黃志承
【摘 要】目的:分別采取精子染色質結構測定法(SCSA)和精子染色質擴散法(SCD)對精子DNA碎片指數(shù)進行檢測,并對其價值進行對比分析。方法:隨機選取自2017年8月到2018年8月來我院收治的男性患者的116例精液標本,分別采取兩種方法對精子DNA碎片指數(shù)進行檢測,記為SCSA法組和SCD法組。對比2組檢測結果的差異和相關性。結果:兩組的檢測結果呈線性正相關,一致性良好;SCD法檢測精液標本的DFI均值為(15.4±8.9)%,SCSA法的均值為(14.2±7.3)%,SCD法的檢測結果高于SCSA法,差異明顯,P<0.05,有統(tǒng)計學意義。結論:精子染色質結構測定法(SCSA)和精子染色質擴散法(SCD)對精子DNA碎片指數(shù)的檢測結果相關性良好,但SCD法的檢測結果普遍高于SCSA法。
【關鍵詞】精子染色質結構測定法;精子染色質擴散法;精子DNA碎片指數(shù);價值;比較
【中圖分類號】R44 【文獻標識碼】B【文章編號】1002-8714(2019)11-0172-01
隨著社會的發(fā)展,各種因素的出現(xiàn)也使不育患者的數(shù)量趨于增加,而男性因素導致的不育也占了很大比例[4]。精液的質量與精子的數(shù)量、密度、活動率等有關,但這些項目的結果分析主觀性較強,參數(shù)波動大,具有一定的局限性[3]。精子的DNA碎片化指數(shù)更多的反映了精子遺傳物質的完整性,而精子DNA的完整性是判斷精子質量的重要依據,因此,精子DNA碎片化檢測就是精子質量的檢測過程[2]。目前常用的DNA碎片的檢測方法包括SCSA法和SCD法等[5]。為了探究精子染色質結構測定法(SCSA)和精子染色質擴散法(SCD)對精子DNA碎片指數(shù)的檢測價值,此次我院針對該課題展開了研究,并取得了顯著效果。以下是詳細報道。
1 資料與方法
1.1臨床資料 此次涉及到的116例精液標本,均來自我院于2017年8月到2018年8月期間收治的男性患者。年齡22~44歲,平均年齡(31.8±3.1)歲;納入此研究的患者均無其他重大疾病和不良生活嗜好,排除睪丸、附睪、輸精管等有異常者,且患者均知情并同意。此次研究已經過了醫(yī)院倫理委員會的批準。
1.2方法
患者首先禁欲3~7 d,通過手淫法進行收集精液。
SCSA法組[1-5]:采用精子核完整性染色試劑盒(浙江星博生物科技公司),對精子進行吖啶橙染色。精子受損時,其DNA經酸處理后變性為單鏈,與吖啶橙反應呈紅色或黃色熒光;而正常精子為雙鏈,與吖啶橙反應呈綠色熒光。染色后,采用BD FACSCalibur流式細胞儀進行分析,分析的結果通過DFI Viewer軟件進行處理,最終得出DFI。
SCD法組[1-5]:采用精子DNA碎片檢測試劑盒(深圳博銳德生物科技有限公司)。將待測精液標本置于凝膠中,充分混勻,將懸液鋪于載玻片上,通過酸處理使精子DNA變性,然后溶解細胞去除核蛋白。瑞氏染色,用相差顯微鏡進行觀察。正常精子可擴散形成特征性光暈,而受損精子則不產生或產生很小。高倍鏡下多個視野計數(shù)500個精子,根據暈環(huán)的有無和大小計算所占比例,并進一步得出精子的DFI。
1.3觀察指標
1.3.1對兩組檢測結果的相關性進行比較分析。
1.3.2對兩組檢測精液標本的DFI均值進行比較分析。
1.4統(tǒng)計學方法 數(shù)據均采用SPSS20.0軟件進行統(tǒng)計分析,計量資料(X±S)表示,t檢驗,計數(shù)資料(%)表示,x2檢驗,P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。
2 結果
2.1兩組檢測結果的相關性
兩組的相關系數(shù)r=0.792,呈線性正相關,一致性良好。
2.2兩組精液標本的DFI均值對比
SCD法組的均值為(15.94±8.69)%,SCSA法組為(13.79±8.01)%,SCD法組顯著高于SCSA法組,P<0.05,具有統(tǒng)計學意義。
3 討論
近年來,隨著生活水平的提高,環(huán)境污染越來越重,人們的不良生活習慣也逐漸增多,而這些因素嚴重影響著精子的質量[5]。不育中的男性因素占了很大比例。而有研究表明,原因不明的不育男性中,常常出現(xiàn)精子DNA損傷的情況[4],這極可能是造成男性不育的重要原因。精子DNA碎片化反映的是精子遺傳物質的完整性,與不育和反復流產息息相關[5]。因此,精子DNA碎片化指數(shù)是判斷精子質量的重要依據。
目前常用的DNA碎片的檢測方法包括SCSA法和SCD法等[5]。SCSA法的原理通過與吖啶橙反應形成的不同熒光信號來反映DFI。而SCD法通過對是否形成特征性光暈來推算DFI。經過研究發(fā)現(xiàn),兩種方法的檢測結果呈線性正相關,一致性良好;SCD法檢測精液標本的DFI大于SCSA法差異明顯,P<0.05,有統(tǒng)計學意義。對兩組結果進行分析,出現(xiàn)上述情況可能是由于SCSA法測定精子DFI由機器來完成,較為客觀;而SCD法檢測DFI主要是依據觀察者對光暈的判斷,較為主觀。
總之,SCD法簡便易行、價格低廉、無設備要求,但精密度較差,需大量培訓來避免人為誤差;而SCSA法快速、準確、客觀,但有較高的設備要求,費用高。因此,在臨床應用中,應根據兩種方法的不同特點進行選擇。
參考文獻
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