孫召君　張大偉　孫超

摘要：河蟹養(yǎng)殖業(yè)迅速發(fā)展，但河蟹養(yǎng)殖中疾病種類日益增多，給養(yǎng)殖業(yè)造成嚴(yán)重經(jīng)濟(jì)損失，人們從改善環(huán)境、強(qiáng)化管理等方面尋求預(yù)防與解決蟹病的途徑，增強(qiáng)蟹體抵御病害的能力。該文測(cè)定采食添加中草藥飼料的河蟹血細(xì)胞吞噬活性等指標(biāo)，分析使用中草藥添加劑對(duì)河蟹機(jī)體免疫力的影響。

關(guān)鍵詞：中草藥;河蟹;免疫力

中圖分類號(hào)：S966.16

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B

doi：10.3969/j.issn.2096-3637.2019.05.006

0引言

中藥的防病保健作用明顯，如大蒜中的SOD及還原性硫化物具有清除氧自由基的作用，黃芪含有多糖多種成分，對(duì)免疫系統(tǒng)等具有廣泛的影響，枸杞子含有大量枸杞多糖及微量元素等，近200種中草藥具有免疫促進(jìn)作用，本研究根據(jù)中藥藥理篩選中藥配伍，檢測(cè)分析扣蟹組織中的溶菌酶活力，探討中藥添加劑與扣蟹免疫力的關(guān)系。為甲殼動(dòng)物的有機(jī)水產(chǎn)養(yǎng)殖積累資料。

1鋸緣青蟹生物學(xué)特性

鋸緣青蟹具有重要的經(jīng)濟(jì)價(jià)值，青蟹廣泛分布于溫帶與熱帶海域，我國(guó)福建、廣東居多，棲息在島嶼周圍、河口的泥灘等，對(duì)鹽度的適應(yīng)性強(qiáng)。青蟹個(gè)體較大，頭胸甲呈卵圓形，因體色青綠而得名。前緣具9個(gè)側(cè)緣齒，鰲足強(qiáng)大，長(zhǎng)節(jié)的前緣有3齒，掌膨腫，前3對(duì)足指節(jié)邊緣有刷狀毛，善于游泳，雌性腹部呈圓形。青蟹是一種廣溫性的底棲甲殼類動(dòng)物，生長(zhǎng)適宜溫度范圍為15-32℃，水溫低于18℃時(shí)生長(zhǎng)減慢;水溫12℃以下時(shí)，只在晚上短暫活動(dòng);水溫低于7 0C時(shí)身體潛入泥沙進(jìn)入休眠狀態(tài);水溫高于35℃時(shí)，青蟹背甲出現(xiàn)灰紅斑點(diǎn)。青蟹對(duì)鹽度適應(yīng)較廣，必須在純海水中才能繁衍后代，最適宜的鹽度為13.7%-26.9%，鹽度突變會(huì)引起白芒病。青蟹對(duì)溶解氧有一定的要求，溶解氧小于1mg/L時(shí)，不攝食，甚至死亡。

人工養(yǎng)殖條件下，養(yǎng)殖密度過(guò)高，蟹類細(xì)菌病害時(shí)常發(fā)生。蟹類卵，大眼幼體?；嫉拿拱卟殒湁鼐鷮倥c海壺菌屬等霉菌感染引起。被感染幼體趨光性差，散游于水體的中下層。嚴(yán)重感染的卵體積較小，在橘黃色卵團(tuán)上被感染的卵呈褐色[1]。

鋸緣青蟹是一種鋸緣具有較高營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的蟹類，但近年各種病害頻發(fā)，嚴(yán)重制約鋸緣青蟹養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展。眾多專家與學(xué)者采用不同的方式防治青蟹病害取得成效，蟹類病害的防治主要遵循以防為主的原則。

青蟹病害防治必須堅(jiān)持以防為主，青蟹健康養(yǎng)殖關(guān)鍵要素包括飼養(yǎng)與養(yǎng)殖水環(huán)境，培育抗病性好的蟹苗，適時(shí)有效地改善青蟹生長(zhǎng)環(huán)境是預(yù)防青蟹病害的關(guān)鍵。青蟹患病后，堅(jiān)持盡早治療的原則，青蟹病害是非突發(fā)性的，在潛伏發(fā)生期要正確用藥，以控制病害。根據(jù)病情發(fā)展階段，選擇刺激性較小的藥物[2]。

2中草藥添加劑在螃蟹養(yǎng)殖疾病防治中的應(yīng)用

中華絨螯蟹在動(dòng)物學(xué)分類上屬甲殼綱，方蟹科，河蟹生長(zhǎng)快，味道鮮美。中華絨螯蟹1齡性腺未成熟幼蟹每千克100～200只，目前我國(guó)扣蟹基本采用常規(guī)養(yǎng)殖方法，常出現(xiàn)不當(dāng)使用抗生素造成致病菌抗藥性增強(qiáng)。無(wú)公害養(yǎng)殖技術(shù)對(duì)蟹病的防治有選擇的采用藥物，商品蟹仍出現(xiàn)藥殘情況，國(guó)外水產(chǎn)養(yǎng)殖決不使用農(nóng)藥等化學(xué)物質(zhì)。國(guó)內(nèi)未有有機(jī)養(yǎng)殖河蟹試驗(yàn)報(bào)道。為達(dá)到提高河蟹抗病力的目的，開展免疫刺激劑的研究是執(zhí)行有機(jī)水產(chǎn)養(yǎng)殖標(biāo)準(zhǔn)的有效手段。

