吳亭 邱曉堂 陳學(xué)武

摘要 目的：探討扶正消瘤湯聯(lián)合細(xì)胞因子誘導(dǎo)殺傷（CIK）細(xì)胞治療對(duì)晚期惡性腫瘤患者的臨床改善情況。方法：選取2016年1月至2017年6月廣州中醫(yī)藥大學(xué)附屬海南中醫(yī)院收治的惡性腫瘤患者82例作為研究對(duì)象，隨機(jī)分為對(duì)照組和觀察組，每組41例。對(duì)照組給予CIK細(xì)胞過(guò)繼免疫治療，觀察組在對(duì)照組的基礎(chǔ)上聯(lián)合扶正消瘤湯治療。治療1個(gè)月后，統(tǒng)計(jì)2組近期臨床療效，評(píng)估2組中醫(yī)證候積分變化，比較2組免疫指標(biāo)水平變化，觀察治療期間2組不良反應(yīng)發(fā)生情況。結(jié)果：治療后觀察組總緩解率為60.98%，顯著高于對(duì)照組的34.15%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;與治療前比較，治療后觀察組中醫(yī)證候積分均顯著下降，且觀察組顯著低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;與治療前比較，治療后2組自然殺傷（NK）細(xì)胞、CD3+、CD4+T淋巴細(xì)胞比例和CD4+/CD8+比值均顯著升高，觀察組顯著高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），2組CD8+T淋巴細(xì)胞比例明顯降低，且觀察組明顯低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;治療期間觀察組總不良反應(yīng)發(fā)生率為17.07%，對(duì)照組總不良反應(yīng)發(fā)生率為19.51%，2組總不良反應(yīng)發(fā)生率比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。結(jié)論：扶正消瘤湯聯(lián)合CIK細(xì)胞治療可明顯提高晚期惡性腫瘤患者免疫功能，減輕其臨床不適癥狀，療效顯著，安全可靠。

關(guān)鍵詞 扶正消瘤湯;細(xì)胞因子誘導(dǎo)殺傷細(xì)胞;晚期;惡性腫瘤;免疫

Abstract Objective：To explore the effects of Fuzheng Xiaoliu decoction with CIK cells on the clinical improvement in the treatment of patients with advanced malignant tumor.Methods：A total of 82 cases patients with advanced malignant tumor in Hainan Hospital of Traditional Chinese Medicine Affiliated to Guangzhou University of Traditional Chinese Medicine from January 2016 to June 2017 were selected and randomly divided into a control group and an observation group，with 41 cases in each group.The control group was treated with CIK cells adoptive immunotherapy，and the observation group was treated with Fuzheng Xiaoliu Decoction on the basis of the control group.One month after treatment，the recent clinical curative effect of 2 groups was statisticsed，and the TCM symptoms integral changes of the 2 groups were evaluated.The changes of immune index levels of 2 groups were compared，and the occurrence of adverse reactions of the 2 groups during the treatment was observed.Results：The total remission rate of the observation group was 60.98%，which was significantly higher than 34.15% of the control group （P<0.05）; Compared with before treatment，the TCM symptoms integral of the observation group after treatment significantly declined，and the observation group was significantly lower than control group （P<0.05 or P<0.01）; Compared with before treatment，the ratio of NK cells，T lymphocytes of CD3+，CD4+ and the ratio of CD4+/CD8+ significantly increased，and the observation group was significantly higher than the control group （P<0.05 or P<0.01）.The CD8+ T lymphocytes levels of the 2 groups significantly reduced，and the observation group was significantly lower than the control group （P<0.05）.The total incidence of adverse reactions in the observation group was 17.07%，and the total incidence of adverse reactions in the control group was 19.51%.There was no significant difference between the 2 groups （P>0.05）.Conclusion：Fuzheng Xiaoliu Decoction with CIK cells can significantly improve the immune function of patients with advanced malignant tumors，reduce the clinical symptoms.The effect is significant，and it is safe and reliable.

