摘要：球蟲病是我國養(yǎng)雞生產(chǎn)中常見且危害十分嚴(yán)重的原蟲病。目前，每年因雞球蟲病產(chǎn)生的藥費(fèi)約占雞常見疾病防治費(fèi)用的25%，對我國養(yǎng)雞業(yè)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。隨著球蟲耐藥性的普遍發(fā)生，抗球蟲藥對生態(tài)環(huán)境的污染以及藥物殘留問題備受關(guān)注，而藥物治療手段越來越有限，選擇疫苗預(yù)防雞球蟲病逐漸成為主流。

關(guān)鍵詞：雞球蟲病;疫苗;接種方法;免疫效果

中圖分類號(hào)：S858.31

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B

doi：10.3969/j.issn.2096-3637.2019.05.001

0引言

球蟲疫苗不同的免疫接種方法會(huì)影響免疫效果，常見的包括滴眼、滴口、噴霧、拌料以及飲水等接種方法。其中飲水、拌料是目前大部分雞場常用的接種方式，其操作簡單、應(yīng)激小，但在規(guī)模化養(yǎng)殖情況下，人工的工作量較少。氣霧法免疫可做到流水線式免疫，解放人手，方便快捷，但是國內(nèi)研究相對較少，是否適合生產(chǎn)應(yīng)用還有待研究[1]。

1試驗(yàn)材料與方法

1.1材料

1日齡無球蟲感染的黃羽肉雞，購自廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧研究所種雞場，隔離飼養(yǎng)于經(jīng)火焰消毒的雞籠，飲用潔凈自來水，飼養(yǎng)至試驗(yàn)日齡時(shí)備用;添加抗球蟲藥物和抗生素的全價(jià)飼料;球蟲病四價(jià)活疫苗，攻蟲用強(qiáng)毒卵囊（嫩艾美耳球蟲、毒害艾美耳球蟲、巨型艾美耳球蟲和堆型艾美耳球蟲）;鹽水溶液：氯化鈉380g，蒸餾水1000mL，加熱溶解，比重為1.18。

生物顯微鏡、麥克馬斯特計(jì)數(shù)板（規(guī)格10計(jì)數(shù)板）、電子稱、金屬底座計(jì)數(shù)器、噴霧機(jī)、料筒、水壺、60目金屬網(wǎng)篩、燒杯、乳膠頭滴管、手持噴霧器等。

1.2方法

1.2.1不同日齡飲水免疫試驗(yàn)分組及處理

取1日齡黃雞20只作為飲水免疫1組;取4日齡黃雞20只作為飲水免疫2組;飲水免疫組分別在1日齡和4日齡進(jìn)行雞球蟲病四價(jià)活疫苗飲水免疫，1羽份/雞，每組采取地上平養(yǎng)。其具體步驟如下。

取6L飲用水，再倒入1瓶1000羽份/瓶球蟲活疫苗，加入疫苗助懸劑，充分混勻，然后準(zhǔn)確量取120mL分裝到飲水器中，供20羽雞自由飲用4-5h，免疫前不停水。

1.2.2噴霧免疫試驗(yàn)分組及處理

（1）口服免疫：直接將疫苗稀釋好1羽份接種。

（2）噴霧免疫：將疫苗與水按1：9、1：19稀釋，攪拌均勻，將2種稀釋好的疫苗分別裝入噴霧機(jī)，把裝有試驗(yàn)雛雞的紙箱放入噴霧罩內(nèi)，進(jìn)行噴霧免疫（通過雞的啄羽行為，把粘在羽毛上面的疫苗啄食進(jìn)體內(nèi)）。

1.2.3不同接種方法免疫試驗(yàn)分組及處理

第1組為對照組，第2組噴霧免疫將疫苗與水按1：19稀釋，攪拌均勻，將稀釋疫苗裝入噴霧機(jī)，把裝有試驗(yàn)雛雞的紙箱放入噴霧罩內(nèi)，進(jìn)行噴霧免疫;第3組拌料免疫取1瓶1000羽份/瓶球蟲活疫苗倒入0.4L水中，加入0.2g食品紅，攪拌均勻，稀釋好后裝入手持噴霧器中，再稱取4kg飼料，將疫苗噴灑到飼料上，邊噴霧邊攪拌飼料，準(zhǔn)確稱取70g飼料分裝到料盤中供70羽雞自由采食;第4組飲水免疫取6L飲用水，再倒入1瓶1000羽份/瓶的球蟲活疫苗，加入疫苗助懸劑，充分混勻，然后準(zhǔn)確量取42 mL分裝到飲水器中，供70羽雞自由飲用4-5h，免疫前不停水[2]。

