沙益鋒 曹小俊 沈莉敏

[摘要] 目的 探討血清游離脂肪酸（FFA）、β抑制蛋白2（β-arrestin2）、視黃醇結(jié)合蛋白4（RBP4）在2型糖尿病（T2DM）患者中表達(dá)及臨床意義。 方法 選取2016年2月～2018年12月蘇州大學(xué)附屬?gòu)埣腋坩t(yī)院（以下簡(jiǎn)稱(chēng)“我院”）收治的123例T2DM患者作為觀察組，將觀察組根據(jù)體重指數(shù)（BMI）結(jié)果分為T(mén)2DM肥胖組（BMI≥28 kg/m2，n = 62）和T2DM非肥胖組（BMI<28 kg/m2，n = 61），另選取同期來(lái)我院行健康體檢的志愿者60名作為對(duì)照組。比較三組研究對(duì)象血清FFA、β-arrestin2、RBP4水平、糖脂代謝水平;采用Pearson相關(guān)性分析血清FFA、β-arrestin2、RBP4水平與糖脂代謝水平的相關(guān)性。 結(jié)果 T2DM肥胖組、T2DM非肥胖組血清FFA、RBP4水平高于對(duì)照組，且T2DM肥胖組高于T2DM非肥胖組（P < 0.05）;T2DM肥胖組、T2DM非肥胖組血清β-arrestin2水平低于對(duì)照組，且T2DM肥胖組低于T2DM非肥胖組（P < 0.05）。T2DM非肥胖組、T2DM肥胖組糖化血紅蛋白（HbA1c）、總膽固醇（TC）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）、三酰甘油（TG）、胰島素抵抗指數(shù)（HOMA-IR）、BMI均高于對(duì)照組，且T2DM肥胖組高于T2DM非肥胖組（P < 0.05）;而三組高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P > 0.05）。T2DM患者血清FFA和RBP4與HbA1c、TC、TG、LDL-C、HOMA-IR、BMI均呈正相關(guān)（r > 0，P < 0.05），β-arrestin2與HbA1c、TC、TG、LDL-C、HOMA-IR、BMI均呈負(fù)相關(guān)（r < 0，P < 0.05）;FFA、RBP4和β-arrestin2與HDL-C均無(wú)相關(guān)性（P > 0.05）。 結(jié)論 T2DM患者中血清FFA、β-arrestin2、RBP4水平均存在異常表達(dá)，三者可能共同促進(jìn)T2DM的病情進(jìn)展。

[關(guān)鍵詞] β抑制蛋白2;視黃醇結(jié)合蛋白4;游離脂肪酸;臨床意義;2型糖尿病

[中圖分類(lèi)號(hào)] R587.1 ? ? ? ? ?[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A ? ? ? ? ?[文章編號(hào)] 1673-7210（2019）12（c）-0069-04

Expression and clinical significance of serum FFA， β-arrestin2 and RBP4 in patients with type 2 diabetes mellitus

SHA Yifeng1 ? CAO Xiaojun1 ? SHEN Limin1 ? SHI Bimin2 ? XING Jianping1

1.Department of Endocrinology， Zhangjiagang Hospital Affiliated To Soochow University， Jiangsu Province， Zhangjiagang ? 215600， China; 2.Department of Endocrinology， the ?First Affiliated Hospital of Soochow University， Jiangsu Province， Suzhou ? 215006， China

