竇紅允 王猛 王孟陽(yáng)

[摘要]目的：探究散瘀止痛散的藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。方法：通過(guò)顯微鑒別、薄層色譜鑒別散瘀止痛散的中藥成分，對(duì)鑒別過(guò)程中的關(guān)鍵步驟進(jìn)行歸納和總結(jié)。結(jié)果：應(yīng)用顯微鑒別茯苓、紅花、延胡索、白芍和龍血竭特征明顯，而應(yīng)用薄層色譜鑒別白芍、龍血竭、延胡索重復(fù)性好。結(jié)論：顯微鑒別和薄層色譜鑒別散瘀止痛散具有較高的可信度，可用于該藥的質(zhì)量控制。

[關(guān)鍵詞]散瘀止痛散;顯微鑒別;薄層色譜;質(zhì)量控制

[中圖分類號(hào)]R286.0 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]A [文章編號(hào)]2096-5249（2019）15-0117-01

散瘀止痛散是由多種中藥組成的復(fù)方制劑，該藥為棕褐色粉末，微苦。主藥中的延胡索和白芍可利氣養(yǎng)血，榮筋活血;臣藥中的紅花和龍血竭等成分可使活血作用放大，茯苓能夠發(fā)揮消腫的功效，針對(duì)軟組織損傷具有很好的治療效果。為了有效地鑒別該藥的質(zhì)量，本研究通過(guò)顯微、薄層色譜法定性鑒別該藥的組分質(zhì)量。

1實(shí)驗(yàn)材料

1.1樣品散瘀止痛散批號(hào)為：20180825-1、20180825-2、20180825-3。

1.2對(duì)照品龍血竭（批號(hào)121252-201801）;延胡索乙素（批號(hào)：110726-201806）;延胡索（批號(hào)：120928-201808）;芍藥苷（批號(hào)：110736-201635）;以上藥材均取自中國(guó)食品藥品檢定研究院。

1.3實(shí)驗(yàn)中所用的薄層板硅膠G預(yù)制板、高效G預(yù)制板和硅膠GF254預(yù)制板均為青島邦凱高新技術(shù)材料公司提供。薄層色譜所用試劑采購(gòu)至上海阿拉丁試劑公司（分析純）。

2方法與結(jié)果

2.1顯微鑒別實(shí)驗(yàn)：（1）延胡索：淡黃色或幾乎無(wú)色，其下皮厚壁細(xì)胞呈黃綠色，細(xì)胞大多是多角形和長(zhǎng)條形，壁稍多彎曲，且個(gè)別有增厚，紋孔細(xì)而密。螺紋導(dǎo)管半徑為8-161ua，但顯微特征不明顯。

（2）白芍：團(tuán)塊較多，草酸鈣簇晶常分布于薄壁細(xì)胞中，半徑5.5-18um，成行排布，個(gè)別細(xì)胞中有數(shù)個(gè)簇晶。具緣紋和網(wǎng)紋導(dǎo)管半徑10～32um。纖維有輕微木化現(xiàn)象，壁厚，呈現(xiàn)為長(zhǎng)梭形，半徑7～18um。特征十分明顯，且未見(jiàn)其它干擾項(xiàng)。

（3）紅花：可觀察到柱頭、花冠和花絲的碎片，導(dǎo)管旁有長(zhǎng)管狀分泌細(xì)胞（帶有褐色分泌物），半徑30um左右。在花冠碎片頂端的表皮細(xì)胞外壁可觀察到短絨毛狀的突起。柱頭和花柱的上部表皮細(xì)胞具有圓錐形單細(xì)胞毛?；ǚ哿Ｓ?個(gè)萌發(fā)孔，多為類圓形和橢圓形（半徑30um），在其外壁可觀察到齒狀突起。草酸鈣方晶常分布于薄壁細(xì)胞中（半徑1-3um），而“分泌細(xì)胞半徑33um左右，伴有棕色分泌物。特征十分明顯，且未見(jiàn)其它干擾項(xiàng)。

（4）龍血竭：呈血紅色，為不規(guī)則塊片，周圍液體多由鮮黃色向紅色漸變。特征十分明顯，且未見(jiàn)其它干擾項(xiàng)。

（5）茯苓：為無(wú)色、不規(guī)則的顆粒狀或團(tuán)塊狀，暴露于水合氯醛液會(huì)溶解。菌絲細(xì)長(zhǎng)且彎曲，個(gè)別會(huì)有分枝，多為無(wú)色或淡棕色，半徑1.-4um。特征十分明顯，且未見(jiàn)其它干擾項(xiàng)。

2.2顯微鑒別小結(jié)：白芍、茯苓、龍血竭、紅花顯微鑒別特征明顯。半徑5.5-18um，成行排布，個(gè)別細(xì)胞中有數(shù)個(gè)簇晶。存在于薄壁細(xì)胞中，成行排列，個(gè)別細(xì)胞中有數(shù)個(gè)簇晶（白芍）。可見(jiàn)柱頭、花冠和花絲的碎片，導(dǎo)管旁有長(zhǎng)管狀分泌細(xì)胞分布（并伴有棕色分泌物），半徑30um左右（紅花）。呈血紅色，為不規(guī)則塊片，周圍液體多由鮮黃色向紅色漸變（龍血竭）。無(wú)色不規(guī)則顆粒狀團(tuán)塊狀，遇到水合氯醛液會(huì)溶解（茯苓）。

