周明良，喻建輝，余春濤，江平嶼

（江西汪氏蜜蜂園有限公司，江西南昌 330100）

0 引言

蜂王漿是蜜蜂巢中培育幼蟲(chóng)的5～15日青年工蜂咽頭腺的分泌物[1]，也就是成年蜜蜂采食花粉后，自身分泌出的一種不同于蜂蜜的乳狀物質(zhì)，天然的蜂王漿顏色為乳白色，由于其中成分的高低或者環(huán)境差異，有時(shí)也會(huì)呈現(xiàn)微黃色，此乳狀物就像哺乳動(dòng)物的乳汁，是供給將要變成蜂王的幼蟲(chóng)的食物，營(yíng)養(yǎng)成分較為復(fù)雜，并且極具營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和免疫功能，也是蜂王一直都要食用的食物，在保健功能食品上有著極為重要的應(yīng)用價(jià)值，也可以應(yīng)用于醫(yī)療中，是介于食品與藥品之間的純天然保健食品[2]。

蜂王漿成分比較復(fù)雜，其中含有維生素A族以及B族物質(zhì)，另外蛋白質(zhì)和糖類(lèi)是其中含量較多的物質(zhì)，脂類(lèi)物質(zhì)液存在蜂王漿中，除去這些大分子物質(zhì)，還有一些人體需要的氨基酸，在蜂王漿中也有發(fā)現(xiàn)。據(jù)研究，蜂王漿中含有26種以上的游離氨基酸[3]。10-羥基-α-癸烯酸，是人們較為熟知的王漿酸，生物術(shù)語(yǔ)上一般簡(jiǎn)寫(xiě)成10-HDA。王漿酸是自然界中很稀有的物質(zhì)，一般來(lái)說(shuō)是蜂王漿中特有的物質(zhì)，常常代表著蜂王漿品質(zhì)的優(yōu)劣。蜂王漿食用營(yíng)養(yǎng)價(jià)值極高，在蜂王漿的總脂肪酸中占有的比例在50%以上，同時(shí)還具有抗菌、抗病、抑制癌細(xì)胞生長(zhǎng)等作用[4]。

許多國(guó)內(nèi)外營(yíng)養(yǎng)學(xué)家對(duì)蜂王漿進(jìn)行了大量的研究認(rèn)為，蜂王漿是一種可供人類(lèi)直接食用的、具有高活性成分的超級(jí)營(yíng)養(yǎng)食品。其中，周愛(ài)萍等人[5]通過(guò)動(dòng)物試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，分別經(jīng)口給予小鼠不同劑量的蜂王漿30 d，能明顯增加抗體生成細(xì)胞數(shù)，高劑量試驗(yàn)中還能提高小鼠NK細(xì)胞活性率，表明蜂王漿具有調(diào)節(jié)小鼠免疫的功能。張敬等人[6]觀察蜂王漿凍干粉對(duì)小鼠免疫功能影響時(shí)發(fā)現(xiàn)，蜂王漿凍干粉可以提高小鼠單核巨噬細(xì)胞系統(tǒng)和細(xì)胞免疫。同時(shí)還有研究表明，蜂王漿除了能滿(mǎn)足蜂王和幼蟲(chóng)的基本新陳代謝以外，還可以調(diào)節(jié)身體機(jī)能和免疫功能[7-8]。

試驗(yàn)通過(guò)采用不同劑量的蜂王漿灌胃小鼠，通過(guò)觀察其體重的變化，臟器/體重的比值、NK細(xì)胞活性率、淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率、半數(shù)溶血值及抗體生成細(xì)胞數(shù)來(lái)研究蜂王漿對(duì)小鼠免疫功能的影響。

1 材料和方法

1.1 樣品

由江西汪氏蜜蜂園有限公司提供的蜂王漿軟膠囊，其中內(nèi)容物中蜂王漿凍干粉的比例為34%，于4℃下保存，供試驗(yàn)用。

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物及環(huán)境

SPF級(jí)昆明種雌性小鼠200只，體重18～22 g，由長(zhǎng)沙市天勤生物技術(shù)有限公司提供，飼料也由該單位提供，試驗(yàn)共分為兩大組，每大組有小鼠40只，免疫一組進(jìn)行NK細(xì)胞的活性測(cè)定、進(jìn)行ConA誘導(dǎo)的小鼠淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)；免疫二組，進(jìn)行臟體比值測(cè)定、半數(shù)溶血值（HC50）的測(cè)定和抗體生成細(xì)胞數(shù)的測(cè)定。試驗(yàn)期間，控制環(huán)境溫度為22～24℃，濕度為50%～56%。

