李 歡
(鳳城市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心,遼寧鳳城 118100)
桑白皮為??浦参锷orus alba L.的干燥根皮,性甘、寒,具有瀉肺平喘、利水消腫的功能,主治肺熱喘咳、水腫脹滿尿少、面目肌膚浮腫等。研究表明,復(fù)方靈尼膠囊提取物Ⅳ(每1g提取物相當(dāng)于5.39g生藥,由君藥桑白皮,臣藥穿心蓮和姜黃,佐藥黃芪和黃芩,使藥甘草組合而成)對(duì)環(huán)孢素A導(dǎo)致的小鼠T淋巴細(xì)胞亞群抑制模型具有顯著的治療作用。
選擇1 日齡的AA肉雞公雛270只,隨機(jī)分為3組,每組設(shè)6個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)15只。對(duì)照組為基礎(chǔ)日糧組,試驗(yàn)組分別在基礎(chǔ)日糧的基礎(chǔ)上添加0.5%、1%的桑白皮。
試驗(yàn)動(dòng)物籠養(yǎng),試驗(yàn)籠為四層全重疊式育雛籠,自由采食和飲水,控制舍內(nèi)溫度、濕度和光照,衛(wèi)生學(xué)指標(biāo)符合肉雞的衛(wèi)生要求。
參照NRC《雞營(yíng)養(yǎng)需要》。
2.4.1 樣品采集
分別于21、42日齡從每個(gè)重復(fù)里隨機(jī)抽取2羽雞,心臟采血,分離血清,測(cè)定血清免疫球蛋白IgA、IgG、IgM含量。
2.4.2 測(cè)定方法
(1)材料、試劑及配制
采用免疫比濁法,在紫外可見分光光度計(jì)上進(jìn)行測(cè)定。試劑盒采用濰坊三維生物工程集團(tuán)有限公司生產(chǎn)的免疫球蛋白試劑盒,完全按試劑盒說明書進(jìn)行操作。
微量移液器、塑料試管、試管架、旋渦混勻器、冰箱、水浴鍋和日本島津UV-2401PC紫外可見分光光度計(jì)。
IgG試劑:反應(yīng)劑、抗血清液,混合為工作液
IgA試劑:反應(yīng)劑、抗血清液,混合為工作液
IgM試劑:反應(yīng)劑、抗血清液,混合為工作液
標(biāo)準(zhǔn)品
混勻,37℃溫育10min,波長(zhǎng)IgA/M 340nm,IgG為700nm處以工作液調(diào)零,測(cè)各管吸光度。
(2)結(jié)果計(jì)算:
以濃度為橫坐標(biāo),吸光度為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,由此查處標(biāo)本濃度。
2.5數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析
試驗(yàn)結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示,采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)分析軟件對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析桑白皮對(duì)肉雞血清IgA含量的影響。
不同處理對(duì)肉仔雞血清IgA含量影響見表2,21和42日齡時(shí),各處理組IgA水平差異不顯著(P>0.05),但相對(duì)于對(duì)照組,添加0.5%和1%的桑白皮,肉雞血清IgA水平均有提高趨勢(shì)。
表2 桑白皮對(duì)肉雞血清lgA水平的影響(μg/ml)
不同處理對(duì)肉仔雞血清IgM含量的影響見表3和42日齡時(shí),飼糧中添加1%和0.5%的桑白皮相對(duì)于對(duì)照組均顯著提高了肉雞血清IgM水平(P<0.05)。
表3 桑白皮對(duì)肉雞血清lgM水平的影響(μg/ml)
不同處理對(duì)肉仔雞血清IgG含量的影響見表4和42日齡時(shí),各處理組 IgG水平差異不顯著(P>0.05),但相對(duì)于對(duì)照組,添加0.5%和1%的桑白皮,肉雞血清IgG水平均有提高趨勢(shì)。
表4 桑白皮對(duì)肉雞血清lgG水平的影響(μg/ml)
本試驗(yàn)結(jié)果顯示,添加不同濃度桑白皮使肉雞血清IgM含量較對(duì)照組顯著提高,對(duì)IgG、IgA含量也有一定提高趨勢(shì),而證實(shí)了桑白皮能夠提高機(jī)體的體液免疫機(jī)能。