劉新雷

（默沙東動物保健品（上海）有限公司，上海 200233）

自2018 年以來，豬病呈現(xiàn)新的流行趨勢，原有的傳染性疾病沒有減少，甚至還出現(xiàn)了增多的趨勢，更可怕的是還有新的烈性傳染性疾病進入中國，給中國養(yǎng)豬業(yè)造成毀滅性的打擊。預(yù)防和控制動物傳染性疾病的發(fā)生即是一項長期而艱巨的任務(wù)，又是眼前迫在眉睫需要面對的一項挑戰(zhàn)。動物傳染病的發(fā)生和流行必須同時具備傳染源、傳播途徑和易感動物等三個條件[1]。因此，在預(yù)防控制動物傳染病時，除了降低易感動物易感性、消滅傳染源之外，做好生物安全，切斷病原的傳播途徑才是高效且成本最低的措施。生物安全成為我們當(dāng)前預(yù)防傳染病的主要手段，科學(xué)消毒是生物安全中最重要的環(huán)節(jié)，而消毒劑的效果又是決定消毒成敗的核心因素，因此消毒劑的選擇至關(guān)重要。好的消毒藥可以在病原微生物進入動物體內(nèi)前將其消滅，阻斷傳染病的傳播途徑，起到防控疾病的目的[2]。目前市場上銷售的消毒藥種類很多，其中以戊二醛類和碘制劑使用最多。

戊二醛消毒劑的作用機理：戊二醛是一種很好的蛋白質(zhì)交聯(lián)劑，主要通過與菌體蛋白質(zhì)中的氨基相結(jié)合讓其變性或者使蛋白質(zhì)分子烷基化，進而起到破壞細(xì)菌表面蛋白受體的作用。戊二醛具有固定蛋白的作用，在戊二醛存在時能夠造成膜蛋白交聯(lián)，導(dǎo)致膜蛋白的構(gòu)象發(fā)生改變，膜蛋白的三級結(jié)構(gòu)趨于收縮。膜蛋白在交聯(lián)作用的影響下膜蛋白的流動性受到約束，使蛋白功能受到影響，進而起到殺滅細(xì)菌的作用。在堿性溶液里面，戊二醛分子之間發(fā)生聚合作用，形成醛醇型不飽和聚合物，更容易與蛋白質(zhì)的賴氨酸發(fā)生交聯(lián)作用。大量的戊二醛分子滲入菌體內(nèi)部，改變細(xì)胞膜的通透性，使細(xì)菌胞內(nèi)的內(nèi)容物外滲，導(dǎo)致細(xì)菌死亡[3]。碘類消毒劑的作用機理：碘類消毒劑中起殺菌作用的主要是游離碘和次碘酸。游離碘能夠迅速穿透細(xì)胞壁，次碘酸具有很強的氧化作用，對不同病原體而言，他們的殺滅作用也不盡相同。對細(xì)菌和芽孢而言，游離碘的滅活效果要高于次碘酸，而對于病毒的殺滅效果而言，次碘酸要高于游離碘。經(jīng)過初步的研究推測，碘通過多種途徑跟病原體發(fā)生反應(yīng)，其中主要是通過與羥基、氨基、烴基、巰基相結(jié)合導(dǎo)致蛋白質(zhì)變性沉淀，使病原微生物滅活。

市場上銷售的以戊二醛和碘制劑為主要成分的消毒劑很多，效果也有著較大的差別，本次試驗選取國產(chǎn)戊二醛消毒劑、國產(chǎn)碘制劑消毒劑、進口復(fù)方戊二醛消毒劑、進口碘制劑消毒劑4 類，分別對大腸桿菌和沙門氏菌進行作用，收集試驗結(jié)果，評估消毒劑對常見病原的殺滅效果。

1 試驗設(shè)計

從市場上購得以下4 種消毒劑：1）國產(chǎn)戊二醛消毒劑；2）國產(chǎn)碘制劑消毒劑；3）進口復(fù)方戊二醛消毒劑；4）進口碘制劑消毒劑。按說明書要求配成現(xiàn)場使用的比例，敞開放置于空氣中，每天分別跟大腸桿菌菌液和沙門氏菌菌液相互作用后涂于LB 平板，12 h 后觀察菌落生長情況，并且與對照組進行比較，記錄結(jié)果，進而評價消毒劑的效果。

