王新華　段方紅

【摘? 要】目的：建立較為完善的復(fù)方痔瘺洗劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。方法：采用化學(xué)方法鑒別復(fù)方痔瘺洗劑中芒硝的化學(xué)成份，采用薄層色譜法鑒別復(fù)方痔瘺洗劑中當(dāng)歸、防風(fēng)有效成份，采用高效液相色譜法測(cè)定防風(fēng)中的有效成份5-0-甲基維斯阿米醇苷含量。結(jié)果：化學(xué)鑒別專屬性強(qiáng)、靈敏度高，薄層色譜顯色清晰，高效液相色譜法精密度、重復(fù)性符合要求。結(jié)論：該方法檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠，簡(jiǎn)便易于操作，可用于復(fù)方痔瘺洗劑的質(zhì)量控制。

【關(guān)鍵詞】復(fù)方痔瘺洗劑;薄層色譜;高效液相色譜;質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

【中圖分類號(hào)】R726.12????? 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B????? 【文章編號(hào)】1004-7484（2020）09-0267-01

復(fù)方痔瘺洗劑為本院臨床使用多年的協(xié)定處方制劑，是一種主要治療痔瘡的外用洗液。該方由魚(yú)腥草、芒硝、當(dāng)歸、防風(fēng)、花椒、馬齒莧、白礬、側(cè)柏葉等組成，具有清熱散結(jié)，活血止血，消腫止痛的作用，用于治療痔瘡等療效明顯，副作用少。該制劑質(zhì)量控制目前僅參照《中國(guó)藥典》（2015版）制劑通則洗劑項(xiàng)下，進(jìn)行制劑成品的PH值、裝量和微生物限度等項(xiàng)目檢查。為制定較為完善的制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，更好地控制制劑質(zhì)量，現(xiàn)增加了該制劑中芒硝的化學(xué)成份鑒別^[1]，以及當(dāng)歸和防風(fēng)的薄層色譜法（TLC）鑒別^[1]，采用高效液相色譜法（HPLC）測(cè)定防風(fēng)中的有效成份5-0-甲基維斯阿米醇苷含量^[2]。報(bào)道如下：

1 儀器與試藥

1.1 儀器 島津LC-20A高效液相色譜儀（日本島津）;SPD-10AVP檢測(cè)站（日本島津）;LC-solusion色譜工作站;KB-500DB型數(shù)控超聲波清洗器;FW80，METTLERAE240型分析天平

1.2 試藥 復(fù)方痔瘺洗劑（編號(hào)151023，本院提供）;當(dāng)歸對(duì)照藥材（批號(hào)：120927-201516）;

防風(fēng)對(duì)照藥材（批號(hào)：120947-201409）;5-0-甲基維斯阿米醇苷對(duì)照品（批號(hào)：111523-201509）

以上對(duì)照均來(lái)自中國(guó)食品藥品檢定研究院;甲醇（色譜純），純化水（自制），其他試劑（分析純）。

2 方法與結(jié)果

2.1 鑒別

2.1.1 處方中芒硝的鑒別 取本品1ml至10ml刻度試管中，加水稀釋至刻度，搖勻，照一般鑒別試驗(yàn)^[1]項(xiàng)下鈉鹽與硫酸鹽的鑒別反應(yīng)試驗(yàn)。鈉鹽鑒別試驗(yàn)為取鉑絲，用鹽酸濕潤(rùn)后，蘸取供試品，在無(wú)色火焰中燃燒，火焰即現(xiàn)鮮黃色。硫酸鹽鑒別試驗(yàn)為取供試品3ml，滴加醋酸鉛試液，即生成白色沉淀;分離，沉淀在氫氧化鈉試液中溶解。

2.1.2 處方中當(dāng)歸的TLC鑒別

供試品溶液的制備：取本品20ml，用乙醚提取2次，每次10ml，合并乙醚液，揮至1ml，作為供試品溶液。

對(duì)照品溶液的制備：取當(dāng)歸對(duì)照藥材0.5g，加乙醚20ml，超聲處理10分鐘，濾過(guò)，濾液揮干，殘?jiān)右颐?ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液。

陰性樣品溶液的制備：取處方中藥材，除去當(dāng)歸，按本制劑制備工藝制備不含當(dāng)歸的陰性樣品，同上述方法制成陰性樣品溶液。

方法：照薄層色譜法^[1]試驗(yàn)，吸取供試品溶液、陰性樣品溶液20μl、對(duì)照藥材溶液10μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以正己烷-乙酸乙酯（4：1）為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置紫外光燈（365nm）下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)，而陰性樣品在相應(yīng)的位置處沒(méi)有熒光斑點(diǎn)。樣品斑點(diǎn)清晰，分離效果好，3批樣品檢測(cè)重現(xiàn)性好。試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)圖1。