[Abstract] Objective To investigate the expression and clinical significance of serum free fatty acids （FFA）， β inhibition of protein 2 （β-arrestin2）， retinol-binding protein 4 （RBP4） in patients with type 2 diabetes mellitus （T2DM）. Methods From February 2016 to December 2018， 123 T2DM patients admitted to Zhangjiagang Hospital Affiliated To Soochow University （hereinafter referred to as “our hospital”） were selected as the observation group. The observation group was divided into the obese T2DM group （BMI≥28 kg/m2， n = 62） and the non-obese T2DM group （BMI<28 kg/m2， n = 61） according to body mass index （BMI）. In addition， 60 volunteers who came to our hospital for physical examination during the same period were selected as the control group. The serum levels of ?FFA， β-arrestin2， RBP4 and glucose and lipid metabolism of the three groups were compared. Pearson correlation was used to analyze the correlation between the serum levels of FFA， β-arrestin2 and RBP4 and the level of glucose and lipid metabolism. Results The serum levels of FFA and RBP4 in the T2DM obesity group and the T2DM non-obesity group were higher than those in the control group， and those in the T2DM obesity group were higher than those in the T2DM non-obesity group （P < 0.05）. The level of β-arrestin2 in the T2DM obesity group and the T2DM non-obesity group was lower than that in the control group， and that in the T2DM obesity group was lower than that in the T2DM non-obesity group （P < 0.05）. The glycosylated hemoglobin （HbA1c）， total cholesterol （TC）， low density lipoprotein cholesterin （LDL-C）， triglyceride （TG）， insulin resistance index （HOMA-IR） and BMI in the T2DM obesity group and the T2DM non-obesity group were higher than the control group， and those in the T2DM obesity group were higher than those in the T2DM non-obesity group （P < 0.05）. However， there was no statistically significant difference in high-density lipoprotein cholesterol （HDL-C） between the three groups （P > 0.05）. Serum FFA and RBP4 of T2DM patients was positively correlated with HbA1c， TC， TG， LDL-C， HOMA-IR and BMI （r > 0，P < 0.05）， ?β-arrestin2 was negatively correlated with HbA1c， TC， TG， LDL-C， HOMA-IR and BMI （r < 0，P < 0.05）. FFA， RBP4 and β-arrestin2 were not correlated with HDL-C （P > 0.05）. Conclusion In T2DM patients， the serum levels of FFA， β-arrestin2 and RBP4 were all abnormally expressed， which may jointly promote the disease progression of T2DM.

[Key words] β-arrestin2; Retinol binding protein 4; Free fatty acids; Clinical significance; Type 2 diabetes mellitus

糖尿病是一種以高血糖為特征的代謝性疾病，2型糖尿?。═2DM）是糖尿病的一種，約占其中的90%[1]。T2DM可并發(fā)多種并發(fā)癥，包括大血管病變、微血管病變以及末梢神經(jīng)病變等，嚴(yán)重危害患者身體健康，降低其生活質(zhì)量[2-3]。胰島素抵抗（IR）不僅是肥胖癥、高血壓、冠心病等多種疾病的發(fā)病基礎(chǔ)，同時(shí)也是T2DM發(fā)生、發(fā)展的核心因素[4]。揭示IR的具體發(fā)病機(jī)制，對(duì)于改善機(jī)體代謝紊亂和有效防治T2DM病情進(jìn)展具有積極的臨床意義。脂肪組織是IR發(fā)生的重要部位，該組織分泌的脂肪因子在IR中發(fā)揮重要作用。肝臟是脂肪代謝的重要器官，故內(nèi)臟脂肪因子與IR的發(fā)生相關(guān)[5]。游離脂肪酸（FFA）屬于中性脂肪分解產(chǎn)物[6]，視黃醇結(jié)合蛋白4（RBP4）屬于內(nèi)臟脂肪因子[7]，β抑制蛋白2（β-arrestin2）則為支架蛋白[8]，現(xiàn)臨床有關(guān)上述3個(gè)指標(biāo)與IR的作用關(guān)系尚不十分明確。本研究通過(guò)探討血清FFA、β-arrestin2、RBP4在T2DM患者中的表達(dá)及其臨床意義，以期為臨床T2DM的防治提供數(shù)據(jù)支撐。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取蘇州大學(xué)附屬?gòu)埣腋坩t(yī)院（以下簡(jiǎn)稱(chēng)“我院”）于2016年2月～2018年12月接收的123例T2DM患者作為觀察組。納入標(biāo)準(zhǔn)：均符合《中國(guó)2型糖尿病防治指南（2013年版）》[9]中有關(guān)T2DM的相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn);糖化血紅蛋白（HbAlc）≥6.5%或空腹血糖（FPG）>7.0 mmol/L。排除標(biāo)準(zhǔn)：①妊娠等其他原因引起的繼發(fā)性糖尿病者;②合并嚴(yán)重心肝腎等臟器功能不全者、免疫系統(tǒng)疾病者;③合并惡性腫瘤、急慢性感染者;④高血壓、血脂異常、動(dòng)脈粥樣硬化性疾病者。同時(shí)由門(mén)診收集患者的身高和體重，計(jì)算體重指數(shù)（BMI），BMI=體重（kg）/身高（m2）。根據(jù)BMI結(jié)果將觀察組分為T(mén)2DM肥胖組（BMI≥28 kg/m2，n = 62）和T2DM非肥胖組（BMI<28 kg/m2，n = 61），其中T2DM肥胖組：男32例，女30例;平均年齡（59.21±4.36）歲;平均病程（3.19±0.57）年。T2DM非肥胖組：男33例，女28例;平均年齡（58.86±5.06）歲;平均病程（3.29±0.60）年。另選取同期在我院做健康體檢的60名志愿者作為對(duì)照組，對(duì)照組男34例，女26例，平均年齡（59.64±5.28）歲。三組研究對(duì)象年齡、性別比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P > 0.05），具有可比性?；颊呒捌浼覍倬楸狙芯坎⒑炇鹆酥橥鈺?shū)，本研究已經(jīng)我院醫(yī)學(xué)倫理學(xué)委員會(huì)批準(zhǔn)進(jìn)行。

