劉蓉蓉

（馬鞍山市農業(yè)農村局 畜牧獸醫(yī)技術服務中心，安徽馬鞍山 243000）

新城疫與禽流感都是由病毒引起的使禽類發(fā)生高度接觸性的烈性傳染病[1]。禽流感病毒中的H5亞型能夠造成雞群高發(fā)病率和高死亡率，禽流感H7亞型病毒對人類健康存在威脅[2]。新城疫和禽流感對養(yǎng)禽業(yè)造成的損失大、風險高，控制疫病的主要方法還是接種疫苗[3]。禽流感H5亞型一直被列入國家強制免疫計劃，2017年下半年，禽流感H7亞型也實施強制免疫措施。我市制定了《2018年全市動物疫病強制免疫計劃實施方案》，并在2018年6月和12月共抽選15個規(guī)?；仪蒺B(yǎng)殖場447份血清樣品，進行新城疫、禽流感H5亞型、禽流感H7亞型免疫抗體監(jiān)測工作，評估免疫效果，旨在掌握馬鞍山市重點家禽疫情防控動態(tài)，及時發(fā)現(xiàn)疫情隱患，指導科學免疫，為科學防控提供理論依據(jù)和技術支持。

1 材料和方法

1.1 材料

春季待檢血清：2018年5月分別采集自馬鞍山市四個縣（區(qū)）的8個規(guī)模化家禽養(yǎng)殖場，每場30份血清。秋季待檢血清：2018年11月分別采集自馬鞍山市四個縣（區(qū)）的7個規(guī)?；仪蒺B(yǎng)殖場，其中6場每場30份，1場27份血清。

紅細胞混懸液：采集未免疫禽流感、新城疫疫苗的3只健康公雞血加入阿氏液混勻，用pH7.2的0.01mol/LPBS液離心洗滌3次，去掉上層白細胞，再用同-PBS液配制1%紅細胞混懸液并4℃冰箱保存。

檢測試劑：新城疫病毒血凝抑制試驗抗原購于哈爾濱國生生物，生產批號：2017052、2180607；禽流感病毒H5亞型血凝抑制試驗抗原購于哈獸研和哈爾濱維科生物，生產批號：2017001、2018003；禽流感病毒H7亞型血凝抑制試驗抗原購于哈獸研和哈爾濱國生生物，生產批號：2017012、20180815。

1.2 儀器與耗材

Eppendorf移液器、96孔V型微量反應板、微型振蕩器、普通高速離心機。

1.3 檢測方法

依據(jù)《新城疫診斷技術》（GB/T16550-2008）、《高致病性禽流感診斷技術》（GB/T18936-2003）中血凝抑制（AI）試驗檢測。

1.4 結果判定

新城疫以完全抑制5個HAU抗原的血清最高稀釋倍數(shù)作為HI效價。HI<5log2判定為陰性，HI≥5log2判定為陽性。禽流感以完全抑制4個HAU抗原的血清最高稀釋倍數(shù)作為HI效價。HI<4log2判定為陰性，HI≥4log2判定為陽性。

2 結果

對全年采集的15個規(guī)?；仪蒺B(yǎng)殖場共447份家禽血清進行新城疫免疫抗體、禽流感H5亞型免疫抗體、禽流感H7亞型免疫抗體檢測。2018年春季免疫抗體檢測結果見表1和圖1，秋季免疫抗體檢測結果見表2和圖2。

根據(jù)圖表可知，春季集中免疫中，新城疫免疫抗體合格率達國家標準（70%）有7家，其中合格率100%的有5家；禽流感H5亞型免疫抗體合格率全部達國家標準，其中合格率100%的有6家；禽流感H7亞型免疫抗體合格率達國家標準的有7家，其中合格率100%的有6家。全市平均抗體合格率分別是83%、95%、87%。各有一個養(yǎng)殖場沒有形成新城疫抗體和禽流感H7亞型抗體。

秋季集中免疫中，新城疫免疫抗體合格率全部達到國家標準，其中合格率100%的有5家；禽流感H5亞型免疫抗體合格率全部達到國家標準，其中合格率100%的有5家；禽流感H7亞型免疫抗體合格率達國家標準有6家，其中合格率100%的有5家。全市平均抗體合格率分別是97%、99%、86%。有一個養(yǎng)殖場沒有形成禽流感H7亞型抗體。

表1 春季家禽新城疫、禽流感H5亞型、禽流感H7亞型免疫抗體檢測結果

圖1 春季家禽新城疫、禽流感H5亞型、禽流感H7亞型免疫抗體合格率

表2 秋季家禽新城疫、禽流感H5亞型、禽流感H7亞型免疫抗體檢測結果

圖2 秋季家禽新城疫、禽流感H5亞型、禽流感H7亞型免疫抗體合格率

3 討論

開展抗體監(jiān)測的目的不僅僅是診斷，更主要的是評價雞群的免疫狀況，并根據(jù)其監(jiān)測結果對免疫方案進行適當?shù)恼{整或提供一些預警。本次對馬鞍山市四個縣（區(qū)）的15個規(guī)模化家禽養(yǎng)殖場共447份家禽血清進行了集中檢測，初步掌握了2018年馬鞍山市新城疫、禽流感H5亞型、禽流感H7亞型的抗體水平和免疫狀況。

根據(jù)新城疫抗體檢測結果可知，本次檢測的447份血清有47份抗體水平不合格，其中有30份均來自H場。新城疫不屬于強制免疫病種，該規(guī)模場沒有免疫新城疫疫苗，存在新城疫感染的風險和發(fā)病的可能。國內曾發(fā)生過新城疫疫情[4]，建議該場加強免疫，防止疫情發(fā)生。

由禽流感H5亞型抗體檢測結果可知，15家規(guī)模場免疫抗體水平均達到國家標準，13家規(guī)模場免疫水平超過90%。表明禽流感H5亞型疫苗在我市家禽中免疫效果好，免疫程序有效，抗體水平較高，家禽受禽流感H5亞型病毒抗體保護。

由禽流感H7亞型抗體檢測結果可知，13家規(guī)模場免疫抗體水平超過90%，說明政府提供的禽流感H5+7二聯(lián)苗是起到抗體保護作用的，楊澤林[5]等人的實驗結果也驗證了這一點。另外兩家規(guī)模場幾乎未產生禽流感H7亞型抗體，可能在新舊疫苗交替期間沒有免疫二聯(lián)苗。

秋季集中免疫與春季集中免疫抗體檢測結果對比可知，新城疫抗體水平和禽流感H5免疫抗體水平有所提升，可能與下半年免疫次數(shù)多，免疫周期長等因素有關[6]。

檢測結果表明，我市對春秋兩季集中免疫工作重視程度較高，免疫效果較好。為了進一步做好集中監(jiān)測工作，對于重點疫病要及時開展免疫效果監(jiān)測和評價，及時掌握免疫狀態(tài)，及時處理免疫不達標、免疫失敗等情況。后期應該擴大監(jiān)測范圍，更科學地指導制定免疫程序，保障免疫效果[7]。