2.1.3處方中防風(fēng)的TLC鑒別

供試品溶液的制備：取本品20ml，加乙醚振搖提取2次，每次20ml ，棄去乙醚液。水液加水飽和的正丁醇振搖提取2次，每次20ml， 合并正丁醇液，加入氨試液40ml，搖勻，放置使分層，分取正丁醇液，蒸干，殘?jiān)右掖糽ml使溶解，作為供試品溶液。

對(duì)照藥材溶液的制備：取防風(fēng)對(duì)照藥材1g，加水50ml，煎煮30分鐘，濾過(guò)，濾液濃縮至20ml，同法制成對(duì)照藥材溶液。

對(duì)照品溶液的制備：取5-0-甲基維斯阿米醇苷對(duì)照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。

陰性樣品溶液的制備：取處方中藥材，除去防風(fēng)，按本制劑制備工藝制備不含防風(fēng)的陰性樣品，同上述方法制成陰性樣品溶液。

方法：照薄層色譜法^[1]試驗(yàn)，吸取上述四種溶液各10μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以正己烷-乙酸乙酯（4：1）為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置紫外光燈（254nm）下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。而陰性樣品在相應(yīng)的位置處沒(méi)有熒光斑點(diǎn)。樣品斑點(diǎn)清晰，分離效果好，3批樣品檢測(cè)重現(xiàn)性好。試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)圖2。

2.2 檢查 按照制劑通則洗劑項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定檢查^[1]。

2.3 含量測(cè)定

2.3.1 對(duì)照品溶液制備^[2] 精密稱取5一O一甲基維斯阿米醇苷對(duì)照品適量，用甲醇稀釋，制成1ml含5一O一甲基維斯阿米醇苷12.81ug溶液備用。

2.3.2 供試品溶液的制備^[2] 取復(fù)方痔瘺洗劑，用0.45um微孔濾膜過(guò)濾，精密量取濾液50mL置蒸發(fā)皿水浴濃縮至5ml左右，移至量50mL瓶中，加甲醇定容至刻度。

2.3.3 樣品測(cè)定 分別取對(duì)照品溶液以及按“2.3.2”項(xiàng)下制成的三批樣品溶液，依法^[1]測(cè)定，計(jì)算含量即得。

3 討論

關(guān)于定量分析指標(biāo)成份的確定。對(duì)防風(fēng)中有效成份研究，國(guó)內(nèi)文獻(xiàn)報(bào)道^[3-5]較多，大多采用高效液相色譜法對(duì)其中的有效成份進(jìn)行定量分析。鑒于其有效成份中5一O一甲基維斯阿米醇苷為該中藥發(fā)揮藥效作用的主要化學(xué)成份^[6]，同時(shí)也為了便于定量分析，防止其他成分干擾^[7]，本文選擇其中的有效成份之一5一O一甲基維斯阿米醇苷作為復(fù)方痔瘺洗劑定量分析的指標(biāo)。

參考文獻(xiàn)

[1]《中國(guó)藥典》2015年版4部，中國(guó)醫(yī)藥科技出版社[M].

[2]田曉東，俞桂新，藍(lán)悠，李暉.HPLC測(cè)定消痔坐浴劑中5一O一甲基維斯阿米醇苷的含量[J].《江西中醫(yī)藥》，2013， 44 （5）：54-56

[3]張?zhí)亓ⅲ诖涸?，魏興波，單靜思，劉肖瑩.防風(fēng)有效成分的提取工藝研究[J].《黑龍江醫(yī)藥科學(xué)》，2012，35（3）：26-27

[4]姜艷艷，劉斌，石任兵.高效液相色譜法測(cè)定防風(fēng)色原酮部位中4種成分含量[J].北京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2006，29（2）：128.

[5]胡紫艷，馮振斌，蔣健.HPLC測(cè)定不同產(chǎn)地防風(fēng)中4種有效成分的含量[J].《中國(guó)執(zhí)業(yè)藥師》，2016，13（11）：32

[6]嚴(yán)葉霞.反相高效液相色譜法測(cè)定防風(fēng)通圣丸中5-0一甲基維斯阿米醇苷的含量[J].《中南藥學(xué)》，2012，10（2）：102

[7]張銳，彭?xiàng)钿J.HPLC法測(cè)定防芷鼻炎膠囊中5-0一甲基維斯阿米醇苷[J].《中草藥》2007，38（9）：1343

作者簡(jiǎn)介：

王新華（1965-），男，山東長(zhǎng)清，本科，副主任藥師，研究方向：主要從事藥事管理工作。