1.2 方法

觀察組于入院次日，對(duì)照組于體檢當(dāng)天，采集所有研究對(duì)象清晨空腹靜脈血6 mL，分為兩管，其中一管經(jīng)3200 r/min離心6 min，離心半徑8 cm，取上清液，置于-40℃冰箱中待測(cè)。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)β-arrestin2、FFA、RBP4水平，嚴(yán)格遵守試劑盒（上海雅培生物科技有限公司，批號(hào)分別為160123、20151106、20151123）說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。另一管采用美國(guó)BECKMAN CX8型全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)空腹血糖（FPG）、空腹胰島素（FINS）、糖化血紅蛋白（HbA1c）及高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、總膽固醇（TC）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）、三酰甘油（TG）。并計(jì)算胰島素抵抗指數(shù)（HOMA-IR）=FPG×FINS/22.5。

1.3 觀察指標(biāo)

比較三組血清FFA、β-arrestin2、RBP4和糖脂代謝指標(biāo)的水平差異，分析T2DM患者血清FFA、β-arrestin2、RBP4水平與糖脂代謝水平的相關(guān)性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 23.0對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，多組間比較采用方差分析，組間兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用百分率表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)。采用Pearson相關(guān)性分析血清FFA、β-arrestin2、RBP4水平與糖脂代謝水平的相關(guān)性。以P < 0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三組血清FFA、β-arrestin2、RBP4水平比較

T2DM肥胖組、T2DM非肥胖組血清FFA、RBP4水平高于對(duì)照組，且T2DM肥胖組高于T2DM非肥胖組（P < 0.05）;T2DM肥胖組、T2DM非肥胖組血清β-arrestin2水平低于對(duì)照組，且T2DM肥胖組低于T2DM非肥胖組（P < 0.05）。見(jiàn)表1。

2.2 三組糖脂代謝水平比較

T2DM非肥胖組、T2DM肥胖組HbA1c、TC、TG、LDL-C、HOMA-IR、BMI均高于對(duì)照組，且T2DM肥胖組高于T2DM非肥胖組（P < 0.05）;而三組HDL-C比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P > 0.05）。見(jiàn)表2。

2.3 T2DM患者血清FFA、β-arrestin2、RBP4水平與糖脂代謝水平的相關(guān)性分析

T2DM患者血清FFA、RBP4與HbA1c、TC、TG、LDL-C、HOMA-IR、BMI均呈正相關(guān)（P < 0.05），與HDL-C無(wú)相關(guān)性（P > 0.05）;β-arrestin2與HbA1c、TC、TG、LDL-C、HOMA-IR、BMI均呈負(fù)相關(guān)（P < 0.05），與HDL-C無(wú)相關(guān)性（P > 0.05）。見(jiàn)表3。

3 討論

T2DM是危害全球人類(lèi)健康的一類(lèi)內(nèi)分泌代謝性疾病，是環(huán)境和遺傳等多種因素共同作用的結(jié)果[10-12]。有研究證實(shí)糖代謝和脂代謝紊亂、IR與T2DM的發(fā)生息息相關(guān)，糖尿病是一組以高血糖為特征的代謝性疾病，而高血糖則是由于胰島素分泌缺陷或其生物作用受損，或兩者兼有引起。IR與胰島素受體的數(shù)目及胰島素的親和力有關(guān)，即胰島素受體數(shù)目越少或親和力減弱，組織對(duì)胰島素越不敏感，而胰島素受體數(shù)目越多或親和力增強(qiáng)，組織對(duì)胰島素越敏感[13-18]。而超重或肥胖患者細(xì)胞膜上的胰島素受體不足或存在缺陷，導(dǎo)致胰島素?zé)o法充分發(fā)揮其正常的生理效應(yīng)，引起抵抗素及FFA分泌增加，胰島素清除減少[19-22]。由此可推測(cè)脂肪組織所分泌的RBP4、β-arrestin2、FFA可能通過(guò)作用于胰島素敏感器官，從而影響糖脂代謝異常和IR的發(fā)生。