1.3 劑量設(shè)計(jì)

人體推薦攝入量為3.0 g/日劑量的設(shè)計(jì)需參考人體，以其每日推薦量來(lái)確定，其每日推薦攝入量為3.0 g/日，相對(duì)劑量設(shè)計(jì)來(lái)說(shuō)，也就是0.05 g/（kg·bw），根據(jù)該推薦量設(shè)置3個(gè)劑量組，5倍的低劑量組0.25 g/（kg·bw）、10倍的中劑量組0.5 g/（kg·bw）、30倍的高劑量組 1.5 g/（kg·bw），分別取汪氏牌蜂王漿軟膠囊內(nèi)容物5.0，10.0，30.0 g加植物油定容至200 mL，按0.1 mL/10 g·bw體積給小鼠灌胃，對(duì)照組給予相同體積的植物油。每天1次，連續(xù)灌胃至少30 d。

1.4 儀器與試劑

動(dòng)物臺(tái)秤、分析天平、潔凈工作臺(tái)、二氧化碳培養(yǎng)箱、離心機(jī)、722型分光光度計(jì)、恒溫水浴箱、酶標(biāo)儀、顯微鏡等。

無(wú)菌手術(shù)器械、游標(biāo)卡尺、微量注射器、細(xì)胞計(jì)數(shù)器、24孔和96孔平底細(xì)胞培養(yǎng)板，96孔U型細(xì)胞培養(yǎng)板、玻璃平皿、紗布、試管、玻片架、200目篩網(wǎng)、計(jì)時(shí)器、血色素吸管、載玻片等。

SRBC、生理鹽水、Hank's液、RPMI1640培養(yǎng)液、小牛血清、青鏈霉素、ConA、1%冰醋酸、1 mol/L的HCl溶液、酸性異丙醇、MTT、PBS緩沖液（pH值7.2～7.4）、補(bǔ)體（豚鼠血清）、SA緩沖液、瓊脂糖、都氏試紙、YAC-1細(xì)胞、乳酸鈉、硝基氯化四氮唑、吩嗪二甲酯硫酸鹽、氧化型輔酶Ⅰ、0.2 mol/L的Tris-HCl緩沖液、2.5%Triton、印度墨汁、0.1%的碳酸鈉、雞紅細(xì)胞、甲醇、Giemsa染液等。

1.5 試驗(yàn)方法

1.5.1 臟器/體重比值測(cè)定

稱(chēng)量后處死小鼠，取出脾臟和胸腺，在電子分析天平上稱(chēng)量，計(jì)算臟器/體重比值。

1.5.2 ConA誘導(dǎo)的小鼠淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)（MTT法）

取脾，在無(wú)菌環(huán)境下，將小鼠的脾臟取出，小平皿中裝有適量無(wú)菌Hank's液，然后把小鼠的脾臟放入，制成細(xì)胞懸液，細(xì)胞懸液需要經(jīng)過(guò)篩網(wǎng)過(guò)濾，過(guò)濾目數(shù)在200目即可，離心前需要用Hank's液清洗，清洗次數(shù)2～3次。過(guò)濾后的細(xì)胞懸液還需要經(jīng)過(guò)離心，每次離心10 min（轉(zhuǎn)速1 000 r/min）。細(xì)胞懸液是用來(lái)活細(xì)胞計(jì)數(shù)，所以需要將處理好的細(xì)胞懸液放在1 mL完全培養(yǎng)液中，細(xì)胞濃度不宜過(guò)高或過(guò)低，一般設(shè)置在3×106個(gè)/mL，此時(shí)需要用RPMI1640培養(yǎng)液來(lái)對(duì)其進(jìn)行調(diào)整，細(xì)胞懸液經(jīng)過(guò)調(diào)整后要分成2孔加入24孔培養(yǎng)板中，每孔1 mL，在其中一孔加75μL ConA液（相當(dāng)于7.5μg/mL），另一孔作為對(duì)照，設(shè)置培養(yǎng)時(shí)間為72 h，培養(yǎng)環(huán)境中需要5%二氧化碳，控制溫度為37℃。培養(yǎng)時(shí)，需要注意不能直接等時(shí)間結(jié)束后取出，在結(jié)束前4 h要吸取上清液0.7 mL，用不含小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)液0.7 mL進(jìn)行補(bǔ)充，與此同時(shí)還應(yīng)該加入MTT（5 mg/mL），也就是相當(dāng)于50μL/孔的量繼續(xù)培養(yǎng)，時(shí)間為4 h。酸性異丙醇要在培養(yǎng)結(jié)束后的時(shí)候加入，每孔加入1 mL，輕輕吹氣攪打混勻，使得紫色結(jié)晶的物質(zhì)完全溶解。溶解后才能分裝在培養(yǎng)板中，每個(gè)培養(yǎng)板為96孔，每個(gè)孔都需要作平行，數(shù)目為3個(gè)，測(cè)定光密度值使用酶標(biāo)儀，設(shè)置570 nm波長(zhǎng)。淋巴細(xì)胞的增殖能力就可以用光密度值來(lái)表示，即用ConA孔的光密度值減去不加ConA孔的光密度值。

