朱浙輝　鞏發(fā)永

摘 要：為了優(yōu)化油葵餅粕中綠原酸的醇提工藝，探討浸提時(shí)間、浸提溫度、固液比對(duì)綠原酸提取率的影響。結(jié)果表明：在試驗(yàn)條件限定的范圍內(nèi)，對(duì)浸提率影響的主次順序?yàn)闇囟?固液比>時(shí)間。根據(jù)各因素不同水平下的綠原酸提取率可知，浸提時(shí)間30 min、溫度60℃、固液比1：40最合適。

關(guān)鍵詞：綠原酸 油葵餅粕 乙醇 浸提

中圖分類(lèi)號(hào)：Ts275 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1672-3791（2015）07（a）-0123-02

綠原酸是一種有著廣泛生物活性的苯丙素類(lèi)化合物，有一定的抗菌、抗病毒、降壓降脂、抗衰老和抗腫瘤等生物活性、藥理作用[1-3]，在食品生產(chǎn)、日用化妝等行業(yè)還可作為酚型抗氧化劑使用，有較高的應(yīng)用價(jià)值[4]。國(guó)外提取綠原酸，原料多為咖啡豆、金銀花等，價(jià)格偏高，資源也較少[5]。油葵（油用向日葵）是我國(guó)重要的油料作物，綠原酸含量較高，約為2.0%～3.5%[1，6]。從油葵餅粕中提取綠原酸可以增加油葵的綜合利用價(jià)值，促進(jìn)油葵產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器設(shè)備

TU-1901紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)（北京普析通用）；BS224S電子分析天平（德國(guó)賽多利斯）；TE601-L電子天平（德國(guó)賽多利斯）；SHZ-III循環(huán)水真空泵（上海亞榮）；恒溫水浴鍋（上海一恒）；ELIX5純水機(jī)（美國(guó)Millipore）；WK-150小型超微粉碎機(jī)（青州市精誠(chéng)機(jī)械）；Research Plus單道可調(diào)量程移液器（德國(guó)Eppendorf）；浸提設(shè)備和常規(guī)玻璃儀器。

1.2 材料試劑

油葵籽脫脂餅粕（產(chǎn)地四川，干燥脫脂粉碎備用）；綠原酸標(biāo)準(zhǔn)品（25%，金銀花提取物）；95%乙醇（分析純）。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 波長(zhǎng)掃描

波長(zhǎng)的選擇：精密稱(chēng)取0. 0200g綠原酸標(biāo)準(zhǔn)品，用95%乙醇定容至50 mL，作為儲(chǔ)備液，濃度為0.4 mg/mL。從中準(zhǔn)確吸取1.0 mL定容至25 mL。用紫外分光光度計(jì)對(duì)溶液進(jìn)行光譜掃描，根據(jù)波長(zhǎng)掃描圖確定最高吸收峰對(duì)應(yīng)的波長(zhǎng)值為328 nm。

1.3.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線

從儲(chǔ)備液中分別移取1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5 mL用95%乙醇定容于25 mL容量瓶中，得到濃度分別為0.016mg/mL、0.024、0.032、0.040、0.04、0.056 mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液。以空白作參比，于波長(zhǎng)328 nm處測(cè)定標(biāo)液系列吸光度。并以吸光度X為縱坐標(biāo)，綠原酸濃度Y為橫坐標(biāo)，由計(jì)算機(jī)生成標(biāo)準(zhǔn)曲線并得出相關(guān)系數(shù)為R2=0.9984，得到回歸方程為Y=9.1975X-0.0045。

1.3.3 樣品分析

稱(chēng)取5.0 g樣品，加入一定量乙醇溶液在設(shè)定條件下提取、過(guò)濾，得到濾液并定容至100 mL，用移液器精密吸取50 μL，按1.3.2方法測(cè)定，并按照公式計(jì)算試驗(yàn)后綠原酸提取率：綠原酸提取率=×100%

1.3.4 乙醇浸提的單因素試驗(yàn)

單因素試驗(yàn)，分別以浸提時(shí)間、固液比、浸提溫度這三個(gè)因素的五個(gè)水平進(jìn)行試驗(yàn)設(shè)計(jì)，從而確定各因素在試驗(yàn)條件下的最佳浸提水平，確定固液比和溫度，時(shí)間設(shè)為15、20、25、30、35 min；確定時(shí)間和溫度，固液比設(shè)為1：30、1：40、1：50、1：60、1：70；確定時(shí)間和固液比，溫度設(shè)為40、50、60、70、80 ℃。

1.3.5 正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)

在提取條件單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，對(duì)浸提時(shí)間、固液比、浸提溫度進(jìn)行試驗(yàn)設(shè)計(jì)，因素情況見(jiàn)表1。

2 結(jié)果與討論

2.1 單因素提取設(shè)定對(duì)綠原酸提取情況的影響

2.1.1 浸提時(shí)間設(shè)定試驗(yàn)

由圖2可明確看出，在一定的固液比和浸提溫度條件下，且在一定的范圍內(nèi)，綠原酸提取率和浸提時(shí)間呈正相關(guān)，并在浸提30min后達(dá)到最大值，之后隨著時(shí)間的延長(zhǎng)溶解已趨飽和。在一定時(shí)間內(nèi)，增加浸提時(shí)間，綠原酸含量呈正相關(guān)比例增加；不過(guò)隨著時(shí)間的繼續(xù)增加，綠原酸會(huì)氧化分解，不適合繼續(xù)操作。

2.1.2 固液比設(shè)定試驗(yàn)

由圖3可看出，在相同的浸提溫度和浸提時(shí)間下，在一定范圍內(nèi)，綠原酸提取情況與固液比呈正相關(guān)，且在固液比為1：40時(shí)，綠原酸提取達(dá)到峰值，以后隨著固液比的增加提取率變化不大，且繼續(xù)提高固液比，提取液蒸發(fā)比例高，會(huì)導(dǎo)致溶劑成本增加。

2.1.3 浸提溫度設(shè)定試驗(yàn)

由圖4 可看出，在相同的浸提時(shí)間和固液比下，在一定范圍內(nèi)，綠原酸的提取率與浸提溫度呈正相關(guān)，且在浸提溫度在60℃時(shí)達(dá)到最大值，隨著溫度繼續(xù)增加提取率有所下降，提取率受溫度影響顯著。升高溫度，分子熱運(yùn)動(dòng)加快，溶解度增加。不過(guò)綠原酸具有熱敏性，高溫會(huì)導(dǎo)致其發(fā)生分解，并造成有機(jī)溶劑快速揮發(fā)。

2.2 正交試驗(yàn)結(jié)果比較

正交試驗(yàn)安排及結(jié)果見(jiàn)表2，各設(shè)定因素對(duì)綠原酸提取情況影響的主次順序?yàn)闇囟醛児桃罕醛儠r(shí)間，其最優(yōu)組合是A3B2C1，即浸提時(shí)間30 min、溫度60℃、固液比1：40最合適。

3 結(jié)語(yǔ)

在乙醇浸提單因素設(shè)定試驗(yàn)的數(shù)據(jù)上，通過(guò)正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)優(yōu)化浸提條件為：時(shí)間30 min、溫度60℃、固液比1：40。該方法具有操作比較簡(jiǎn)單、提取時(shí)間較短、浸提條件溫和等特點(diǎn)。從油葵餅粕中提取綠原酸，很好的解決了油葵的綜合利用問(wèn)題，創(chuàng)造出附加產(chǎn)值，具有應(yīng)用前景。

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