肖文敏 馮婷婷 高天 王靈麗
摘要:采用分光光度法對干燥苦菜中維生素C(Vc)提取條件進(jìn)行了探索.結(jié)果表明:葉的Vc含量最高,莖的Vc含量稍高于根的,以乙醇為提取劑時,苦菜中提取Vc的最佳實(shí)驗(yàn)溫度為30℃,最佳提取時間為40min.甲醇為提取劑時其最佳提取時間為60min.甲醇為最佳的苦菜中提取Vc的提取劑.
關(guān)鍵詞:分光光度法;苦菜;維生素C
中圖分類號:O642.1+1? 文獻(xiàn)標(biāo)識碼:A? 文章編號:1673-260X(2019)01-0037-03
維生素C(Vc)又稱抗壞血酸[1-4],是高等靈長類動物與其他少數(shù)生物的必須營養(yǎng)素.Vc的藥效基團(tuán)是抗壞血酸離子,最廣為人知的是缺乏Vc會造成維生素C缺乏癥.Vc不但是知名度最高的營養(yǎng)素,更是抗氧化、保護(hù)細(xì)胞,甚至是有效抗癌的維生素.Vc能阻斷致癌物亞硝酸銨的形成,從而達(dá)到抗癌的效果.苦菜[5-6]是較為常見的一種植物,分布于中國的北部、東部和南部.苦菜中含有豐富的胡蘿卜素、Vc、鈣鹽、鉀鹽等,具有較高的食用價值,苦菜具有清熱解毒、涼血、止痢等功效.苦菜茶作為純天然綠色的有機(jī)保健品,對于現(xiàn)代人的亞健康癥狀,有著顯著的效果.因分光光度法靈敏度高、儀器簡單、選擇性好、樣品用量少和測量速度快等優(yōu)點(diǎn).為研究苦菜中Vc的藥用作用提供了條件,本文采用分光光度法對不同溫度,提取時間,提取劑,苦菜不同部位[7],對苦菜中的Vc的提取影響做了探討,為研究苦菜的藥用價值提供一些依據(jù).
1 實(shí)驗(yàn)部分
1.1 材料
原料:自然晾干的野生苦菜(赤峰學(xué)院院內(nèi)).
主要試劑:抗壞血酸(AR),甲醇(AR),乙醇(AR).
1.2 儀器
TU-1810SPC型紫外可見分光光度計(北京普析通用儀器有限責(zé)任公司),SYC-15B超級恒溫水?。暇┥A㈦娮釉O(shè)備廠),電子天平(TP-214),棕色容量瓶(100ml).
1.3 實(shí)驗(yàn)方法
1.3.1 維生素C標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備
在電子天平上準(zhǔn)確稱取0.1gVc樣品,置于100ml棕色容量瓶中,加入煮沸并冷卻的蒸餾水,定容至刻度線,質(zhì)量濃度為1g/L.用吸量管分別吸取10、12.5、16.7、20和25ml到6個潔凈的100ml棕色容量瓶中,定容到刻度線.
1.3.2 樣品處理
將苦菜進(jìn)行清洗并曬干,分別稱取切碎的根、莖、葉1.00g,放入100ml棕色容量瓶中,加入提取劑乙醇(甲醇)并定容,作為儲備液.吸取3ml的儲備液進(jìn)行紫外掃描,根據(jù)吸光度值計算出Vc的質(zhì)量濃度.
2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論
2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線
利用紫外分光光度計以Vc濃度為橫坐標(biāo),吸光度為縱坐標(biāo)繪制了Vc的標(biāo)準(zhǔn)曲線如圖1所示.在我們所配制的濃度范圍內(nèi),Vc溶液濃度隨著吸光度呈線性變化,線性方程為:y=9.759x+0.0648,線性相關(guān)系數(shù)為:R=0.997,線性良好.
2.2 苦菜不同部位(根、莖、葉)對反應(yīng)的影響
苦菜雖為綠色,因本實(shí)驗(yàn)將苦菜曬干作為原材料,提取液顏色很淺,那么顏色對實(shí)驗(yàn)誤差的影響較小,因此未做脫色處理,直接取提取液測量其吸光度.
為了考察苦菜哪個部位含有的Vc含量更高,室溫下,分別將根、莖、葉稱取1g加入提取劑乙醇100ml,靜置一段時間,取上層清液測其吸光度,測量結(jié)果如圖2所示,葉的Vc含量最高,莖的Vc含量稍高于根的.由標(biāo)準(zhǔn)曲線準(zhǔn)確測量出根、莖、葉的Vc含量分別為0.072g/L,0.034g/L,0.033g/L,說明葉子的Vc含量最高,是根和莖的約2.1倍之多.
2.3 溫度對反應(yīng)的影響
為了考察溫度對Vc提取量的影響,本文以乙醇為溶劑,分別測量了溫度在30℃,40℃,50℃,60℃時,苦菜提取液的紫外吸收光譜如圖3所示.分析圖譜發(fā)現(xiàn),并不是提取溫度越高,提取出來的Vc量越大,而是30℃時提取出來的Vc量最大,其次為50℃,再其次為60℃,40℃時提取量最低.因此在乙醇溶劑中,苦菜提取Vc的最佳實(shí)驗(yàn)溫度為30℃.
2.4 不同提取時間對反應(yīng)的影響
為了考察提取時間對苦菜中提取Vc含量的影響,本文分別在甲醇和乙醇提取劑中測量了20 min,30min,40min,50min,60min時提取液的紫外吸收光譜.甲醇為提取劑時,60min時提取的Vc含量最高,20min時的最低,因此其最佳提取時間為60min.乙醇為提取劑時,40min時提取的Vc含量最高,20min時的最低,因此最佳提取時間為40min.由此可知,提取劑不同,最佳提取時間也不同,因此在提取苦菜中的Vc時,要根據(jù)提取劑來確定最佳提取時間.
2.5 不同溶劑對反應(yīng)的影響
本文在相同溫度,相同濃度,相同提取時間下,測量了分別以甲醇和乙醇為提取劑的提取液的紫外可見吸收光譜,如圖6所示.當(dāng)提取劑為甲醇時,提取液的Vc含量遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于提取劑為乙醇的.這說明甲醇更適合作為苦菜中提取Vc的提取劑.
3 結(jié)論
本文采用分光光度法系統(tǒng)地討論了溫度,提取時間,提取劑,苦菜不同部位,對苦菜中的Vc的提取影響,得出如下結(jié)論:
(1)葉的Vc含量最高,莖的Vc含量稍高于根的.由標(biāo)準(zhǔn)曲線準(zhǔn)確測量出根、莖、葉的Vc含量分別為0.072g/L,0.034g/L,0.033g/L,葉子的Vc含量最高,是根和莖的約2.1倍之多.
(2)以乙醇提取劑時,苦菜中提取Vc的最佳實(shí)驗(yàn)溫度為30℃.
(3)甲醇為提取劑時,60min時提取的Vc含量最高,20min時的最低,因此其最佳提取時間為60min.乙醇為提取劑時,40min時提取的Vc含量最高,20min時的最低,因此最佳提取時間為40min.因此,提取劑不同,最佳提取時間也不同,因此在提取苦菜中的Vc時,要根據(jù)提取劑來確定最佳提取時間.
(4)提取劑為甲醇時提取液的Vc含量遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于提取劑為乙醇的.這說明甲醇更適合作為苦菜中提取Vc的提取劑.
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