黃美興 朱璐 馮雷

[摘要]目的 探討復(fù)方氟米松治療銀屑病對(duì)輔助性T（Th17）細(xì)胞相關(guān)細(xì)胞因子表達(dá)的影響。方法 選取2016年1月～2018年6月于廣州醫(yī)科大學(xué)附屬第五醫(yī)院皮膚科門診就診的52例銀屑病患者作為研究組，隨機(jī)選取同期體檢健康者52例作為對(duì)照組。于治療前（T1）、治療后1周（T2）及治療后4周（T3）采集研究組患者的靜脈血，對(duì)照組靜脈血采集時(shí)間為入組體檢時(shí)（T4）。檢測(cè)血清中白細(xì)胞介素-17A（IL-17A）、白細(xì)胞介素-17F（IL-17F）、白細(xì)胞介素-17E/25（IL-17E/-25）、白細(xì)胞介素-6（IL-6）以及腫瘤壞死因子-α（TNF-α）水平。根據(jù)銀屑病皮損面積及嚴(yán)重程度指數(shù)（PASI）評(píng)分評(píng)判研究組患者的治療效果。結(jié)果 研究組患者T3的血清Th17細(xì)胞相關(guān)因子水平均低于T2、T1，T2低于T1，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;研究組T1、T2的血清Th17細(xì)胞相關(guān)因子水平均高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;研究組T3的血清Th17細(xì)胞相關(guān)因子水平與對(duì)照組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。研究組T2的治療總有效率為76.92%，研究組T3的治療總有效率為92.31%;研究組T3的治療總有效率高于T2，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論 復(fù)方氟米松軟膏對(duì)銀屑病具有良好的治療效果，可顯著降低患者PASI評(píng)分的同時(shí)減少患者機(jī)體內(nèi)Th17細(xì)胞相關(guān)因子的表達(dá)，值得臨床推廣。

[關(guān)鍵詞]銀屑病;Th17細(xì)胞;細(xì)胞因子;復(fù)方氟米松

[中圖分類號(hào)] R758.63? ? ? ? ? [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A? ? ? ? ? [文章編號(hào)] 1674-4721（2019）6（b）-0009-04

[Abstract] Objective To investigate the effect of Compound Flumetasone in the treatment of psoriasis on the expression of helper T （Th17） cell associated cytokines. Methods A total of 52 patients with psoriasis who were admitted to the Dermatology Clinic of the Fifth Affiliated Hospital of Guangzhou Medical University from January 2016 to June 2018 were selected as the research group， and 52 healthy people who underwent the physical examination were randomly selected as the control group. The venous blood of the research group was collected before treatment （T1）， 1 week after treatment （T2）， and 4 weeks after treatment （T3）， and the venous blood collection time of the control group was the time of the physical examination （T4）. The serum levels of interleukin-17A （IL-17A）， interleukin-17F （IL-17F）， interleukin-17E/25 （IL-17E/-25）， interleukin-6 （IL-6） and tumor necrosis factor-α （TNF-α） were detected. The treatment effect of patients in the research group was evaluated according to the psoriasis area and severity index （PASI） score. Results The serum levels of Th17 cell associated cytokines at T3 in the research group were lower than those at T2 and T1， T2 was lower than T1， and the differences were statistically significant （P<0.05）. The serum levels of Th17 cell associated cytokines at T1 and T2 in the research group were higher than those in the control group， and the differences were statistically significant （P<0.05）. There were no significant differences in serum levels of Th17 cell associated cytokines between the research group at T3 and the control group （P>0.05）. The total effective rate of treatment at T2 in the research group was 76.92%， and the total effective rate of treatment at T3 in the research group was 92.31%. The total effective rate of treatment at T3 in the research group was higher than that at T2， and the difference was statistically significant （P<0.05）. Conclusion Compound Flumetasone has a good therapeutic effect on patients with advanced vulgaris psoriasis， it can significantly reduce the PASI score and the expression of Th17 cell associated cytokines in the body of patients， which is worthy of clinical promotion.

[Key words] Psoriasis; Th17 cells; Cytokines; Compound Flumetasone

銀屑病是一種在遺傳背景上，多種復(fù)雜因素相互作用下發(fā)生的慢性、復(fù)發(fā)性、炎癥性皮膚病，該病對(duì)患者的身心健康帶來(lái)不同程度的不良影響[1]。隨著工業(yè)化進(jìn)程，銀屑病發(fā)病率逐漸升高，但其發(fā)病機(jī)制至今還未完全清楚。白細(xì)胞介素-17/23（IL-17/-23）軸被認(rèn)為是其發(fā)病機(jī)制中重要的一環(huán)，也是目前研究的重點(diǎn)、熱點(diǎn)，IL-17的拮抗劑以及其受體拮抗劑等生物制劑的使用，在臨床上均取得了很好的效果[2]。本研究收集了52例銀屑病患者和52例正常對(duì)照者的臨床病例，對(duì)銀屑病患者進(jìn)行復(fù)方氟米松治療，檢測(cè)了銀屑病患者治療前后外周血血清中輔助性T（Th17）細(xì)胞相關(guān)因子的表達(dá)水平，探討復(fù)方氟米松對(duì)銀屑病患者Th17細(xì)胞相關(guān)因子的影響，現(xiàn)報(bào)道如下。

