD1021R—172.408.36531.0021.804.190.1527.5247.49寶油早12189.69162.875.58191.1718.263.300.6032.5444.46

2 供試材料

2.1 不育系YD 3361 AB

YD 3361 AB屬隱性核不育兩系不育系，不育株與可育株分離比例為50%，育性不受外界環(huán)境影響。不育株花藥退化，無(wú)花粉，完全不育?？捎昊ㄋ幷＃谢ǚ?，育性正常可育。

2.2 化學(xué)雜交劑SX-1

供試用的化學(xué)雜交劑SX-1(陜西省雜交油菜研究中心研制)為二元復(fù)合藥物，主要成分為除草劑。具有殺雄徹底、作用時(shí)間長(zhǎng)、易分解、無(wú)殘留、成本低、用量少、操作方便等特點(diǎn),已在西北地區(qū)和四川、貴州雜交油菜生產(chǎn)中大面積應(yīng)用。SX-1能抑制植株生長(zhǎng)，降低GMS不育系株高,有利于花期授粉結(jié)果，提高制種產(chǎn)量[6]。噴施殺雄劑SX-1后，植株的生理機(jī)制也發(fā)生了相應(yīng)的變化:首先, 葉片葉綠素含量下降。葉片失綠會(huì)影響蛋白質(zhì)及碳水化合物向生殖器官中運(yùn)轉(zhuǎn)。其次，經(jīng)SX-1處理植株葉片脯氨酸含量升高而花蕾脯氨酸含量反而降低?；ńz的退化也許是阻礙葉片脯氨酸向花蕾轉(zhuǎn)運(yùn)的主要原因。由于花絲和藥隔維管組織發(fā)育不健全，絨氈層過(guò)早退化、解體，脯氨酸及其他營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)或生理活性物質(zhì)不能正常轉(zhuǎn)運(yùn)到不育花藥，使花粉母細(xì)胞及小孢子的發(fā)育不能得到必要的、足夠的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)或生理活性物質(zhì)，從而表現(xiàn)花粉母細(xì)胞不能正常地進(jìn)行減數(shù)分裂，最終導(dǎo)致小孢子的徹底解體。

3 方 法

3.1 選好基地

油菜是常異花授粉作物，必需選好隔離區(qū)，空間隔離距離必須在1 000 m以上或采用自然屏障隔離。制種區(qū)海拔600～1 000 m為宜，向陽(yáng)且風(fēng)向條件好的中上肥力地塊做制種基地。從2014年—2018年貴州禾睦福種子有限公司都在貴州省長(zhǎng)順縣盧山鎮(zhèn)進(jìn)行化殺制種，寶油早12累計(jì)制種面積達(dá)200 hm2。

3.2 適期播種培育壯苗

3.2.1苗床選擇

選擇向陽(yáng)無(wú)蔭蔽、地勢(shì)平坦易排灌，近2年未種植油菜和無(wú)留種十字花科植物的壤土或沙壤土的旱地作為苗床[7]，苗床地遠(yuǎn)離菜地等綠色植物種植地，防止害蟲(chóng)遷移危害，每667 m2制種大田留足133 m2苗床地并培肥，父母本嚴(yán)格分開(kāi)并標(biāo)記，不在同一苗床地，以防混雜。

3.2.2適期播期

由于寶油早12父母本偏早熟，父本YD 1021 R約在9月15日播種，母本比父本遲播5～10 d，在9月20—30日播種。每667 m2苗床播種量為0.3～0.4 kg，均勻撒于廂面，用渣肥或細(xì)土蓋種，用作物秸稈覆蓋，用敵殺死噴霧防治害蟲(chóng)危害，確保土壤墑情，防止大雨沖刷，有利出苗。

3.2.3苗床管理

出苗后及時(shí)揭開(kāi)覆蓋物，保證菜苗生長(zhǎng)，防蟲(chóng)1次，3葉時(shí)勻苗后每667 m2用清糞水加尿素5 kg追肥。苗床地注意去雜保純，移栽前5～7 d用尿素2～3 kg兌清糞水施送稼肥。

3.3 移 栽

3.3.1移栽時(shí)間

播后30 d左右，葉齡5～6葉開(kāi)始移栽，10月25日前移栽結(jié)束，先栽父本并培育大壯苗，父本返青后再移栽母本。剩余苗不得遺留田間。

3.3.2配方施肥

整地前將有機(jī)肥(牛糞等)施于田中混勻整地，移栽前每667 m2用配方復(fù)合肥30 kg加硼沙1 kg混勻撒施于移栽溝內(nèi)。栽后立即用清糞水澆施作活棵肥，促進(jìn)移栽菜苗早成活，早發(fā)棵。

3.3.3合理密植及移栽行比

父母本行比為1∶3，母本行距0.33 m，株距0.3 m，密度5 000株·(667 m2)-1。父本兩側(cè)行距0.5 m，株距0.25 m，密度1 350株·(667 m2)-1左右。父母本栽苗6 000～7 000株·(667 m2)-1。