1.5.3 抗體生成細(xì)胞檢測(cè)（Jerne改良玻片法）

取羊血，使用生理鹽水洗滌，洗滌次數(shù)2～3次，之后需要以轉(zhuǎn)速2 000 r/min離心10 min，SRBC需要用生理鹽水配成質(zhì)量分?jǐn)?shù)為20%的細(xì)胞懸液，每鼠腹腔注射0.2 mL。4 d后，將小鼠處死、取脾，在無(wú)菌環(huán)境下將小鼠的脾臟取出，小平皿中裝有適量無(wú)菌Hank's液，然后把小鼠的脾臟放入，制成細(xì)胞懸液，細(xì)胞懸液需要經(jīng)過(guò)篩網(wǎng)過(guò)濾，過(guò)濾目數(shù)在200即可，離心前需要用Hank's液清洗，清洗次數(shù)2～3次。細(xì)胞懸液是用來(lái)活細(xì)胞計(jì)數(shù)用，所以需要將處理好的細(xì)胞懸液放在8 mL完全培養(yǎng)液中，細(xì)胞濃度不宜過(guò)高或過(guò)低，一般設(shè)置在5×106個(gè)/mL。表層培養(yǎng)基需要稍微加熱使其完全溶解，溶解后、要用2倍濃度的Hank's液與表層培養(yǎng)基等量混合，Hank's液酸堿度應(yīng)調(diào)節(jié)為pH值7.4，混合后分裝小試管，每管0.5 mL，再向管內(nèi)加入用SA液配制的10%SRBC 20μL（V/V）、20μL脾細(xì)胞懸液 （5×106個(gè)/mL），準(zhǔn)備好刷有薄層瓊脂糖的玻片，快速將懸液混合，混合后倒在玻片上，玻片扣在玻片架上應(yīng)保持水平，待瓊脂糖凝固，放入二氧化碳培養(yǎng)箱中溫育，溫育時(shí)間為1.5 h，然后用SA液稀釋的補(bǔ)體，補(bǔ)體比例為（1∶8） 加入到玻片凹槽內(nèi)，繼續(xù)溫育1.5 h后，計(jì)數(shù)溶血空斑數(shù)來(lái)表示抗體生成水平。

1.5.4半數(shù)溶血值（HC50）的測(cè)定

取羊血，然后使用生理鹽水洗滌，洗滌次數(shù)2～3次，SRBC需要用生理鹽水配成質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2%的細(xì)胞懸液，每鼠腹腔注射0.2 mL。4 d后，取血樣品放在離心管，方式也略有不同，用摘除眼球的方法，樣品血不能立即處理，需要放置1h，血樣品會(huì)凝固，然后從管壁上取下，血清要分離，以轉(zhuǎn)速2 000 r/min離心10 min，這樣血清會(huì)分離得比較充分，收集血清。血清需要稀釋一定的倍數(shù)，以200倍為佳，稀釋液用SA，取1 mL置試管內(nèi)，用SA緩沖液配制10%（V/V） SRBC和補(bǔ)體（1∶8） 分別加入0.5 mL和1 mL。這里的對(duì)照管加SA緩沖液。置恒溫水浴中保溫，溫度37℃，時(shí)間30 min，保溫后要使用冰浴停止反應(yīng)。以轉(zhuǎn)速2 000 r/min離心10 min，取上清胞100μL攪拌，之后再加入2.5%Triton 100μL，這些孔都需要設(shè)置平行孔，一般要設(shè)置3個(gè)，處理好后放在二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)4 h，二氧化碳體積分?jǐn)?shù)為5%，培養(yǎng)溫度37℃，然后將96孔培養(yǎng)板放在離心機(jī)中離心5 min處理，轉(zhuǎn)速設(shè)置為1 500 r/min，然后吸取每個(gè)孔的上清液100μL，同樣也要放在平底96孔的培養(yǎng)板中培養(yǎng)一段時(shí)間。除了這個(gè)處理，LDH基質(zhì)液也要及時(shí)加入等量的覆蓋混勻，由于室溫的不同，一般反應(yīng)3～10 min，每孔加入1 mol/L的HCl 30μL，在酶標(biāo)儀處測(cè)定光密度（OD），測(cè)定波長(zhǎng)設(shè)置為490 nm。