1.2.4免疫試驗(yàn)觀察項(xiàng)目

（1）臨床觀察，記錄各組雞只精神、毛色、食欲和糞便等情況。

（2）免疫均勻性，每組分別于免疫后6d隨機(jī)取10只雞的糞便，用飽和鹽水漂浮單獨(dú)檢測每只雞的小腸糞和盲腸糞的卵囊檢出率。

（3）卵囊OPG值，免疫組4-21d，每組每天取小腸糞和盲腸糞，按4：1的比例混合后，用麥?zhǔn)嫌?jì)數(shù)法計(jì)糞便的卵囊OPG值。

2結(jié)果

2.1攻蟲期間雞的增重情況

統(tǒng)計(jì)雞在攻蟲前和攻蟲后陰性對照組、陽性對照組、噴霧免疫組、拌料免疫組、飲水免疫組的增重情況，計(jì)算各組雞的相對增重率。見表1、圖1。

試驗(yàn)用柔嫩、毒害、巨型、堆型艾美耳球蟲的混合株，其劑量分別為10萬、3萬、3萬、7萬個(gè)卵囊。3種免疫途徑接種雞球蟲病四價(jià)活疫苗均對雞產(chǎn)生了免疫保護(hù)效果，而拌料和飲水免疫方法的效果比較好，噴霧免疫方法的保護(hù)效果一般。

2.2攻蟲期間各組雞存活率

攻蟲后第6天，對各組試驗(yàn)雞糞便進(jìn)行觀察，并記錄血便情況，其中陽性組血便最嚴(yán)重，其次為噴霧免疫組，飲水免疫組和拌料免疫組有少量血便。

攻蟲第6天，觀察各組試驗(yàn)雞的精神狀態(tài)、血便情況，并記錄各組雞的死亡情況，見表2。

攻蟲第6天，陽性組雞精神沉郁、羽毛蓬亂、消瘦、排血便，其死亡率為12.5%，而噴霧免疫組、拌料免疫組和飲水免疫組雞的狀態(tài)活潑、羽毛比較光滑，血便比較少，其死亡率為0。各組試驗(yàn)雞的死亡率和精神狀態(tài)說明了各種免疫方法均能對小雞產(chǎn)生一定的保護(hù)力。

3討論

3.1不同日齡接種疫苗的效果分析

從攻蟲后各組雞的增重對比分析，強(qiáng)毒株球蟲對陽性對照組、1日齡免疫組、4日齡免疫組的增重均有部分影響，但2個(gè)免疫組雞相對增重率顯著高于陽性對照組，這表明球蟲疫苗產(chǎn)生了免疫保護(hù)效果。在攻蟲后的腸道各段病變情況和血便情況分析中也體現(xiàn)出1日齡免疫組和4日齡免疫組均能產(chǎn)生有效免疫保護(hù)，說明1日齡和4日齡免疫球蟲活疫苗均能產(chǎn)生免疫保護(hù)效果。試驗(yàn)結(jié)果：雞在1日齡時(shí)接種雞球蟲病四價(jià)活疫苗，能產(chǎn)生良好的免疫保護(hù)效果，與4日齡接種雞球蟲病四價(jià)活疫苗的免疫效果無明顯差別，在1日齡時(shí)接種雞球蟲病四價(jià)活疫苗可行。

3.2噴霧免疫接種不同稀釋量效果分析

在噴霧免疫不同稀釋量的試驗(yàn)中，從疫苗與水1：9的噴霧免疫1組和疫苗與水1：19噴霧免疫2組進(jìn)行免疫接種后第5-7天排泄卵囊情況分析，噴霧免疫2組雞的卵囊各種卵囊的相對比例和總卵囊的相對比例均高于免疫1組。這表明將疫苗與水進(jìn)行1：19稀釋的濃度使用時(shí)將會(huì)有更多的卵囊進(jìn)入雞體內(nèi)。噴灑更多的霧劑可減緩水分蒸發(fā)速度，卵囊能在霧劑中長時(shí)間保持活性。霧劑中高濃度的卵囊可增加雞單次啄食進(jìn)入雞體內(nèi)的卵囊量，但雞身上的霧劑過少會(huì)使水分很容易蒸發(fā)，卵囊逐漸會(huì)因十燥而死亡[3]。除調(diào)整濃度外，在霧劑中加入有顏色的染料或許對于其免疫接種效果更好，據(jù)研究表明，雞對紅色敏感，在疫苗中加入紅色的染料后，90%-95%雞會(huì)被羽毛上疫苗霧劑中的紅色染料吸引，其后雞便會(huì)啄食自身或其他雞羽毛上的疫苗霧劑。試驗(yàn)結(jié)果表明，疫苗與水1：19稀釋進(jìn)行噴霧免疫的接種效果稍好。

4結(jié)束語

研究通過分析攻蟲前后增重情況、臨床觀察與攻蟲后腸道各段病變情況，證明3種免疫方法接種雞球蟲病四價(jià)活疫苗均可對雞產(chǎn)生免疫保護(hù)力。飲水免疫和拌料免疫的臨床效果均好于噴霧免疫方法，但這2種免疫方法效果差別不大，噴霧免疫效果最差。

參考文獻(xiàn)

[1]陳敬昌.雞球卵囊囊排出動(dòng)態(tài)及球蟲病免疫防制探討[D].廣州：華南農(nóng)業(yè)大學(xué)，2005.

[2]鄧雯，馬彥博，劉玉梅.雞球蟲對機(jī)體的致病作用研究進(jìn)展[J].家畜生態(tài)，2004，6（2）：59-62.

[3]段嘉樹.雞球蟲病免疫：I.球蟲病特點(diǎn)和免疫原理[J].中國動(dòng)物保健，2004，3（4）：7-12.

作者簡介：沈國聰（1985-），男，碩士，研究方向：獸醫(yī)學(xué)。