3.4 田間管理

3.4.1追 肥

每667 m2施尿素10 kg，需在11月25日前追施結(jié)束，后期嚴(yán)格控氮。結(jié)合追肥，及時(shí)進(jìn)行培土擁根，防止凍害和后期倒伏。

3.4.2加強(qiáng)父本管理

延長(zhǎng)父本花期。抽薹期，對(duì)父本進(jìn)行隔株打薹，促進(jìn)分枝生長(zhǎng)，可有效延長(zhǎng)父本花期，提高母本結(jié)實(shí)率。

3.4.3及時(shí)鏟青、拔除異型株

必需在油菜親本開(kāi)花前將制種區(qū)和隔離帶周?chē)氖只浦参飶氐诅P除，并隨時(shí)清除父母本的異型株，確保制種隔離安全和父母本的純度，以免影響制種純度。

3.5 化學(xué)殺雄劑配制及施用

供試用的化學(xué)雜交劑SX-1共有2種劑量，分別標(biāo)有藍(lán)色(體積：1 mL，濃度6.0 mg·L-1)和綠色(體積：1 mL，濃度7.0 mg·L-1)2種藥劑，通常在4 ℃左右低溫條件下保存，用于誘導(dǎo)油菜雄性不育時(shí)可采用噴施或涂莖等方法。在大田制種中主要采用噴施，具體使用方法如下：

3.5.1藥劑配制

對(duì)于誘導(dǎo)正常油菜雄性核不育(包括GMS中的正常株)需2次噴藥，即第1次在母本YD 3361 A主花序最大花蕾長(zhǎng)1.5～2.5 mm(花粉母細(xì)胞在單核期，即油菜花蕾和功能葉平頭達(dá)80%以上)時(shí)用藍(lán)色藥劑噴施。將藍(lán)色藥劑取5支，再加高純硼1包，加水定容到1 L母液，再取0.5 L母液倒入容量為18 kg的噴霧器中，充分?jǐn)噭蚝髧娛?/p>

3.5.2藥劑施用

每667 m2制種田(父母本行比為1∶3，母本行距0.33 m，母本密度5 000株)用藥液9 kg(每桶水噴施油菜1 334 m2)。第1次施藥后根據(jù)生育進(jìn)程再定第2次施藥時(shí)間，母本YD 3361 A約40%的植株一次分枝達(dá)2個(gè)以上，用綠色藥劑5支再加高純硼1包，加水定容到1 L母液，再將0.5 L母液倒入容量為18 kg的噴霧器中，充分?jǐn)噭蚝髧娛?。噴施劑量與第1次相同(每667 m2地用9 kg藥液)。

(備注： 以上配制方法在溫度低時(shí)可適當(dāng)增加劑量。第1次施用時(shí)溫度低，可適當(dāng)增加劑量，第2施用時(shí)溫度高可適當(dāng)減少劑量。)

3.5.3注意事項(xiàng)

噴藥前需組織專(zhuān)人培訓(xùn)，合格后才能進(jìn)行作業(yè)。作業(yè)時(shí)需由專(zhuān)業(yè)技術(shù)人員指導(dǎo)，專(zhuān)業(yè)隊(duì)噴藥，以確保效果好，無(wú)藥害；噴藥前注意天氣預(yù)報(bào)，48 h內(nèi)有雨、吹風(fēng)及露水天不能?chē)娝帲环乐顾幰猴h移到父本上；開(kāi)花后每隔3～4 d觀察1次雄蕊敗育及微粉變化情況；該藥低濃度刺激(促進(jìn))油菜生長(zhǎng)，過(guò)高濃度產(chǎn)生藥害，一旦發(fā)現(xiàn)藥害，應(yīng)停止第2次噴藥或2次噴藥濃度減半；“化殺”母本苗應(yīng)分類(lèi)、等距移栽、勻植或噴藥前人工間苗，防止葉片相互摻搭影響效果；化殺效果出現(xiàn)異常，應(yīng)及時(shí)報(bào)告并組織鏡檢，必要時(shí)及早拔除可育株。

3.6 適時(shí)收獲

先割除父本并帶出田塊，經(jīng)驗(yàn)收合格后，再統(tǒng)一組織母本高樁收割，并攤曬在高樁上，收獲后4～6 d脫粒，做到單打、單收、單藏，避免機(jī)械混雜和人為混雜，確保種子足額入庫(kù)。

4 結(jié) 論

4.1由于寶油早12父母本生育期中偏早熟，母本可在9月中旬播種，父本比母本早播5～10 d，確保花期相遇。

4.2寶油早12熟期早、品質(zhì)優(yōu)，其不育系不育性穩(wěn)定、徹底，同時(shí)注意硼肥施用。

4.3寶油早12由于熟期較早，花期較集中，化殺效果較好，產(chǎn)量較高，每667 m2產(chǎn)量高的可達(dá)70～75 kg，純度可達(dá)95%；商品籽產(chǎn)量與傳統(tǒng)制種拔除可育法相當(dāng)。