謝庭輝

摘要為充分利用山銀花，避免資源浪費(fèi)及環(huán)境污染，本文通過(guò)單因素及正交試驗(yàn)，采用浸提法考察了微波預(yù)處理時(shí)間提取溫度、提取時(shí)間及料液比對(duì)山銀花莖中綠原酸提取效果的影響。經(jīng)紫外分光光度計(jì)檢測(cè)，確定最佳提取條件為微波預(yù)處理時(shí)間60s、提取時(shí)間60min、提取溫度78C，料液比1：30。在最佳工藝條件下，對(duì)比了山銀花莖與花中綠原酸的含量差異，表明莖中綠原酸含量為花中的26.47%，為合理利用山銀花奠定了技術(shù)及理論基礎(chǔ)。

關(guān)鍵詞 山銀花莖;微波輔助;綠原酸;提取工藝

中圖分類號(hào) TS201.1

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A

文章編號(hào) 1007-5739（2019）05-0227-02

山銀花為忍冬科植物，主產(chǎn)于南方"?，F(xiàn)市場(chǎng)對(duì)山銀花的主要應(yīng)用為以其花蕾或初開(kāi)的花人藥2或提取綠原酸一種發(fā)揮抗炎、抗病毒的主要活性物質(zhì)。本文在可持續(xù)發(fā)展的原則下，基于相關(guān)文獻(xiàn)的調(diào)查，通過(guò)單因素及正交試驗(yàn)，采用浸提法探索山銀花莖中綠原酸的較佳提取工藝，并與山銀花中綠原酸含量比較，分析莖與花中綠原酸的含量差異，以期緩解綠原酸的市場(chǎng)需求、降低成本，對(duì)充分、合理利用山銀花具有重要意義。

1材料與方法

1.1儀器與材料

紫外分光光度計(jì)（TU-1810S）;數(shù)顯恒溫水浴鍋（HS11-3S）;粉粹機(jī)（CS-700）;微波爐（MM823LA6-2S）;電子天平（YP10002）;綠原酸標(biāo)樣，合肥博美生物公司;乙醇（分析純）;市售山銀花干品。

1.2標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)定

將綠原酸標(biāo)準(zhǔn)品用蒸餾水配制成濃度為0.1mg/mL的母液，準(zhǔn)確量取母液0.0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL，分別用蒸餾水定容至10mL容量瓶中，以蒸餾水作參比液，在327.0nm波長(zhǎng)下，于紫外分光光度計(jì)中掃描測(cè)定不同濃度下待測(cè)液的吸光度。

1.3山銀花莖中綠原酸的提取

從市售山銀花干品中分離出山銀花莖，粉碎過(guò)55目篩待用。每次稱取樣品1.0g浸潤(rùn)到70%乙醇中10min，再進(jìn)行微波預(yù)處理，將處理后的山銀花莖移至100mL燒瓶中，加液，恒溫提取，將提取液抽濾，加蒸餾水定容至100mL容量瓶中，再量取1.0mL定容至10mL容量瓶中，于327.0nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度。

1.4單因素試驗(yàn)優(yōu)化方案

在固定其他因素（初始條件為溫度609C、時(shí)間60min、料液比1：25）的條件下，進(jìn)行單因素考察：微波預(yù)處理時(shí)間為0、20.4060、80s;提取時(shí)間為30、40、50、60、70min;提取溫度為40、50、60、70、78C;料液比為1：15、1：20、1：25、1：30、1：35，水浴加熱，將提取液定容，分別測(cè)定吸光度。

1.5正交試驗(yàn)優(yōu)化方案

根據(jù)單因素試驗(yàn)結(jié)果，對(duì)試驗(yàn)的4個(gè)因素各取3個(gè)水平，進(jìn)行Lg（34）正交試驗(yàn)，具體如表1所示，以吸光度作為指標(biāo)考察。

2結(jié)果與分析

2.1標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制

以綠原酸標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為橫坐標(biāo)，以吸光度為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到回歸方程Y=0.0585X+0.0031，R2=0.9999，說(shuō)明線性關(guān)系良好。

2.2單因素試驗(yàn)

在微波預(yù)處理時(shí)間60s提取時(shí)間60min提取溫度789C、料液比1：30條件下，提取效果較佳，吸光度為0.246，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)得實(shí)際濃度為4.152μg/mL。

2.3正交試驗(yàn)

2.3.1提取條件。在單因素試驗(yàn)結(jié)果的基礎(chǔ)上，對(duì)影響因素進(jìn)行正交試驗(yàn)（表2）。

經(jīng)對(duì)K值的分析可得，較優(yōu)工藝組合為A2B2C3D2，即微波預(yù)處理時(shí)間60s，提取時(shí)間60min，提取溫度78C，料液比1：30.4個(gè)因素極差大小為Rp>Rp>Rx>Rco由此可知，在山銀花莖中綠原酸的提取工藝中，影響最大的為提取時(shí)間，其次為料液比及微波預(yù)處理時(shí)間，最后是提取溫度。

2.3.2最優(yōu)條件。在正交試驗(yàn)的最佳條件下，進(jìn)行山銀花莖及花中綠原酸的提取，結(jié)果表明，最優(yōu)條件下山銀花莖中綠原酸吸光度平均值為0.259，測(cè)得莖中綠原酸實(shí)際含量為4.203mg/g，是花中綠原酸含量（吸光度平均值0.932，實(shí)際含量為15.879mg/g）的26.47%。

3結(jié)論與討論

本研究以山銀花莖為研究對(duì)象，采用微波輔助浸提法提取山銀花莖中的綠原酸，并進(jìn)行I2（3*）正交試驗(yàn)，確定了綠原酸的最佳提取工藝為微波預(yù)處理時(shí)間60s、提取時(shí)間60min.提取溫度789C、料液比1：30。在此方法下，進(jìn)行重復(fù)性試驗(yàn)，結(jié)果表明，山銀花莖中綠原酸含量較高，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)得綠原酸含量為4.203mg/g，是山銀花花中綠原酸含量的26.47%。本提取方法可為合理利用山銀花、避免資源浪費(fèi)奠定技術(shù)及理論基礎(chǔ)。

4參考文獻(xiàn)

[1]肖美鳳，劉文龍，周晉，等.金銀花和山銀花的研究現(xiàn)狀及質(zhì)量控制的關(guān)鍵問(wèn)題[J].中草藥，2018，49（20）：4905-4911.

[2]文慶，舒畢瓊，丁野，等.金銀花與山銀花的資源分布和種植技術(shù)發(fā)展概況[J].中國(guó)藥業(yè)，，2018，27（2）：1-5.

[3]蘇占軍，鄒金鑫，龍來(lái)早，等.山銀花綠原酸的提取工藝[J].貴州農(nóng)業(yè)科學(xué)，2018，46（9）：133-135.

[4]羅艷，趙薇，涂曉琴，等山銀花提取物定性定量方法考察[J].中國(guó)藥師，2018，21（8）：1477-1479.

[5]劉欣，陳玉保，胡佑帆，等山銀花綠原酸提取方法的比較[J].化學(xué)與生物工程，2015，32（4）：67-70.

[6]涂曉琴，楊柳，羅艷.高效液相色譜法測(cè)定山銀花提取物中7種有機(jī)酸的含量[J].食品安全質(zhì)量檢測(cè)學(xué)報(bào)，2018，9（10）：2457-2462.