2 材料與方法

2.1 試驗材料

2.1.1 試驗細(xì)菌

豬源大腸桿菌（分離自哈爾濱周邊某豬場）、豬源沙門氏菌（分離自哈爾濱周邊某豬場）。

2.1.2 培養(yǎng)基

血瓊脂培養(yǎng)基、LB 平板培養(yǎng)基、血清肉湯培養(yǎng)基。

2.1.3 主要試劑

蛋白胨、牛肉膏、瓊脂粉、氯化鈉、磷酸氫二鉀、甘油、吐溫-80、卵磷脂、犢牛血清、生理鹽水等。

2.1.4 主要儀器

恒溫培養(yǎng)箱、壓力蒸汽滅菌器、超凈工作臺、37 ℃恒溫?fù)u床、冰箱、電子天平、移液器等。

2.1.5 消毒劑

國產(chǎn)戊二醛消毒劑、國產(chǎn)碘制劑消毒劑、進口復(fù)方戊二醛消毒劑、進口碘制劑消毒劑，均購自獸藥大市場。

2.2 試驗方法

先將在豬場采集的肛門拭子在無菌環(huán)境下劃線涂于血液瓊脂培養(yǎng)基，37 ℃溫箱恒溫培養(yǎng)18 ～24 h，革蘭氏染色鏡撿，分離得到大腸桿菌和沙門氏菌。分別接于LB 培養(yǎng)基進行單純培養(yǎng)，然后挑取典型的菌落接種于血清肉湯培養(yǎng)基中，恒溫37 ℃培養(yǎng)12 ～18 h 后，菌液出現(xiàn)渾濁之后菌落計數(shù)。然后用無菌生理鹽水將菌落總數(shù)測定的細(xì)菌分別制成5×105～5×106CFU/mL 懸液備用。

4 種消毒藥分別為進口復(fù)方戊二醛消毒劑，進口碘與磷酸合劑，國產(chǎn)戊二醛與季銨鹽合劑，國產(chǎn)碘制劑。按使用說明書中的比例（表1）稀釋成溶液并分組編號，敞口置于環(huán)境中，對照組不加何消毒劑，用生理鹽水代替。

分組配制消毒稀釋液完成后，每組各取消毒溶液500 μL 與稀釋好的大腸桿菌菌液500 μL 進行混合作用10 min，然后均勻涂于LB 平板上放置在37 ℃培養(yǎng)箱內(nèi)進行培養(yǎng)，對照組500 μL 大腸桿菌菌液與500 μL 生理鹽水混合作用10 min后涂于LB 平板上，放入溫箱培養(yǎng)。按上述同樣方法再將各分組溶液與稀釋好的沙門氏菌進行作用，然后涂板進行培養(yǎng)，對照組500 μL 沙門氏菌菌液與500 μL 生理鹽水混合作用10 min 后涂于LB 平板上，放入溫箱培養(yǎng)。12 h 后觀察平板細(xì)菌生長情況。所配4 組稀釋液敞口放置7 d，每天重復(fù)上述操作。

表1 消毒劑溶液配制

3 試驗結(jié)果

每天對接種過細(xì)菌的平板進行觀察和拍照記錄，所得到的試驗結(jié)果見表2 和表3。

從表2 和表3 中可以看出，國產(chǎn)戊二醛組在配制成溶液后僅第1 天和第2 天沙門氏菌長菌略少于對照組，第3 天以后跟對照組沒有差別。國產(chǎn)碘制劑僅在配置完成后當(dāng)天作用的沙門氏菌長菌略少于對照組，之后就跟對照組沒有差別。進口碘制劑和進口復(fù)方戊二醛，自配制完成后第1 天到第7 天均沒有見到長菌。

4 討論

通過上述試驗可以初步得出以下結(jié)論，市場上所購買的國產(chǎn)消毒劑無論是戊二醛還是季銨鹽類，在剛剛配制好之后對沙門氏菌有不是很明顯地殺滅效果，對大腸桿菌沒有效果。放置超過24 h 后對大腸桿菌和沙門氏菌都沒有任何殺滅效果。進口復(fù)方戊二醛消毒劑和進口含碘消毒劑在配制成稀釋液之后在環(huán)境中放置，在7 d 之內(nèi)均可以保證對大腸桿菌和沙門氏菌有完全殺滅作用。

表2 不同消毒劑對大腸桿菌殺滅效果（與對照組相比）

表3 不同消毒劑對沙門氏菌殺滅效果（與對照組相比）

圖1 殺菌效果

近日各地豬價開始上漲，養(yǎng)豬業(yè)的又一個暴利時代已經(jīng)來臨，眼下只要有豬就能賺取暴利，因此保證自己的豬場安全才是重中之重，而做好生物安全又是目前防控重大疫情的唯一有效手段。消毒是生物安全體系中非常關(guān)鍵的一環(huán)，也只有選擇有效的消毒劑才能保證消毒環(huán)節(jié)起到真正的作用，告別過去形式化、走過程的習(xí)慣，做到真正的有效消毒，才是生存下去高盈利的王道。

因此建議大家在這關(guān)乎生死的時刻選擇消毒產(chǎn)品時一定要選擇大品牌且是已經(jīng)認(rèn)證過的有效產(chǎn)品，避免出現(xiàn)“選擇不對，努力白費”的情況。