司富美　吳永坤　潘鑫　孔慶功　高恒　王妍

摘要建立了氣相色譜串聯(lián)質(zhì)譜（GC-MS/MS）定量和定性檢測蔬菜水果中甲拌磷、甲拌磷砜、甲拌磷亞砜、氟蟲腈、氟甲腈、氟蟲腈砜、氟蟲腈亞砜等7種農(nóng)藥多殘留量的方法。樣品中的待測農(nóng)藥組分經(jīng)乙腈提取，采用QuEChERS法為凈化方法，以外標(biāo)法進行定量，以氣相色譜一三重四級桿串聯(lián)質(zhì)譜多反應(yīng)檢測模式（MRM）檢測。結(jié)果表明，不同樣品的加標(biāo)回收率為73.2%～107.1%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.07%～3.19%，檢出限為0.002～0.010mg/kg。該方法準(zhǔn)確性高、重復(fù)性好、操作簡便，符合農(nóng)藥殘留分析的要求。

關(guān)鍵詞 氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜;農(nóng)藥殘留;QuEChERS法

中圖分類號 S481*.8

文獻標(biāo)識碼 A

文章編號 1007-5739（2019）05-0106-02

隨著人們食品安全意識的增強，蔬菜、水果等農(nóng)產(chǎn)品中的農(nóng)藥殘留問題也越來越多地受到重視"。有研究表明，菊酯類及有機磷農(nóng)藥等可引發(fā)癌癥、免疫系統(tǒng)及神經(jīng)系統(tǒng)疾病和激素功能破壞等健康問題。

甲拌磷：是一種有機磷類農(nóng)藥，為廣譜、內(nèi)吸、高毒殺蟲劑，主要用于防治地下害蟲、蚜蟲等3-4，在植物體內(nèi)能保持較長時間，要特別注意殘留毒性。氟蟲腈是一種苯基吡唑類殺蟲劑，殺蟲譜廣，相較于甲拌磷毒性稍低。甲拌磷、氟蟲腈使用后，受環(huán)境中諸多因素的影響而發(fā)生代謝，產(chǎn)生毒性更大的代謝物，甲拌磷產(chǎn)生甲拌磷砜和甲拌磷亞砜，氟蟲腈產(chǎn)生氟甲腈、氟蟲腈砜和氟蟲腈亞砜，其代謝物在環(huán)境中比較穩(wěn)定，殘效期更長。目前，人們已注意到甲拌磷、氟蟲腈在蔬菜水果中的殘留，而忽略了代謝物對環(huán)境和人體的影響。因此，深人了解甲拌磷、氟蟲腈使用后在蔬菜中的殘留降解行為，全面評價甲拌磷、氟蟲腈的生態(tài)環(huán)境行為很有必要。

文獻資料表明，國內(nèi)外關(guān)于蔬菜水果中甲拌磷、氟蟲腈的分析方法主要集中在氣相色譜法、氣相色譜_質(zhì)譜法、液相色譜法、液相色譜-質(zhì)譜法等15-10，而有關(guān)其代謝物分析檢測方法的研究報道較少。本文用三重串聯(lián)四級桿氣質(zhì)聯(lián)用儀（GC-MS/MS）同時檢測蔬菜中的甲拌磷、氟蟲腈及其代謝物等7種農(nóng)藥殘留。采用多反應(yīng)監(jiān)測模式（MRM）實現(xiàn)了一次進樣可對多種農(nóng)藥殘留進行準(zhǔn)確定量分析，提高了數(shù)據(jù)準(zhǔn)確度"。三重串聯(lián)四級桿氣質(zhì)聯(lián)用儀，是在GC-MS的基礎(chǔ)上增加了二級子離子的質(zhì)譜信息，可有效減少其他離子的干擾、降低本底噪音值，具有較強的抗干擾能力，增強了結(jié)構(gòu)解析和定性能力2。本文試驗中前處理方法采用QuEChERS法，該方法具有快速高效簡便、價格低廉等優(yōu)點。

1材料與方法

1.1儀器與材料

7890BGC/7000DQQQ三重四級桿型氣相色譜一_質(zhì)譜聯(lián)用儀（配EI源），由美國Agilent公司生產(chǎn);乙腈.乙酸乙酯均為色譜純，購自Fisher公司;無水硫酸鎂、氯化鈉均為分析純，由國藥集團生產(chǎn)，650C灼燒4h后，置于干燥器中備用;農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)溶液，1000μg/mL，1mU支，由農(nóng)業(yè)部環(huán)境質(zhì)量監(jiān)督檢測中心提供。PSA、C18、石墨化碳黑，由天津博納艾杰爾科技有限公司生產(chǎn)。

1.2樣品處理

1.2.1樣品提取。稱取樣品（可食部分）約500g于粉碎機中粉碎，高速勻漿，準(zhǔn)確稱取上述勻漿樣品10g于50mL離心管中，加人乙腈20mL，渦旋混勻后，超聲提取30min，加入氯化鈉5g，渦旋提取1min，以5000r/min離心5min，取離心上清液6mL于15mL離心管中，待凈化。