2.3薄層鑒別：（1）白芍：①供試品溶液：取3g白芍內(nèi)容物，將其研細(xì)后加入15ml甲醇進(jìn)行超聲處理（5分鐘），取其上清液待用。②對(duì)照品溶液：加甲醇溶解芍藥對(duì)照品（1mg/ml）待用。③陰性對(duì)照溶液（無(wú)白芍）：制備方法同供試品溶液。點(diǎn)樣量：以毛細(xì)管取上述3種溶液（5ul）在薄層板上跑板，展開(kāi)劑體系為氯仿：乙酸乙酯：甲醇：甲酸=40：5：10：0.2，所應(yīng)用的薄層板為硅膠G板;顯色：將5%香草醛硫酸溶液噴涂至薄層板后，在110°C下加熱至斑點(diǎn)清晰顯色。供試品和對(duì)照品在薄層色譜上處于相同高度，顯相同顏色和形狀的斑點(diǎn)（未見(jiàn)陰性干擾）。以三批不同批次的樣品分別檢測(cè)，具有較好的重現(xiàn)性。

（2）龍血竭：①供試品溶液：取3g龍血竭并加入25ml乙醚進(jìn)行振搖（5分鐘），過(guò)濾，待濾液揮干后，往殘?jiān)屑尤?ml甲醇使其溶解。②對(duì)照品溶液：同供試品溶液。③陰性對(duì)照溶液（不含龍血竭的樣品）：同供試品溶液。點(diǎn)樣量：以毛細(xì)管取上述3種溶液（10ul）在薄層板上跑板，展開(kāi)劑體系為環(huán)己烷：乙酸乙酯=5：1，所應(yīng)用的薄層板為硅膠GF254板;顯色：將薄層板置于365nm的UV燈光下進(jìn)行檢查。供試品和對(duì)照品在薄層色譜上處于相同高度，顯相同顏色和形狀的熒光斑點(diǎn)（未見(jiàn)陰性干擾）。以三批不同批次的樣品分別檢測(cè)，具有較好的重現(xiàn)性。

（3）延胡索：①供試品溶液：取10g延胡索并加入25ml甲醇進(jìn)行超聲處理（30分鐘），過(guò)濾，待濾液揮干后，加10ml水將殘?jiān)芙狻Ｓ脻獍彼蛊潴w系變?yōu)閴A性，用乙醚搖蕩提取3次（每次10m1），合并后將其蒸干，加lml甲醇使殘?jiān)芙猓鳛楣┰嚻啡芤?。②?duì)照品溶液：加甲醇溶解延胡索乙素對(duì)照品（05mg/ml），將其作為對(duì)照品溶液。制備對(duì)照藥材溶液：取0.5g延胡索對(duì)照藥材，制備方法同供試品溶液，將其作為對(duì)照藥材溶液。③陰性對(duì)照溶液（無(wú)延胡索）：制備方法同供試品溶液。點(diǎn)樣量：以毛細(xì)管取上述3種溶液（5u1）在薄層板上跑板，展開(kāi)劑體系為甲苯：丙酮=9：2，所應(yīng)用的薄層板為高效G板;顯色：用碘蒸氣熏至可見(jiàn)清晰斑點(diǎn)。將碘蒸干后，將薄層板置于365nm的UV燈光下進(jìn)行檢查。供試品和對(duì)照品在薄層色譜上處于相同高度，顯相同顏色和形狀的熒光斑點(diǎn)（未見(jiàn)陰性干擾）。以三批不同批次的樣品分別檢測(cè)，具有較好的重現(xiàn)性。

3討論

散瘀止痛散在治療軟組織損傷具有較好的效果，其在消腫止痛方面療效顯著。但是，市場(chǎng)上該藥的藥品質(zhì)量良莠不齊，因此，找尋一個(gè)行之有效的鑒別方法尤為重要，因此，本研究將顯微鑒別和薄層色譜法應(yīng)用于對(duì)該藥的組分進(jìn)行定性鑒別中，以期為市場(chǎng)監(jiān)管提供科學(xué)依據(jù)。

本研究結(jié)果顯示，應(yīng)用顯微鑒別茯苓、紅花、延胡索、白芍和龍血竭特征明顯，而應(yīng)用薄層色譜鑒別白芍、龍血竭、延胡索重復(fù)性好。

綜上所述，顯微鑒別和薄層色譜鑒別散瘀止痛散中的具有較高的可信度，可用于該藥的質(zhì)量控制。能夠?qū)崿F(xiàn)對(duì)散瘀止痛散藥品內(nèi)在質(zhì)量進(jìn)行真?zhèn)舞b別和控制，從而可確保該藥的內(nèi)在質(zhì)量，使病人獲得滿意的治療效果。