克氏原鰲蝦隸屬甲殼綱，十足目，鰲蝦科，原螯蝦屬，因其肉質(zhì)鮮美受到眾多食客的青睞，是當(dāng)今世界上最主要的淡水螯蝦養(yǎng)殖種類，克氏原鰲蝦養(yǎng)殖規(guī)模逐年擴(kuò)大，病害發(fā)生日益頻繁，白斑綜合征病毒是一種無(wú)包涵體病毒，流行范圍大，白斑綜合征病毒在克氏原鰲蝦中開始流行，為養(yǎng)殖業(yè)帶來(lái)巨大的經(jīng)濟(jì)損失。

傳統(tǒng)治療克氏原鰲蝦疾病主要依賴抗生素等，但藥物濫用易造成環(huán)境污染、病原微生物產(chǎn)生耐藥性與破壞機(jī)體微生態(tài)平衡等諸多負(fù)面影響，提高動(dòng)物自身的免疫力對(duì)解決養(yǎng)殖病害問(wèn)題非常重要，天然草藥保持其結(jié)構(gòu)的自然狀態(tài)，作為飼料添加劑有促進(jìn)生長(zhǎng)、提高抗病力的作用，具有低毒、耐藥性等特點(diǎn)。中草藥添加劑已日益成為代替抗生素的新一代添加劑。大黃、黃芪是中國(guó)傳統(tǒng)中藥材，具有激活免疫力等功效，其存在單一使用不足之處，目前有關(guān)其配伍使用對(duì)克氏原鰲蝦的影響未見報(bào)道，通過(guò)對(duì)克氏原鰲蝦血清的測(cè)定研究，篩選促進(jìn)生長(zhǎng)的中草藥免疫調(diào)節(jié)劑，可為進(jìn)一步研究克氏原鰲蝦免疫應(yīng)答機(jī)理提供科學(xué)依據(jù)。

3試驗(yàn)過(guò)程

以中華絨螯蟹大眼幼體至扣蟹為試驗(yàn)對(duì)象，每千克18萬(wàn)尾，試驗(yàn)池寬8m、長(zhǎng)50m，試驗(yàn)池沒有養(yǎng)殖試驗(yàn)池4組，有機(jī)養(yǎng)殖與常規(guī)養(yǎng)殖用寬8 m的曝氣池相互隔離，經(jīng)檢測(cè)符合《漁業(yè)水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)》，養(yǎng)殖池底中藥殘與重金屬含量經(jīng)檢驗(yàn)符合《土壤環(huán)境質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)。

有機(jī)養(yǎng)殖需要有機(jī)餌料，有機(jī)餌料成分為有機(jī)小麥、大豆、大米及天然魚粉，粉碎后按一定的比例混合制成。中藥添加劑配方為大蒜瓣50%、茯苓20%、枸杞20%、黃芪10%。大蒜瓣去皮搗成糜狀，枸杞、黃芪充分浸泡制漿，與大蒜糜充分混合，攪拌后投喂[3]。 常規(guī)養(yǎng)殖池為1組，1組按常規(guī)管理方式管理，2、3、4、5組投喂有機(jī)餌料，2組餌料中不添加中藥添加劑，3、4、5組添加中藥添加劑。各組在飼喂30 d后首次取樣，每處理同時(shí)作一平行樣，首次樣各取V期幼蟹6只，去掉骨質(zhì)部分，留下心臟等組織塊，沖洗，稱重，加入組織塊9倍體積的勻漿緩沖液冰浴勻漿，取上清液待測(cè)。

4試驗(yàn)結(jié)果

經(jīng)30d與60d處理后，各處理組織中SOD活性有明顯變化。30d組中，3組>5組>2組>4組>1組，處理60d組>處理30d組。有機(jī)養(yǎng)殖組比常規(guī)養(yǎng)殖組SOD活性明顯高，4組為1組的2.7倍。未添加中草藥的有機(jī)養(yǎng)殖組比常規(guī)養(yǎng)殖組高2.2倍，有機(jī)養(yǎng)殖組中，未添加中藥添加劑的2組與3、4、5組SOD活性比較，其增幅為30d處理組99%、12.3%、16%，同一組中，30d處理組與60d處理組1組增加64.9%。統(tǒng)計(jì)分析表明，1組與2、3、4、5組間差異顯著。2組與3組間差異顯著。2組與4、5組差異不顯著[4]。

同一組中，30d處理組與60d處理組比較，1組增加180.4%，30d處理組中，2、3、4、5組增加37.5%、213.5%、71.3%、144.3%。3、4、5組分別增加128%、24.6%、77.7%。統(tǒng)計(jì)分析表明，30d處理組中，1組與3、4、5組差異顯著，與2組差異不顯著，2組與3組差異顯著，與4、5組差異不顯著。

5結(jié)論

扣蟹體液內(nèi)不存在免疫球蛋白，其免疫系統(tǒng)具有免疫性，適當(dāng)?shù)恼T導(dǎo)可提高組織的免疫因子數(shù)量，研究選擇合適的免疫增強(qiáng)劑的方法，將成為有機(jī)水產(chǎn)養(yǎng)殖扣蟹疾病防治的重要方向。某些中草藥能增強(qiáng)扣蟹的非特異性免疫力，但并非對(duì)所有疾病有效，應(yīng)考慮使用時(shí)間、方法等。試驗(yàn)結(jié)果表明，中藥添加劑1%的飼料量使用30-60d可有效增強(qiáng)扣蟹組織中SOD的活性，中藥添加劑有效成分的定量分析有待進(jìn)一步研究。

參考文獻(xiàn)

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[4]郭瓊.生物技術(shù)在螃蟹養(yǎng)殖病害防治上的應(yīng)用[J].畜禽業(yè)，2018，29（4）：90-91.

作者簡(jiǎn)介：孫召君（1986-），女，天津人，漢族，碩士研究生，配方師助理，研究方向：動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)與飼料。