1.6 試驗(yàn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

1 mL，加都氏試劑3 mL。SRBC用SA緩沖液配制的10%（V/V），使用0.25 mL，空白對(duì)照用等量的都氏試劑，分別于波長(zhǎng)540 nm處測(cè)定各管光密度值。溶血素的量以半數(shù)溶血值（HC50）表示，按下式計(jì)算：

數(shù)據(jù)需要經(jīng)過(guò)轉(zhuǎn)化和統(tǒng)計(jì)分析，試驗(yàn)中采用Excel，Spss軟件進(jìn)行。用Spss軟件分析時(shí)，如果方差齊，波動(dòng)較小，那么單因素方差分析之后，再進(jìn)行總體比較，發(fā)現(xiàn)差異的時(shí)候要用Dunnett法對(duì)劑量組進(jìn)行比較。如果方差不齊，對(duì)原始數(shù)據(jù)有適當(dāng)?shù)霓D(zhuǎn)化是正常的，這樣使得數(shù)據(jù)滿(mǎn)足方差齊性，用轉(zhuǎn)換后的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)；如果達(dá)不到方差齊，則改用秩和檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，發(fā)現(xiàn)總體比較有差異，采用Tamhane'sT2檢驗(yàn)進(jìn)行兩兩比較，該方法不要求方差齊性。

1.5.5 NK細(xì)胞活性的測(cè)定（乳酸脫氫酶測(cè)定法）

受試小鼠采用頸椎脫臼的方法處死，將小鼠的脾臟作為觀察對(duì)象，取脾時(shí)要在無(wú)菌環(huán)境下，將取出的脾臟小心碾碎，制成一定濃度的細(xì)胞懸液，并采用Hank's液洗2～3次。經(jīng)過(guò)洗滌后，對(duì)懸液進(jìn)行離心10 min（轉(zhuǎn)速1 000 r/min） 處理，丟棄浮起的上清液，將細(xì)胞漿彈起。用滅菌水0.5 mL處理20 s即可，經(jīng)此方法處理可以裂解紅細(xì)胞，然后再加入0.5 mL Hank's液及8 mL Hank's液，同樣要采用離心的處理，以轉(zhuǎn)速1 000 r/min離心10 min即可。將樣品進(jìn)行重懸處理，小牛血清的RPMI1640完全培養(yǎng)液的質(zhì)量分?jǐn)?shù)10%，1 mL處理即可，計(jì)數(shù)前要處理，用1%冰醋酸稀釋?zhuān)?jì)數(shù)活細(xì)胞采用苔酚藍(lán)染色的方法，（活細(xì)胞數(shù)達(dá)95%以上的樣品才可以采用），細(xì)胞濃度不宜過(guò)高或過(guò)低，這里調(diào)整為2×107個(gè)/mL，得到效應(yīng)細(xì)胞，生長(zhǎng)良好的YAC-1細(xì)胞才可以用作有效的試驗(yàn)，需經(jīng)過(guò)傳代24 h，細(xì)胞濃度需要使用RPMI1640完全培養(yǎng)液，調(diào)整為4×105個(gè)/mL，得到靶細(xì)胞；靶細(xì)胞和效應(yīng)細(xì)胞都取100μL（由于濃度的不同，所以對(duì)應(yīng)的效靶比為50∶1），取好后混勻加入U(xiǎn)型培養(yǎng)板中，培養(yǎng)板使用96孔；靶細(xì)胞自然釋放，先加靶細(xì)胞100μL攪拌，之后再加入培養(yǎng)液100μL混合均勻，靶細(xì)胞最大釋放孔先加靶細(xì)

2 結(jié)果與分析

2.1 樣品對(duì)正常小鼠體重的影響：

表1 免疫一組小鼠體重（±s，g）

表1 免疫一組小鼠體重（±s，g）

組別 動(dòng)物數(shù)/只 初始體重 中期體重 末期體重 增重對(duì)照組低劑量組中劑量組高劑量組10 10 10 10 12.68±1.66 13.19±2.06 13.51±1.55 12.44±2.12 19.85±1.25 19.82±1.20 19.81±1.12 19.92±1.24 28.19±1.93 28.00±1.18 28.36±1.99 27.61±2.18 32.53±1.89 33.01±2.27 33.32±2.36 32.36±3.01

