王苗苗,嚴(yán) 歡,田 合,毛瓊玲,張 倩,李慕春

(新疆維吾爾自治區(qū)分析測(cè)試研究院,新疆天然產(chǎn)物綠色加工工程技術(shù)研究中心,新疆烏魯木齊 830011)

薰衣草(LavandulaangustifoliaMill.)又名靈香草,唇形科薰衣草屬,原產(chǎn)于法國(guó)和意大利南部地中海沿海及非洲、西班牙等地,是一種珍貴的天然香料植物,其香氣清香肅爽、濃郁宜人[1-2]。經(jīng)過(guò)多年培植,薰衣草在天山腳下伊犁河畔形成規(guī)模。新疆伊犁哈薩克自治州,是中國(guó)薰衣草種植加工的主要產(chǎn)地,同時(shí)也是亞洲地區(qū)最大的香料生產(chǎn)基地。薰衣草作為維藥入藥已有多年的歷史,維吾爾醫(yī)用其治療腹脹胸悶、感冒咳喘、頭暈頭痛、心悸氣短,關(guān)節(jié)骨痛等[3-6]。薰衣草富含揮發(fā)油、黃酮、香豆素、單寧等,部分次生代謝物由植物防御機(jī)制產(chǎn)生,與其治療特性有關(guān)[7-8]。事實(shí)上,目前許多植物衍生的藥物正處于臨床試驗(yàn)階段,或者用于治療各種疾病。

研究表明薰衣草等藥用植物作為生物活性物質(zhì)的來(lái)源,比如天然抗氧化劑、抗老化劑等,越來(lái)越受到人們的重視。許多研究證明,天然抗氧化劑可以降低各種慢性疾病的風(fēng)險(xiǎn),如阿爾茨海默氏癥(AD)等[9-10]。雖然阿爾茨海默氏癥的發(fā)病機(jī)制尚不清楚,但目前可能的假設(shè)之一是由于海馬體和大腦皮質(zhì)缺乏乙酰膽堿所致[11-12]。在水解神經(jīng)遞質(zhì)乙酰膽堿的過(guò)程中,乙酰膽堿酯酶(ACHE)和丁酰膽堿酯酶(BCHE)扮演著重要的角色,因此,使用這些酶的抑制劑被認(rèn)為是一種有效的治療方法。黑色素可以防止紫外線對(duì)皮膚、頭發(fā)和眼睛造成傷害,但過(guò)量則與神經(jīng)退行性疾病如帕金森病有關(guān)[13-15]。酪氨酸酶是一種催化生成黑色素的酶,它的抑制劑可能對(duì)治療皮膚癌或其他與黑色素過(guò)度相關(guān)的皮膚病有益。然而,薰衣草對(duì)于乙/丁酰膽堿酯酶、酪氨酸酶抑制活性的研究鮮有報(bào)道。

基于此,本文研究薰衣草組分抗氧化活性及其對(duì)乙酰膽堿酯酶、丁酰膽堿酯酶、酪氨酸酶的抑制活性,為生物活性化合物的發(fā)現(xiàn)提供理論基礎(chǔ),為疾病的治療提供實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

無(wú)水乙醇、乙腈、甲醇 天津富宇精細(xì)化工有限公司;磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉、磷酸氫二鉀 天津市致遠(yuǎn)化學(xué)試劑有限公司;乙酸鈉 天津市福晨化學(xué)試劑廠;三氯化鐵、氫氧化鈉 天津盛奧化學(xué)試劑有限公司;硫酸亞鐵 西安化學(xué)試劑廠;三氯乙酸 天津市大茂化學(xué)試劑廠;1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)、2,4,6-三吡啶基三嗪(2,4,6-tripyridyl-s-triazine,TPTZ)、碘化硫代乙酰膽堿(Acetylthiocholine iodide,ATCI)、5,5′-二硫代雙(2-硝基苯甲酸)(5,5′-Dithiobis(2-nitrobenzoic acid),DTNB)、石杉?jí)A甲 阿拉丁試劑(上海)有限公司;抗壞血酸(Ascorbic Acid,VC) 鄭州市化學(xué)試劑三廠;乙酰膽堿酯酶(Acetyl cholinesterase,ACHE)、氯化丁酰巰基膽堿(Butyl mercaptocholine chloride,BUSCH)、左旋多巴(L-多巴) 西格瑪奧德里奇(上海)貿(mào)易有限公司;丁酰膽堿酯酶(Butyrylcholinesterase,BUCHE) 上海源葉生物科技有限公司;L-酪氨酸 天津市精細(xì)化工研究所;酪氨酸酶、曲酸 上海麥克林生化科技有限公司;總抗氧化能力檢測(cè)試劑盒A015 南京建成生物工程研究所;薰衣草干花 伊犁紫蘇麗人生物科技有限公司。