Key Words Fuzheng xiaoliu Decoction; CIK cells; Advanced stage; Malignant tumor; Immune

中圖分類號(hào)：R289.4;R730文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：Adoi：10.3969/j.issn.1673-7202.2019.06.045

晚期惡性腫瘤患者受疾病及前期治療不良反應(yīng)的影響，機(jī)體臟器衰弱、免疫功能低下，加之腫瘤復(fù)發(fā)或廣泛轉(zhuǎn)移，常規(guī)手術(shù)治療或放化療方案已不適用[1]。近年來(lái)，有研究報(bào)道由細(xì)胞因子誘導(dǎo)殺傷（CIK）細(xì)胞具有殺瘤活性高、殺瘤譜廣等特點(diǎn)[2]，可調(diào)節(jié)晚期惡性腫瘤患者的免疫功能，改善其生命質(zhì)量。中醫(yī)強(qiáng)調(diào)“治病必求于本”，認(rèn)為惡性腫瘤屬于“癥瘕”“積聚”等范疇，其病機(jī)在于正氣虧虛、陰陽(yáng)失衡，致邪毒入侵，正不勝邪而邪毒積聚成瘤，故應(yīng)以培扶正氣、化瘤消毒為治則[3]。周宇姝等[4]研究指出中藥聯(lián)合CIK細(xì)胞治療可在一定程度上改善中晚期腫瘤患者細(xì)胞免疫功能，提高其生命質(zhì)量。本研究觀察并探討扶正消瘤湯聯(lián)合CIK細(xì)胞治療對(duì)晚期惡性腫瘤患者的臨床改善情況?，F(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2016年1月至2017年6月廣州中醫(yī)藥大學(xué)附屬海南中醫(yī)院收治的惡性腫瘤患者82例，將其依據(jù)隨機(jī)數(shù)字表法分為對(duì)照組和觀察組，每組41例。對(duì)照組中男28例，女13例;年齡32～75歲，平均年齡（58.7±6.3）歲;Karnofsky功能狀態(tài)（KPS）評(píng)分60～68分，平均年齡（64.6±5.8）分;疾病類型：肺癌11例，胃癌10例，肝癌13例，腎癌2例，卵巢癌5例;TNM分期：Ⅲ期21例，Ⅳ期20例。觀察組中男26例，女15例;年齡35～76歲，平均年齡（58.9±6.1）歲;KPS評(píng)分61～67分，平均年齡（64.3±5.6）分;疾病類型：肺癌13例，胃癌11例，肝癌10例，腎癌3例，卵巢癌4例;TNM分期：Ⅲ期23例，Ⅳ期18例。2組一般資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。本研究獲得我院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 診斷標(biāo)準(zhǔn)

西醫(yī)診斷符合中國(guó)抗癌協(xié)會(huì)編撰的《新編常見(jiàn)惡性腫瘤診治規(guī)范（合訂本）》[5]中的相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)，并經(jīng)組織學(xué)、細(xì)胞學(xué)等檢查確診。中醫(yī)診斷符合《中醫(yī)內(nèi)科學(xué)》[6]中氣虛血瘀證的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)。

1.3 納入標(biāo)準(zhǔn)

符合上述中西醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)者;年齡18～80歲;近1個(gè)月未經(jīng)放療、化療或其他補(bǔ)益類中藥治療者;預(yù)計(jì)生存期>3個(gè)月者;依從性良好者;患者及其家屬均簽署了知情同意書。

1.4 排除標(biāo)準(zhǔn)

伴有心、肝、脾、肺、腎等重要臟器功能異常者;KPS評(píng)分<60分者;合并嚴(yán)重感染者;合并自身免疫性疾病者;器官移植者;妊娠或哺乳期女性等。

1.5 脫落與剔除標(biāo)準(zhǔn)

未按規(guī)定方案治療及復(fù)查者;因經(jīng)濟(jì)或其他原因放棄治療者;治療期間因不可抗力致重要器官衰竭或出現(xiàn)嚴(yán)重感染須終止治療者等。

1.6 治療方法

對(duì)照組給予單純CIK細(xì)胞過(guò)繼免疫治療：1）制備CIK細(xì)胞：采集患者靜脈血60 mL，分離并洗滌單個(gè)核細(xì)胞，將其置于含1 000 U/mL γ-干擾素的無(wú)血清培養(yǎng)基，調(diào)節(jié)細(xì)胞濃度至1～2×106個(gè)/mL，37 ℃、5% CO2環(huán)境下懸浮培養(yǎng)，24 h后加入100 ng/mL抗CD3單克隆抗體、1 000 U/mL人重組白細(xì)胞介素-2（IL-2）繼續(xù)培養(yǎng)，每2天更換新鮮培養(yǎng)基并補(bǔ)加IL-2，培養(yǎng)2～3周后收集細(xì)胞。2）CIK細(xì)胞回輸：回輸前，進(jìn)行無(wú)菌檢驗(yàn)，確認(rèn)陰性。無(wú)菌過(guò)濾、收集并洗滌后，將1～2×109個(gè)CIK細(xì)胞懸浮于100 mL0.9%氯化鈉注射液中，回輸給患者，輸注時(shí)間<2 h，隔天輸注1次，輸注5次為1個(gè)療程。