1資料與方法

1.1一般資料

選取2016年1月～2018年6月于廣州醫(yī)科大學(xué)附屬第五醫(yī)院皮膚科門診就診的52例銀屑病患者作為研究組，患者均為進(jìn)展期尋常型，所有患者均具有典型的紅斑、鱗屑等銀屑病皮疹。其中男38例，女14例;年齡20～42歲，平均（29.6±8.3）歲;平均體重指數(shù)（BMI）（22.40±2.62）kg/m2;平均銀屑病皮損面積及嚴(yán)重程度指數(shù)（PASI）評(píng)分（20.2±2.8）分。隨機(jī)選取同期體檢健康者52例作為對(duì)照組，其中男38例，女14例;年齡19～43歲，平均（29.1±9.7）歲，平均BMI（21.50±1.02）kg/m2。兩組的性別、年齡及BMI等一般資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

研究組納入標(biāo)準(zhǔn)：符合進(jìn)展期尋常型銀屑病診斷標(biāo)準(zhǔn);入院前2周內(nèi)未采用含有糖皮質(zhì)激素的外用藥物治療。研究組排除標(biāo)準(zhǔn)：年齡≤18歲的患者;孕產(chǎn)婦;有嚴(yán)重系統(tǒng)性疾病以及生活不能自理者;入組前3個(gè)月內(nèi)有系統(tǒng)使用激素、免疫抑制劑、維A酸類、β受體阻斷劑、抗瘧藥等可影響銀屑病病情藥物者。

對(duì)照組納入標(biāo)準(zhǔn)：經(jīng)廣州醫(yī)科大學(xué)附屬第五醫(yī)院體檢中心體檢身體各項(xiàng)指標(biāo)正常者。對(duì)照組排除標(biāo)準(zhǔn)：既往或體檢時(shí)患銀屑病、糖尿病、高脂血癥、甲狀腺疾病等嚴(yán)重疾病或慢性疾病;有酗酒、嗜煙等不良嗜好者。

本研究經(jīng)廣州醫(yī)科大學(xué)附屬第五醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)同意，參與研究患者及對(duì)照組體檢健康者均簽署知情同意書。

1.2方法

1.2.1研究組治療方法? 取復(fù)方氟米松軟膏（澳美制藥，HC20140031，1603585，1603589，1604503，1605568）適量，均勻涂于銀屑病患者的皮損處，2次/d，4周為1個(gè)療程。

1.2.2 Th17細(xì)胞相關(guān)細(xì)胞因子檢測(cè)? 于治療前（T1）、治療后1周（T2）及治療后4周（T3），采集研究組患者的空腹靜脈血3 ml，對(duì)照組靜脈血采集時(shí)間為入組體檢時(shí)（T4）。3000 r/min離心10 min分離血清，利用Luminex 200液相芯片檢測(cè)系統(tǒng)（Merck Millipore公司，美國(guó)），操作按說(shuō)明書，整合微球雙熒光免疫標(biāo)記和液流分散激光自動(dòng)檢測(cè)技術(shù)檢測(cè)血清中白細(xì)胞介素-17A（IL-17A）、白細(xì)胞介素-17F（IL-17F）、白細(xì)胞介素-17E/25（IL-17E/-25）、白細(xì)胞介素-6（IL-6）以及腫瘤壞死因子-α（TNF-α）水平，在標(biāo)本收集完成后依次檢測(cè)完成。

1.3觀察指標(biāo)及評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)

比較兩組的IL-17A、IL-17F、IL-17E/-25、IL-6以及TNF-α水平變化。

根據(jù)PASI評(píng)分評(píng)判研究組患者的治療效果，PASI評(píng)價(jià)方法具體如下。PASI評(píng)分下降率=（治療前PASI評(píng)分-治療后PASI評(píng)分）/治療前PASI評(píng)分×100%。痊愈：PASI評(píng)分下降率≥90%;顯效：PASI評(píng)分下降率60%～<90%;有效：PASI評(píng)分下降率20%～ <60%;無(wú)效：PASI評(píng)分下降率<20%?？傆行?（痊愈+顯效+有效）例數(shù)/總例數(shù)×100%。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，兩組間比較采用t檢驗(yàn)，組內(nèi)比較采用單因素方差分析;計(jì)數(shù)資料采用率表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1兩組血清Th17細(xì)胞相關(guān)因子水平的比較

研究組患者T3的血清Th17細(xì)胞相關(guān)因子水平均低于T2、T1，T2低于T1，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;研究組T1、T2的血清Th17細(xì)胞相關(guān)因子水平均高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;研究組T3的血清Th17細(xì)胞相關(guān)因子水平與對(duì)照組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）（表1）。

2.2研究組T2與T3治療總有效率的比較

T2的治療總有效率為76.92%（40/52），T3的治療總有效率為92.31%。T3的治療總有效率高于T2，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）（表2）。