RT-02A碎樣機(jī) 北京開(kāi)創(chuàng)同和科技發(fā)展有限公司;TE612-L電子天平 賽多利斯科學(xué)儀器有限公司;XS-204電子天平 梅特勒-托利多儀器有限公司;LC-20AP島津制備液相、UV-2700紫外分光光度計(jì) 日本島津公司;數(shù)顯恒溫水浴鍋 上海博迅實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠;Synergy H1伯騰酶標(biāo)儀 美國(guó)伯騰儀器有限公司;Milli Q超純水系統(tǒng) 美國(guó)密理特公司;石英比色皿 大連市日普利科技儀器有限公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 薰衣草組分庫(kù)的制備 稱(chēng)取500.00 g薰衣草干花顆粒,不經(jīng)粉碎,加入8 L石油醚,浸泡1 h,80 ℃,冷凝回流提取1.5 h,多層紗布過(guò)濾,留濾渣;濾渣風(fēng)干后,加入8 L 70%乙醇溶液,80 ℃冷凝回流提取1.5 h,多層紗布過(guò)濾,重復(fù)提取一次,濾液合并。濾液于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中濃縮,真空冷凍干燥后,得到薰衣草提取物。

稱(chēng)5.00 g提取物用50 mL DMSO溶解后,得100 mg/mL溶液,通過(guò)島津制備液相制備不同的組分。

制備液相分析條件如下:YMC Triart Prep C18柱(50 mm×250 mm×10 μm);流動(dòng)相:以0.1%甲酸-水溶液為流動(dòng)相A相,以乙腈為流動(dòng)相B相;洗脫程序?yàn)?0～60 min,B由15%→25%;60～90 min,B由25%→30%;90～120 min,B由30%→60%;120～125 min,B由60%→15%;125～150 min,B由15%→15%;檢測(cè)波長(zhǎng)為280、254 nm;柱溫:40 ℃;手動(dòng)進(jìn)樣,進(jìn)樣量:2 mL;流速:40 mL/min;時(shí)間:150 min。采用餾分收集器收集洗脫液,每隔3 min收集一份,運(yùn)行一次得50個(gè)組分。重復(fù)進(jìn)樣20針,濃縮,凍干,得薰衣草組分庫(kù)(50個(gè)組分)。

分別稱(chēng)2.0 mg組分庫(kù)各樣品,用乙腈-水溶液溶解,定容至50 mL,配制成0.040 mg/mL的樣品液,用于試驗(yàn)分析。

1.2.2 DPPH自由基清除實(shí)驗(yàn) 參照文獻(xiàn)[16-17]方法。準(zhǔn)確稱(chēng)量1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)粉末14.2 mg,乙醇充分溶解配制成0.72 mmol/L儲(chǔ)備液,低溫避光保存;臨用前用乙醇稀釋為0.072 mmol/L使用。實(shí)驗(yàn)時(shí),樣品組(A1):于10 mL比色管中加入1.0 mL樣品液,再加入3.0 mL 72 μmol/L的DPPH溶液,充分混勻后,37 ℃避光反應(yīng)1 h,測(cè)定516 nm處吸光度值;樣品對(duì)照組(A2)使用異常替代DPPH,空白組(A0)使用乙醇替代樣品液?？箟难嶙鳛殛?yáng)性對(duì)照。樣品DPPH清除率的計(jì)算公式為:

DPPH清除率(%)=[1-(A1-A2)/A0]×100

1.2.3 鐵離子還原力測(cè)定(FRAP)實(shí)驗(yàn) FRAP工作液的配制:由300 mmol/L乙酸鈉溶液(pH=3.6)、10 mmol/L TPTZ溶液(由40 mmol/L配制)及20 mmol/L三氯化鐵溶液按體積比10∶1∶1配制而成,現(xiàn)用現(xiàn)配。配制好后置于37 ℃水浴中溫育備用。