RBP4屬于視黃醇結(jié)合蛋白家族成員，主要由脂肪組織分泌，可對(duì)肝臟內(nèi)、肌肉內(nèi)的脂肪酸代謝進(jìn)行調(diào)控，進(jìn)而引起IR。β-arrestin2屬于抑制蛋白家族中的一員，主要分布于腦、心臟、腎等組織中，受多因素調(diào)節(jié)。楊會(huì)軍等[23]研究結(jié)果顯示，β-arrestin2可作為橋接蛋白與細(xì)胞內(nèi)的多種信號(hào)分子發(fā)生作用，影響細(xì)胞內(nèi)外信息傳遞，進(jìn)而參與細(xì)胞的增殖、凋亡和免疫應(yīng)答。鄭文帥等[24]動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，糖尿病小鼠中存在明顯的β-arrestin2低表達(dá)，給予相關(guān)β-arrestin2干預(yù)后，小鼠胰島素敏感性有所增加。FFA是機(jī)體主要功能物質(zhì)之一，主要由脂肪細(xì)胞內(nèi)的脂肪酸經(jīng)肢解酶分解而來(lái)。既往研究結(jié)果顯示[25]，F(xiàn)FA水平升高可對(duì)葡萄糖氧化、胰島β細(xì)胞功能以及胰島素基因表達(dá)產(chǎn)生較大影響，可抑制胰島素分泌。本研究結(jié)果顯示，T2DM患者不僅存在明顯的糖脂代謝紊亂，同時(shí)伴有FFA、RBP4水平異常升高，β-arrestin2水平異常降低，且其異常程度與肥胖相關(guān)。可見(jiàn)FFA、RBP4、β-arrestin2均在T2DM的病情進(jìn)展中發(fā)揮重要作用。進(jìn)一步相關(guān)性分析顯示，T2DM患者血清FFA、RBP4與HbA1c、TC、TG、LDL-C、HOMA-IR、BMI均呈正相關(guān)，而β-arrestin2則與上述指標(biāo)呈負(fù)相關(guān)。T2DM患者脂肪組織增加后，自然會(huì)引起代謝分解任務(wù)增加，引起血清FFA水平上升和機(jī)體內(nèi)脂質(zhì)的堆積，而FFA可通過(guò)干預(yù)葡萄糖-脂肪酸循環(huán)引起糖代謝功能障礙，并抑制胰島素β細(xì)胞對(duì)胰島素的分泌，削弱胰島素對(duì)骨骼肌及肝臟代謝的功能，進(jìn)而引起肝臟的IR[25]。RBP4可能是通過(guò)誘導(dǎo)磷酸烯醇、丙酮酸激酶基因，進(jìn)而提高肝糖輸出，抑制肌肉的糖攝取，進(jìn)而參與IR的形成[8];β-arrestin2 是胰島素抵抗與酪氨酸蛋白激酶相互作用的紐帶，可以激活G蛋白偶聯(lián)受體與蛋白β-arrestin2的連接通路，激活A(yù)kt途徑，實(shí)現(xiàn)胰島素信號(hào)的傳遞，當(dāng)機(jī)體β-arrestin2水平降低時(shí)，胰島素信號(hào)傳遞IR，S/β-arrestin2/酪氨酸蛋白激酶就無(wú)法激活A(yù)kt途徑，進(jìn)而引起IR[23]。因此FFA、RBP4、β-arrestin2水平可能共同參與T2DM的發(fā)生、發(fā)展。

綜上所述，T2DM患者中FFA、RBP4水平異常升高，β-arrestin2水平異常降低，三者可能共同促進(jìn)著T2DM的病情進(jìn)展，相關(guān)機(jī)制需要進(jìn)一步研究。

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（收稿日期：2019-07-02 ?本文編輯：顧家毓）