3討論

Th17細(xì)胞屬于CD4+ T細(xì)胞的亞群，主要分泌細(xì)胞IL-17因子，IL-17因子家族由6種結(jié)構(gòu)相似的細(xì)胞因子IL-17A、IL-17B、IL-17C、IL-17D、IL-17E、IL-17F和5個(gè)受體IL-17RA～I(xiàn)L-17RE組成，其中IL-17A主要由Th17細(xì)胞分泌，而IL-17B、IL-17C、IL-17D、IL-17E在其他細(xì)胞中也有廣泛表達(dá)。IL-17A和IL-17F的同源性為50%，IL-17B、IL-17C以及IL-17D與IL-17A的同源性為29%～33%，IL-17E和IL-17A的同源性只有16%[3]。

研究發(fā)現(xiàn)，IL-17A和IL-17F的基因在同一個(gè)位點(diǎn)，并具有相似的功能。它們通常是由相同的免疫細(xì)胞同時(shí)表達(dá)，如Th17、γδT細(xì)胞以及ILC3細(xì)胞，但I(xiàn)L-17F的作用相對(duì)稍弱[4]。IL-17A和IL-17F這兩種細(xì)胞因子均可促進(jìn)相應(yīng)細(xì)胞分泌IL-6、IL-8、G-CsF，募集、活化中性粒細(xì)胞[5-6]。目前的研究結(jié)果已經(jīng)證實(shí)，IL-17A對(duì)銀屑病的發(fā)生、發(fā)展均起重要重要。此外，高表達(dá)的IL-17A能誘導(dǎo)其他炎癥細(xì)胞因子，如IL-6、IL-8、TNF-α和趨化因子到達(dá)炎癥部位，導(dǎo)致局部組織炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)和組織破壞。而IL-6和轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β（transforming growth factor-β，TGF-β）又能夠誘導(dǎo)鼠CD4+ T細(xì)胞表達(dá)IL-17。IL-17A不但作用于角質(zhì)形成細(xì)胞，還可以作用于內(nèi)皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞等，引起銀屑病性關(guān)節(jié)炎等[7-8]。研究證實(shí)，銀屑病患者血清IL-17F水平及皮損中的表達(dá)水平均明顯升高[9-11]。本研究結(jié)果也顯示，銀屑病患者外周血中IL-17A、IL-17F、IL-17E/-25、IL-6及TNF-α的表達(dá)水平也明顯升高（P<0.05），提示這些因子在銀屑病的發(fā)病中起重要作用。

研究證實(shí)，多種細(xì)胞如上皮細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞以及T細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等均可分泌IL-17E[12-13]。近年的研究表明，IL-17E rs79877597單核苷酸多態(tài)性與銀屑病的嚴(yán)重程度及銀屑病性關(guān)節(jié)炎的發(fā)病顯著相關(guān)[14]，患者的皮疹治療改善后，其血清水平降低[15]。在銀屑病皮損處，IL-17E的表達(dá)也明顯上調(diào)，并發(fā)現(xiàn)其可以激活皮膚中的巨噬細(xì)胞產(chǎn)生炎癥因子，如TNF以及中性粒細(xì)胞趨化因子如IL-8等[16-17]。IL-6作為一個(gè)多效的細(xì)胞因子，可由多種細(xì)胞包括淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞等分泌，在機(jī)體損傷、修復(fù)、免疫應(yīng)答以及炎癥反應(yīng)等方面起重要的作用。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，和正常人相比，銀屑病患者血清中的IL-6和IL-8明顯升高。TNF-α是免疫反應(yīng)的關(guān)鍵細(xì)胞因子，其能增加相關(guān)促炎因子包括IL-6和IL-8的產(chǎn)生和釋放，在銀屑病的炎癥反應(yīng)以及增生的級(jí)聯(lián)放大效應(yīng)中起重要作用[18]。本研究結(jié)果顯示，上述因子在銀屑病患者血清中明顯升高，而當(dāng)疾病緩解后，上述因子水平降低。當(dāng)使用復(fù)方氟米松治療4周后，銀屑病患者的皮損變小，PASI評(píng)分明顯降低，同時(shí)檢測(cè)外周血血清中Th17細(xì)胞相關(guān)因子的表達(dá)水平，IL-17A、IL-17F、IL-17E/-25、IL-6和TNF-α的表達(dá)明顯降低，提示Th17細(xì)胞相關(guān)因子在銀屑病的發(fā)生發(fā)展中起重要作用，在后續(xù)的研究中，將深入探究Th17細(xì)胞相關(guān)因子在銀屑病中的不同作用和具體分子機(jī)制。

綜上所示，復(fù)方氟米松軟膏對(duì)銀屑病具有良好的治療效果，可顯著降低患者PASI評(píng)分的同時(shí)減少患者機(jī)體內(nèi)Th17細(xì)胞相關(guān)因子的表達(dá)，值得臨床推廣。

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（收稿日期：2019-02-25? 本文編輯：任秀蘭）