標(biāo)準(zhǔn)曲線制作:準(zhǔn)確稱(chēng)取硫酸亞鐵粉末55.6 mg,超純水充分溶解后配制成4 mmol/L標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。使用前稀釋成0.001、0.005、0.010、0.025、0.100、0.200、0.400、0.500、0.750、1.000 mmol/L等不同濃度。分別取不同濃度硫酸亞鐵標(biāo)液200 μL于10 mL比色管中,加入配制好的FRAP工作液3.0 mL,加入超純水1.9 mL,充分混勻,室溫避光反應(yīng)50 min,測(cè)定596 nm處吸光度值,制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。超純水做空白對(duì)照[18-19]。

樣品測(cè)定:分別取各薰衣草樣品200 μL于10 mL比色管中,加入配制好的FRAP工作液3.0 mL,加入超純水1.9 mL,充分混勻,室溫避光反應(yīng)50 min,測(cè)定596 nm處吸光度值,由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相同吸光度值對(duì)應(yīng)的硫酸亞鐵濃度值,樣品還原力用硫酸亞鐵濃度(mmol/L)表示。抗壞血酸作為陽(yáng)性對(duì)照。

1.2.4 總抗氧化能力(T-AOC)測(cè)定 配制T-AOC工作液:按總抗試劑盒說(shuō)明書(shū)要求分別準(zhǔn)備好試劑1、2、3溶液,按體積比2∶4∶1充分混合,置于37 ℃水浴中溫育備用。

樣品測(cè)定:樣品組(A1):取0.1 mL樣品加入3.5 mL工作液,充分混勻后,37 ℃水浴避光反應(yīng)30 min,加入試劑4溶液0.1 mL,充分混勻后靜置10 min,測(cè)定520 nm處吸光度值,超純水做空白;對(duì)照組(A2)中樣品在加入試劑4溶液后再加入,其余操作同樣品組[20]。抗壞血酸作為陽(yáng)性對(duì)照。

總抗氧化能力單位:在37 ℃時(shí),每分鐘每毫升樣品液使反應(yīng)體系的吸光度(OD)值每增加0.01時(shí),為一個(gè)總抗氧化能力單位?？偪寡趸芰τ?jì)算公式如下:

總抗氧化能力(U/mL溶液)=(A1-A2)×3.7×1/0.01/30/0.1

式中:A1:樣品測(cè)定組吸光度;A2:樣品對(duì)照組吸光度;3.7:反應(yīng)液總體積,mL;1:樣品測(cè)試前稀釋倍數(shù);0.01:總抗氧化能力單位定義相關(guān)系數(shù);30:反應(yīng)時(shí)間,min;0.1:取樣量,mL。

1.2.5 總還原力測(cè)定 在10 mL比色管中加入0.5 mL樣品,加入2.5 mL PBS緩沖液(0.2 mol/L,pH=6.6),再加入2.5 mL 1%鐵氰化鉀溶液,50 ℃水浴20 min后,加入2.5 mL 10%三氯乙酸;3000 r/min離心10 min;取2.5 mL上清液于另一比色管中,加入2.5 mL超純水和0.5 mL 0.1%的三氯化鐵溶液,充分混合,靜置10 min后,于700 nm處測(cè)定吸光度值[21]。

1.2.6 乙酰膽堿酯酶抑制劑篩選試驗(yàn) 參照Ellman法進(jìn)行稍許修改,于96孔酶標(biāo)板上進(jìn)行樣品乙酰膽堿酯酶抑制活性實(shí)驗(yàn)[22-23]。具體操作如下:樣品組(A1):在96孔板中加入134 μL PB buffer(0.1 mol/L,pH=7.5)、4 μL 乙酰膽堿酯酶(ACHE,1 U/mL)和4 μL樣品液,4 ℃孵育20 min后,加入DTNB(10 mmol/L)和ATCI(10 mmol/L)各4 μL,37 ℃孵育20 min,在405 nm處測(cè)定吸光度值;樣品對(duì)照組(A2)使用4 μL PB buffer 替代4 μL ACHE,空白組(A3)使用4 μL PB buffer替代4 μL樣品液,完全抑制組(A4)使用4 μL 10 μg/mL石杉?jí)A甲替代4 μL樣品液。樣品乙酰膽堿酯酶活性抑制率計(jì)算公式如下:

抑制率(%)=[1-(A1-A2)/(A3-A4)]×100

1.2.7 丁酰膽堿酯酶抑制劑篩選試驗(yàn) 參照Ellman法進(jìn)行稍許修改,于96孔酶標(biāo)板上進(jìn)行樣品丁酰膽堿酯酶抑制活性實(shí)驗(yàn)[23-24]。具體操作如下:樣品組(A1):在96孔板中加入160 μL PB buffer(0.1 mol/L,pH=7.5)、10 μL 丁酰膽堿酯酶(BUCHE,1 U/mL)和10 μL樣品液,4 ℃孵育20 min后,加入DTNB(5 mmol/L)和BUSCH(5 mmol/L)各10 μL,37 ℃孵育20 min,在412 nm處測(cè)定吸光度值;樣品對(duì)照組(A2)使用4 μL PB buffer替代4 μL BUCHE,空白組(A3)使用4 μL PB buffer替代4 μL樣品液,完全抑制組(A4)使用4 μL 10 μg/mL石杉?jí)A甲 替代4 μL樣品液。樣品丁酰膽堿酯酶活性抑制率計(jì)算公式如下:

抑制率(%)=[1-(A1-A2)/(A3-A4)]×100

1.2.8 酪氨酸抑制活性研究

1.2.8.1 單酚酶抑制活性的測(cè)定 樣品組(A1):在96孔酶標(biāo)板上加入L-酪氨酸(0.5 mmol/L)50 μL,樣品液25 μL,混勻后37 ℃孵育5 min,加入酪氨酸酶50 μL(250 U/mL),混勻后37 ℃孵育25 min,于490 nm處測(cè)定吸光度值;樣品對(duì)照組(A2)使用50 μL PBS替代50 μL酪氨酸酶;空白組(A3)使用25 μL PBS替代25 μL樣品液;空白對(duì)照組(A4)使用25 μL PBS替代25 μL樣品液,并使用50 μL PBS(0.2 mmol/L,pH=6.8)替代50 μL酪氨酸酶[25-27]。使用10 μg/mL曲酸作為陽(yáng)性對(duì)照。抑制率計(jì)算公式如下:

抑制率(%)=[1-(A1-A2)/(A3-A4)]×100

1.2.8.2 二酚酶抑制活性的測(cè)定 樣品組(A1):在96孔酶標(biāo)板上加入L-多巴(0.5 mmol/L)50 μL,樣品液30 μL,混勻后37 ℃孵育5 min,加入酪氨酸酶25 μL(100 U/mL),混勻后37 ℃孵育25 min,于475 nm處測(cè)定吸光度值;樣品對(duì)照組(A2)使用25 μL PBS(0.2 mmol/L,pH=6.8)替代25 μL酪氨酸酶;空白組(A3)使用30 μL PBS替代30 μL樣品液;空白對(duì)照組(A4)使用30 μL PBS替代30 μL樣品液,并使用25 μL PBS替代25 μL酪氨酸酶。使用10 μg/mL曲酸作為陽(yáng)性對(duì)照。抑制率計(jì)算公式如下:

抑制率(%)=[1-(A1-A2)/(A3-A4)]×100

1.3 數(shù)據(jù)處理

所有試驗(yàn)均做3組平行,采用SPSS 17.0和Origin 8進(jìn)行數(shù)據(jù)分析處理,結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 薰衣草組分庫(kù)制備

對(duì)薰衣草組分庫(kù)進(jìn)行制備液相分析,結(jié)果如圖1,運(yùn)行時(shí)間150 min,每3 min收集一個(gè)餾分,獲得0～49號(hào)管,共50個(gè)組分。

圖1 薰衣草提取物的制備液相色譜圖

2.2 DPPH自由基清除率測(cè)定結(jié)果

DPPH是一種比較穩(wěn)定的自由基,其乙醇水溶液呈較深的紫色,在波長(zhǎng)516 nm處有強(qiáng)吸收,如果樣品中的抗氧化物質(zhì)可將其清除,則吸光將會(huì)減弱,可以根據(jù)吸光度值減少的程度來(lái)判斷樣品抗氧化能力的強(qiáng)弱。

