韓淑琴　王俊

摘 要：在當(dāng)前的手性藥物分析中，色譜法是使用最為普遍的一種方式。在本文中，主要的針對(duì)集中色譜法技術(shù)進(jìn)行了分析，并分析了其原理和特點(diǎn)。并基于國(guó)內(nèi)外的相關(guān)研究，分析了在手性藥物拆分中的四種方式應(yīng)用的現(xiàn)狀和前景，預(yù)測(cè)了發(fā)展的趨勢(shì)。本文在對(duì)不同色譜法手性研究的基礎(chǔ)上，對(duì)不同方式的優(yōu)缺點(diǎn)進(jìn)行了分析和總結(jié)。

關(guān)鍵詞：色譜法;分離;手性藥物;研究

1 色譜分離方法

1.1 高效液相色譜法

在當(dāng)前的手性藥物分離中，高效液相色譜法是使用最多最頻繁的，主要方式分為直接法和間接法。

在丁徐中研究中，針對(duì)N-叔丁氧羰基-3-羥基-1-金剛烷甘氨酸對(duì)映體，使用正相高效液相色譜法方式進(jìn)行了拆分。利用ChiralpakID手性色譜柱，流速是0.8mL/min，柱溫是30℃，流動(dòng)相是V（正己烷）：V（乙醇）=85：15，實(shí)現(xiàn)基線分離，分離度為3.72。

程彪平等基于反相高效液相色譜，采用自制手性固定相（CDSP和NCDSP），有效進(jìn)行了滅菌唑和烯唑醇的手性分離研究，分離因子是1.29和1.28，并且分離度為3.84和3.23。

王嘉林等研究中，將羥丙基-β-環(huán)糊精作為手性流動(dòng)相添加劑，利用反相高效液相色譜，有效分離了鹽酸帕洛諾司瓊。在流動(dòng)相為0.5%三乙胺（1%羥丙基-β-環(huán)糊精，用乙酸調(diào)節(jié)pH至5.5）-乙腈=85：15，流速為0.5mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為240nm，柱溫為30℃，進(jìn)樣量為10μl條件下，分離度達(dá)到1.4。

1.2 毛細(xì)管電泳色譜法（CE）

該方式在上世紀(jì)的九十年代中被大量的研究和試驗(yàn)，并且得到了飛速發(fā)展，經(jīng)常利用的手性選擇試劑為環(huán)糊精（CD）和衍生物，以及冠醚等等。

孫嘉儀等研究選擇的手性選擇劑為選擇羧甲基-β-環(huán)糊精，利用毛細(xì)管電泳法，針對(duì)4種手性藥物進(jìn)行了拆分，并且在最優(yōu)的環(huán)境下，氯苯那敏、羥氯喹和班布特羅以及沙丁胺醇的分離度分貝分別是10.49、6.67、和3.75、1.56。

Kuhn等在研究中，將冠醚（18C6H4）作為手性添加劑，使用毛細(xì)管電泳法，實(shí)現(xiàn)了降麻黃堿和重酒石酸去甲腎上腺素等藥物的分離，并且根據(jù)在手性分離過(guò)程中的熱力學(xué)參數(shù)轉(zhuǎn)變，得出了立體位阻機(jī)理，并分析了側(cè)面靜電的作用原理。無(wú)紫外吸收的伯胺類使用手性冠醚，并采取UV檢測(cè)的方式不需要衍生，能夠直接分離。

王丙香等針對(duì)毛細(xì)管內(nèi)壁，使用涂層技術(shù)做出改進(jìn)，對(duì)非特異性吸附進(jìn)行抑制，減輕了石英毛細(xì)管出現(xiàn)的吸附，從而提高了分離效率。

在利用毛細(xì)管電泳色譜法時(shí)，能夠選擇很多的分離模式，并且容易進(jìn)行變換，對(duì)手性選擇劑的使用量少，成本比較少。然而因?yàn)樘幚砹可?，難以在分離制備中進(jìn)行，主要是進(jìn)行分析測(cè)定，并且在光學(xué)雜質(zhì)測(cè)定中得到應(yīng)用。

1.3 薄層色譜法（TLC）

手性分離中，薄層色譜是常用的十分簡(jiǎn)單的色譜技術(shù)，經(jīng)常使用的手性薄層板包含纖維素和衍生物型手性薄層板，以及浸漬的手性選擇劑等等。

纖維素板和微晶纖維素板，以及預(yù)涂纖維素薄層板的應(yīng)用多數(shù)都是在二肽、氨基酸及其衍生物對(duì)映體的拆分中。在德國(guó)的Merck公司中，其TCL薄板不但能夠?qū)崿F(xiàn)對(duì)酰胺和二肽以及氨基酸和衍生物對(duì)映體的拆分，并且對(duì)于α-氨基酸和α-羥基酸，有著很好的分離效果，并且能夠測(cè)定映體的純度。在當(dāng)前的衍生化氨基酸分離中，浸漬手性選擇劑手性薄層色譜板是最為高效的方式。

薄層色譜手性分離方式需要的設(shè)備很簡(jiǎn)便，并且容易操作，有著很強(qiáng)的樣品適應(yīng)性，容易調(diào)整各項(xiàng)色譜參數(shù)，然而因?yàn)槭中员由V板價(jià)格高等等原因，導(dǎo)致其難以廣泛應(yīng)用。

1.4 超臨界流體色譜法（SFC）

超臨界流體是具有液體和氣體雙重優(yōu)點(diǎn)的氣體，介于氣體和液體之間的流體。CO2和其他的液體比起來(lái)，無(wú)毒并且極性低，更能夠貼近臨界狀態(tài)，比較穩(wěn)定，和LC檢測(cè)器有著很好的兼容性，因此，也常常被當(dāng)做超臨界流體使用。

繆葉龍等在研究中，將超臨界二氧化碳（CO2）作為流動(dòng)相，利用Sino-ChiralOJ和ChiralpakIB手性柱，進(jìn)行了醇類的添加和改進(jìn)，針對(duì)六類手性三唑類殺菌劑實(shí)施映體分離，有著很好的效果。

羅英豪利用ChiralpakAD-H色譜柱，使用超臨界流體色譜法，萘普生對(duì)映體進(jìn)行了拆分，柱溫是20℃，并且在極性添加劑異丙醇是20%，其背壓是170bar，在283nm的檢測(cè)波長(zhǎng)下，萘普生實(shí)現(xiàn)了基線分離，并且分離度是4.31。

超臨界流體色譜法在應(yīng)用中分析時(shí)間短，并且柱平衡快，并且和高效液相色譜比起來(lái)，在流速和分離時(shí)間方面存在著明顯優(yōu)勢(shì)，并且對(duì)溶劑消耗比較少，因?yàn)榉N種的優(yōu)勢(shì)，在當(dāng)前的手性藥物制備和分析中得到了廣泛的應(yīng)用。

2 結(jié)束語(yǔ)

綜上所述，色譜方法是常見(jiàn)的手性藥物方法，并且不同方法都有著自身的優(yōu)勢(shì)并且能夠彌補(bǔ)其他方法的不足，也正是存在這些相互補(bǔ)充，才能夠讓我們得到不同的光學(xué)純化合物。

參考文獻(xiàn)：

[1]仇小丹，趙婷，朱志玲，山廣志.超臨界流體色譜法在手性藥物分離中的應(yīng)用[J].中國(guó)醫(yī)藥生物技術(shù)，2019， 14（01）：64-68.

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