1.2.2樣品凈化。向離心管中加入PSA粉末0.4g、無水硫酸鎂4.0g、石墨化碳黑60mg，旋渦混合后，以5000r/min離心5min，取上清液1mL，在40°C真空下快速濃縮至近干。以1.0mL的色譜純乙酸乙酯定容，渦旋混合后，經(jīng)孔徑0.22μm的有機相微孔濾膜過濾，用于GC-MS/MS分析測定。因黃瓜、番茄、茄子的特性不同，凈化時選擇凈化填料的質(zhì)量不同。石墨化碳黑能有效吸附各種食品、蔬菜和水果中的葉綠素、類胡蘿卜素這類極性雜質(zhì)，減少了該類雜質(zhì)對儀器和色譜柱的污染;而黃瓜基質(zhì)相對干凈，所以不加石墨化碳黑。

1.2.3標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制。將農(nóng)藥甲拌磷、甲拌磷砜、甲拌磷亞砜、氟蟲腈氟甲腈、氟蟲腈亞砜、氟蟲腈砜標(biāo)準(zhǔn)溶液分別移人10.0mL容量瓶中，正已烷定容，得100.0μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液，再進一步稀釋成10.0μg/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)儲備液。

1.2.4加標(biāo)樣品的制備。分別精確稱取經(jīng)過測定不含有待測農(nóng)藥的黃瓜.番茄、茄子10.00g（空白樣品）7份于50mL離心管中，按1.2.1和1.2.2操作旋轉(zhuǎn)蒸干后，分別加入10.50、100、200、500，800、1000μL濃度為1.0μg/mL的農(nóng)藥混合標(biāo)準(zhǔn)使用液，用正已烷定容至2.0mL，得0.01、0.05、0.100.20、0.50、0.80、1.00μg/mL的含基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)系列溶液。

1.3儀器條件

色譜柱為AgilentHP-5MS（30mx0.25mm，0.25μm）;恒流模式，流速為1.2mL/min;進樣口溫度250C;載氣為氦氣（He），純度9.999%9;柱溫初始溫度50C;進樣量1μL;溶劑延遲3min.EI離子源溫度230C;EI源能量為71eV;燈絲電流為35μA;輔助加熱器280C;四級桿溫度：150C;淬滅氣體（He）流量2.3mL/min，碰撞氣氣體（N2）流量1.5mL/min。2結(jié)果與分析

2.1各化合物質(zhì)譜條件優(yōu)化

該方法檢測代謝組分中有同分異構(gòu)體，碎片離子接近或相同，在1.3設(shè)定的儀器條件下，運用Scan模式對7種組分進行全掃描，確定目標(biāo)農(nóng)藥組分豐度高且質(zhì)量數(shù)較大的離子作母離子，然后選擇MRM模式，在0～50eV之間調(diào)節(jié)碰撞能量，選取豐度較高的2個離子分別作為定量和定性離子，并確定最佳碰撞能量。采用最佳MRM條件對待測組分進行定性和定量分析，結(jié)果見表1。

2.2標(biāo)準(zhǔn)色譜圖

按表1確定的各農(nóng)藥質(zhì)譜參數(shù)，對7種農(nóng)藥的0.1μg/mL混合標(biāo)準(zhǔn)溶液進行GC-MS/MS測定分析，得到7種農(nóng)藥的總離子流色譜圖（圖1）。

2..3標(biāo)準(zhǔn)曲線及檢出限

按照1.3確定的儀器色譜、質(zhì)譜條件和表1確定的農(nóng)藥質(zhì)譜參數(shù)進行測定，以各農(nóng)藥峰面積相對應(yīng)的溶液濃度繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。7種農(nóng)藥線性范圍、回歸方程及相關(guān)系數(shù)見表2?？梢钥闯?，7種農(nóng)藥在質(zhì)量濃度0.01～1.00μg/mL之間線性關(guān)系良好，且線性相關(guān)系數(shù)均大于0.996;以各標(biāo)準(zhǔn)品色譜峰信噪比S/N>3計算得到的檢出限遠低于國家規(guī)定的農(nóng)藥最高殘留限量標(biāo)準(zhǔn)（MRL）。上述結(jié)果表明，該檢測方法完全能夠滿足日常蔬菜水果中農(nóng)藥多殘留的檢測要求。

2.4回收率試驗

稱取黃瓜、番茄、茄子樣品若干份，分別在0.03、0.05、0.10、0.50μg/mL4個添加水平上做氟蟲腈及其代謝物、甲拌磷及其代謝物的加標(biāo)回收試驗，每個添加濃度水平設(shè)定6個重復(fù)，按1.2.1和1.2.2方法進行前處理，并上機分析，得到平均回收率及精密度，結(jié)果見表3。可以看出，7種農(nóng)藥的平均加標(biāo)回收率在73.2%～107.1%之間，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差在0.07%～3.19%之間，均在正常范圍內(nèi)。說明該方法具有較好的回收率和精密度，符合蔬菜水果中農(nóng)藥殘留的分析要求。針對各種復(fù)雜樣品的基質(zhì)效應(yīng)問題，采用多反應(yīng)監(jiān)測（MRM）通過三重四級桿的選擇作用，，使基質(zhì)中大部分離子不被選擇，噪聲大大降低，基質(zhì)效應(yīng)減弱，信噪比增加，靈敏度提高。

3結(jié)論

本文針對不同蔬菜基質(zhì)的特點，選用不含待測農(nóng)藥的蔬菜建立了7種農(nóng)藥的氣相色譜一三重四級桿質(zhì)譜聯(lián)用的檢測方法，進行基質(zhì)加標(biāo)回收試驗。結(jié)果表明，該方法快速、準(zhǔn)確靈敏度高，能夠滿足蔬菜中農(nóng)藥殘留的測定要求，具有一定的應(yīng)用價值。

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