對(duì)薰衣草組分庫(kù)的50個(gè)樣品進(jìn)行了DPPH自由基清除率測(cè)定,由表1可知,50個(gè)樣品對(duì)DPPH表現(xiàn)出了不同程度的清除作用。其中25#(90.29%±4.51%)、26#(93.95%±4.70%)、27#(92.42%±4.62%)、35#(93.39%±4.67%)、36#(92.96%±4.65%)組分對(duì)DPPH自由基的清除率達(dá)到90%以上,具有較高的清除DPPH自由基活性,與50 μg/mL陽(yáng)性化合物抗壞血酸(93.47%±4.67%)的清除率差異顯著(p<0.05)。其余組分的DPPH自由基清除率在15%～25%和55%～75%之間,由此可知,薰衣草組分庫(kù)的50個(gè)樣品對(duì)DPPH的清除作用明顯,抗氧化活性高。

2.3 FRAP測(cè)定結(jié)果

以FeSO4為標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(見(jiàn)圖2),得標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為A=0.9589C+0.0406,決定系數(shù)R2=0.999,由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出樣品吸光度值對(duì)應(yīng)的硫酸亞鐵濃度值(mmol/L),以此表示樣品的抗氧化能力。

圖2 FeSO4標(biāo)準(zhǔn)曲線

抗氧化物質(zhì)在酸性條件下可以將Fe3+-TPTZ還原成為藍(lán)色的Fe2+-TPTZ,之后在593 nm處測(cè)定吸光度,即可根據(jù)吸光度值大小判斷樣品抗氧化能力的大小。由表1可知26#(0.647±0.039 mmol/L FeSO4)、27#(0.499±0.030 mmol/L FeSO4)、36#(0.400±0.024 mmol/L FeSO4)組分的FRAP值均顯著高于陽(yáng)性對(duì)照10 μg/mL 抗壞血酸(0.387±0.023 mmol/L FeSO4)的FRAP值,具有較強(qiáng)的抗氧化活性,這與DPPH自由基清除率實(shí)驗(yàn)結(jié)果也具有一致性;但1#～8#、40#～50#組分的FRAP值小于0.1 mmol/L FeSO4,抗氧化活性弱;其余組分的FRAP值均在0.1～0.3 mmol/L FeSO4,抗氧化活性各不相同,但差異不顯著。

2.4 總抗氧化能力測(cè)定結(jié)果

對(duì)薰衣草組分庫(kù)中的50個(gè)樣品進(jìn)行總抗氧化能力的測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表1,26#(6.210±0.373 U/mL)、27#(3.575±0.214 U/mL)組分具有較高的總抗氧化能力值,均顯著(p<0.05)高于陽(yáng)性對(duì)照10 μg/mL抗壞血酸(2.602±0.156 U/mL);31#(2.427±0.146 U/mL)、35#(2.427±0.146 U/mL)組分總抗氧化能力值小于陽(yáng)性對(duì)照,具有較好的總抗氧化能力;10#～40#組分的總抗氧化能力雖各不相同,但都≥1 U/mL;其余個(gè)組分總抗氧化能力較弱。

2.5 還原力測(cè)定結(jié)果

還原力是抗氧化活性高低的一個(gè)重要指標(biāo)。樣品中的抗氧化物質(zhì)將反應(yīng)體系中的三價(jià)鐵離子還原成二價(jià)鐵離子,在波長(zhǎng)700 nm處具有強(qiáng)吸收,吸光度越高表明還原能力越強(qiáng)。由表1可知,26#(0.234±0.026)、27#(0.179±0.020)、35#(0.122±0.013)、36#(0.137±0.015)組分具有高的吸光度值,具有強(qiáng)的還原能力;陽(yáng)性對(duì)照100 μg/mL 抗壞血酸的吸光度(0.412±0.045),為這些組分的2～3倍;20#～25#吸光度在0.1000附近,還原能力次之;其余組分吸光度低,還原能力弱。通過(guò)DPPH、FRAP、T-AOC及還原力測(cè)定,可知組分庫(kù)中26#、27#、35#、36#組分具有高的抗氧化活性,具有成為天然抗氧化劑的潛能,可進(jìn)一步研究探索。