觀察組在對(duì)照組的基礎(chǔ)上給予扶正消瘤湯治療，藥方組成：生黃芪、白術(shù)、絞股藍(lán)、生薏苡仁、白花蛇舌草、藤梨根、野葡萄根各30 g，石斛、豬苓、八月札各15 g，三七5 g，雞內(nèi)金、生甘草各10 g。惡心嘔吐者加清半夏、淡竹茹;疼痛者加延胡、蜈蚣和雞矢藤;心悸自汗者加制附子、丹參、山萸肉。每日1劑，分早晚2次服用，30 d為1個(gè)療程。治療1個(gè)月后評(píng)估2組臨床改善情況。

1.7 觀察指標(biāo)

1）統(tǒng)計(jì)2組近期臨床療效。2）比較治療前后2組中醫(yī)證候積分變化。依據(jù)《中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則》[7]將神疲乏力、少氣懶言、疼痛拒按、心悸自汗、脈細(xì)無(wú)力等主證按無(wú)、輕、中、重程度分別記0～3分，分值越高，患者病情越嚴(yán)重。3）采集2組患者空腹外周靜脈血，采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)外周血T淋巴細(xì)胞亞群CD3+、CD4+、CD8+比例以及自然殺傷（NK）細(xì)胞比例，計(jì)算CD4+/CD8+比值。4）依據(jù)世界衛(wèi)生組織制定的抗腫瘤藥物急性與亞急性毒性反應(yīng)分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)觀察2組治療期間不良反應(yīng)發(fā)生情況[8]。

1.8 療效判定標(biāo)準(zhǔn)

采用世界衛(wèi)生組織實(shí)體瘤療效評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)評(píng)估近期療效。完全緩解（CR）：所有腫瘤全部壞死或消失，并維持>1個(gè)月;部分緩解（PR）：腫瘤縮小≥50%;疾病穩(wěn)定（SD）：腫瘤增大<25%或縮小<50%;疾病進(jìn)展（PD）：腫瘤增大≥25%或出現(xiàn)新病灶?？偩徑饴剩≧R）=CR+PR。

1.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)軟件分析數(shù)據(jù)，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，采用t檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料以百分率表示，采用χ2檢驗(yàn)。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 2組患者近期臨床療效比較

治療后觀察組RR顯著高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見(jiàn)表1。

2.2 2組患者中醫(yī)證候積分比較

與治療前比較，治療后觀察組神疲乏力、少氣懶言、疼痛拒按、心悸自汗、脈細(xì)無(wú)力等中醫(yī)證候積分均顯著下降，且觀察組顯著低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見(jiàn)表2。

2.3 2組患者免疫指標(biāo)水平比較

與治療前比較，治療后2組NK細(xì)胞及CD3+、CD4+等T淋巴細(xì)胞比例和CD4+/CD8+比值均顯著升高，觀察組顯著高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），CD8+T淋巴細(xì)胞比例明顯降低，且觀察組明顯低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見(jiàn)表3。

2.4 2組患者治療期間不良反應(yīng)情況比較

治療期間，2組血常規(guī)、肝腎功能檢查無(wú)明顯異常，均未出現(xiàn)嚴(yán)重心、腦、肺等臟器毒性反應(yīng)。觀察組出現(xiàn)惡心2例，低熱1例，皮疹2例，一過(guò)性高熱1例，總不良反應(yīng)發(fā)生率為17.07%（6/41）;對(duì)照組出現(xiàn)惡心3例，低熱2例，皮疹1例，一過(guò)性高熱2例，總不良反應(yīng)發(fā)生率為19.51%（8/41），2組總不良反應(yīng)發(fā)生率比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

3 討論

CIK細(xì)胞是人體外周血單個(gè)核細(xì)胞在IFN-γ、抗CD3單克隆抗體、IL-2等多種細(xì)胞因子誘導(dǎo)下于體外增殖培養(yǎng)后形成的高溶瘤活性的異質(zhì)細(xì)胞群，可激活腫瘤細(xì)胞凋亡因子促使其凋亡，釋放穿孔素、顆粒酶B及多種細(xì)胞因子裂解腫瘤細(xì)胞或抑制其增殖[9-10]。CIK細(xì)胞療法不良反應(yīng)小，可清除手術(shù)或放化療后的殘余病灶，有效預(yù)防腫瘤復(fù)發(fā)及轉(zhuǎn)移[11]。有研究顯示，對(duì)晚期惡性腫瘤患者應(yīng)用CIK細(xì)胞治療能夠有效緩解其臨床癥狀，改善免疫功能，提高患者生命質(zhì)量[12]。目前CIK細(xì)胞療法已廣泛應(yīng)用于消化系統(tǒng)惡性腫瘤、肺癌、卵巢癌等治療中。

中醫(yī)理論中“正氣”一詞即指保護(hù)機(jī)體免受“邪氣”侵?jǐn)_而致病的能力，《醫(yī)宗必讀·積聚篇》曰“積之成也，正氣不足，后邪氣踞之”[13]，明確指出機(jī)體正氣虛損是癌瘤形成的內(nèi)因。依據(jù)“虛者補(bǔ)之”“損者益之”的中醫(yī)理論[14]，本研究所用扶正消瘤湯在“扶正培本”的基礎(chǔ)上增加了“消瘤散結(jié)”的功效，其中生黃芪、白術(shù)、絞股藍(lán)益氣、扶正、培本，為君藥;石斛、白花蛇舌草、藤梨根、野葡萄根、八月札、三七滋陰清熱、理氣化瘀、消瘤散結(jié)，為臣藥;生薏苡仁、豬苓、雞內(nèi)金扶脾健胃、化濁抑癌，為佐藥;以生甘草為使，清熱和中，調(diào)合諸藥，全方共奏益氣養(yǎng)陰，培本扶正，化瘤散結(jié)之功。本研究結(jié)果顯示，治療后觀察組總有效率顯著高于對(duì)照組，且與治療前比較，治療后觀察組神疲乏力、少氣懶言、疼痛拒按、心悸自汗、脈細(xì)無(wú)力等中醫(yī)證候積分均顯著下降，且觀察組均顯著低于對(duì)照組，提示扶正消瘤湯輔助CIK細(xì)胞治療惡性腫瘤療效顯著，有助于緩解患者各種臨床不適癥狀，與相關(guān)研究結(jié)果相似[15-16]。

腫瘤免疫學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展與機(jī)體免疫狀態(tài)密切相關(guān)，機(jī)體免疫功能低下時(shí)，不能有效識(shí)別并清除發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化的細(xì)胞，致使腫瘤形成[17-18];腫瘤細(xì)胞分泌多種免疫抑制性因子進(jìn)一步抑制機(jī)體抗腫瘤免疫反應(yīng)，由此形成惡性循環(huán)[19]。NK細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞是機(jī)體抗腫瘤免疫的重要效應(yīng)細(xì)胞，測(cè)定其在外周血中的水平可反映惡性腫瘤患者體內(nèi)抗腫瘤免疫水平。本研究結(jié)果顯示，與治療前比較，治療后2組NK細(xì)胞及CD3+、CD4+等T淋巴細(xì)胞比例和CD4+/CD8+比值均顯著升高，觀察組顯著高于對(duì)照組，CD8+水平明顯降低，且觀察組明顯低于對(duì)照組，提示扶正消瘤湯輔助CIK細(xì)胞治療比較單純CIK細(xì)胞療法可更好地調(diào)節(jié)晚期惡性腫瘤患者的免疫功能，可能是由于扶正消瘤湯中所含的豬苓多糖、黃芪多糖等中藥活性成分有助于促進(jìn)抗腫瘤效應(yīng)細(xì)胞的增殖，激活其抗腫瘤活性[20]。此外，治療期間2組均出現(xiàn)惡心、皮疹、低熱、一過(guò)性高熱等輕微不良反應(yīng)，但2組總不良反應(yīng)發(fā)生率比較無(wú)明顯差異，表明扶正消瘤湯輔助CIK細(xì)胞治療對(duì)惡性腫瘤患者安全、可靠。

綜上所述，扶正消瘤湯聯(lián)合CIK細(xì)胞治療可明顯提高晚期惡性腫瘤患者免疫功能，減輕其臨床不適癥狀，療效顯著，安全可靠。

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（2018-12-21收稿 責(zé)任編輯：楊覺(jué)雄）