表1 抗氧化活性測(cè)定結(jié)果

2.6 膽堿酯酶抑制活性研究

對(duì)薰衣草組分庫(kù)中的50個(gè)樣品進(jìn)行了乙/丁酰膽堿酯酶抑制劑篩選試驗(yàn),結(jié)果見(jiàn)表2。由表2可知16#(66.37%±5.82%)、18#(69.73%±1.91%)、19#(68.20%±1.03%)、20#(74.98%±2.28%)、24#(60.83%±2.23%)、37#(76.37%±1.97%)組分乙酰膽堿酯酶抑制率均大于60%,抑制活性高。20#～40#組分的乙酰膽堿酯酶抑制活性顯著高于其它組分,抑制率在40%～60%之間。其余組分抑制活性低。薰衣草組分庫(kù)50個(gè)組分的丁酰膽堿酯酶抑制活性與乙酰膽堿酯酶抑制活性相比較低。其中24#(20.58%±3.71%)、25#(20.53%±2.97%)、39#(20.31%±3.48%)、43#(21.44%±2.16%)、46#(23.37%±3.69%)丁酰膽堿酯酶抑制率大于20%,其余各組分抑制率均小于20%,丁酰膽堿酯酶抑制活性普遍較低。其中24#對(duì)于乙酰膽堿酯酶和丁酰膽堿酯酶的綜合抑制活性顯著高于其他組分。

表2 乙酰膽堿酯酶抑制活性和丁酰膽堿酯酶抑制活性測(cè)定結(jié)果

2.7 酪氨酸抑制劑篩選

以L-酪氨酸為底物,對(duì)薰衣草組分庫(kù)中的50個(gè)組分進(jìn)行了酪氨酸酶單酚酶抑制活性研究,結(jié)果見(jiàn)表3。酪氨酸酶單酚酶抑制活性研究時(shí)需要較高活性的酪氨酸酶,薰衣草組分庫(kù)的各組分對(duì)單酚酶的抑制率普遍低于70%。其中16#(58.73%±4.18%)、17#(59.92%±0.69%)、18#(59.92%±0.69%)、19#(59.92%±0.69%)、20#(58.33%±1.19%)組分對(duì)酪氨酸酶單酚酶的抑制活性較高,與陽(yáng)性對(duì)照曲酸(67.86%±0.38%)的抑制率差異不顯著;其余各組分對(duì)酪氨酸單酚酶的抑制率均小于50%,抑制活性弱。

以L-多巴為底物進(jìn)行了薰衣草組分庫(kù)50個(gè)組分的酪氨酸酶二酚酶抑制活性篩選實(shí)驗(yàn)。薰衣草組分庫(kù)中組分對(duì)酪氨酸酶二酚酶的抑制活性普遍高于對(duì)酪氨酸酶單酚酶的抑制活性。由表3可知,1#～20#組分對(duì)酪氨酸酶二酚酶的抑制率幾乎均高于70%,其中16#(94.69%±2.65%)、17#(92.04%±2.34%)、18#(92.04%±0.88%)、19#(92.92%±0.00%)、20#(90.56%±2.55%)組分的酪氨酸酶二酚酶抑制活性比較高,與陽(yáng)性對(duì)照曲酸(92.92%±0.05%)的抑制率差異顯著(p<0.05);21#～50#組分的酪氨酸酶二酚酶抑制率較低,抑制活性弱。其中組分16#～20#對(duì)酪氨酸單/二酚酶抑制活性均較優(yōu),具有進(jìn)一步開(kāi)發(fā)研究的潛能。

表3 酪氨酸酶抑制活性測(cè)定結(jié)果

續(xù)表

3 結(jié)論

通過(guò)薰衣草抗氧化實(shí)驗(yàn),可以得知組分25#、26#、27#、35#、36#有較高的抗氧化活性,具有成為天然抗氧化劑的潛能;16#、17#、18#、19#、20#組分對(duì)膽堿酯酶和酪氨酸酶的抑制活性顯著(p<0.05),有開(kāi)發(fā)成為治療阿爾茨海默癥或皮膚癌等相關(guān)疾病藥物的潛能。研究表明,薰衣草含有的揮發(fā)油、黃酮、多酚、花色苷等物質(zhì)具有抗氧化活性,保護(hù)神經(jīng)系統(tǒng)、治療老年癡呆及美白的療效。由此可知,薰衣草提取物具有的抗氧化活性及抑制膽堿酯酶、酪氨酸酶活性可能是多種活性物質(zhì)共同作用的結(jié)果,仍需進(jìn)一步研究求證。在后續(xù)研究中,對(duì)于活性較好的組分,綜合運(yùn)用多種方法,設(shè)置多個(gè)濃度梯度,進(jìn)一步更精準(zhǔn)的考察、評(píng)價(jià)其抗氧化及酶抑制活性及相關(guān)的物質(zhì)基礎(chǔ)。