表2 免疫二組小鼠體重（±s，g）

表2 免疫二組小鼠體重（±s，g）

組別 動(dòng)物數(shù)/只 初始體重 中期體重 末期體重 增重對(duì)照組低劑量組中劑量組高劑量組10 10 10 10 19.64±1.21 19.68±1.18 19.62±1.03 19.71±1.16 27.60±1.98 27.82±1.79 27.57±1.91 28.30±1.89 32.30±2.87 33.05±2.37 32.43±3.56 33.17±2.78 12.66±2.13 13.37±1.74 12.81±2.68 13.46±1.99

由表1，表2可見(jiàn)，各劑量組在體重方面，從試驗(yàn)初期、中期、末期來(lái)看與對(duì)照組比較，差異性均無(wú)顯著性 （p＞0.05）。

2.2 樣品對(duì)小鼠免疫器官臟器/體重比值的影響

表3 樣品對(duì)小鼠免疫器官臟器/體重比值影響（±s，g）

表3 樣品對(duì)小鼠免疫器官臟器/體重比值影響（±s，g）

組別 動(dòng)物數(shù)/只脾臟/體重/% p值 胸腺/體重/% p值對(duì)照組低劑量組中劑量組高劑量組10 10 10 10 0.465±0.079 0.491±0.136 0.528±0.101 0.551±0.121 0.335 0.319±0.064 0.340±0.095 0.361±0.076 0.371±0.074 0.467

由表3可見(jiàn)，樣品各劑量對(duì)小鼠脾臟/體重比值和胸腺/體重比值無(wú)顯著影響（p＞0.05）。

2.3 樣品對(duì)小鼠細(xì)胞免疫功能的影響

表4 樣品對(duì)小鼠ConA誘導(dǎo)的淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化能力的影響（±s）

表4 樣品對(duì)小鼠ConA誘導(dǎo)的淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化能力的影響（±s）

組別 動(dòng)物數(shù)/只加ConA的OD值不加ConA的OD值淋巴細(xì)胞增殖能力（OD差值） p值對(duì)照組低劑量組中劑量組高劑量組10 10 10 10 0.223±0.020 0.231±0.014 0.218±0.025 0.220±0.014 0.189±0.025 0.190±0.016 0.169±0.037 0.155±0.027 0.035±0.022 0.041±0.023 0.050±0.023 0.065±0.024-0.869 0.333 0.015

由表4可見(jiàn)，樣品高劑量組小鼠淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化能力明顯高于對(duì)照組（p＜0.05）。

2.4 樣品對(duì)體液免疫的影響

2.4.1 樣品對(duì)小鼠抗體生成細(xì)胞數(shù)的影響

表5 樣品對(duì)小鼠抗體生成細(xì)胞數(shù)的影響（±s）

表5 樣品對(duì)小鼠抗體生成細(xì)胞數(shù)的影響（±s）

組別 動(dòng)物數(shù)/只 溶血空斑數(shù)（個(gè)/106個(gè)脾細(xì)胞） p值對(duì)照組低劑量組中劑量組高劑量組10 10 10 10 120±59 153±72 170±64 206±54-0.511 0.198 0.011

由表5可見(jiàn)，高劑量組小鼠抗體生成細(xì)胞數(shù)與對(duì)照組比較顯著提高（p＜0.05）

2.4.2樣品對(duì)小鼠半數(shù)溶血數(shù)值（HC50）的影響

樣品對(duì)小鼠半數(shù)溶血數(shù)值（HC50）的影響（±s） 見(jiàn)表 6。

表6樣品對(duì)小鼠半數(shù)溶血數(shù)值（HC50）的影響（±s）

表6樣品對(duì)小鼠半數(shù)溶血數(shù)值（HC50）的影響（±s）

組別 動(dòng)物數(shù)/只 半數(shù)溶血值 p值對(duì)照組低劑量組中劑量組高劑量組10 10 10 10 144.33±25.77 161.08±20.80 171.18±33.59 181.75±34.16-0.440 0.115 0.018

由表6可見(jiàn)，高劑量組小鼠半數(shù)溶血數(shù)值（HC50）與對(duì)照組比較顯著提高（p＜0.05）。

2.5 樣品對(duì)小鼠NK細(xì)胞活性的影響

表7 樣品對(duì)小鼠NK細(xì)胞活性的影響（±s）

表7 樣品對(duì)小鼠NK細(xì)胞活性的影響（±s）

組別 動(dòng)物數(shù)/只NK細(xì)胞活性/%NK細(xì)胞活性平方根反正弦轉(zhuǎn)化值 p值對(duì)照組低劑量組中劑量組高劑量組10 10 10 10 22.42±11.43 30.29±12.38 37.35±10.40 39.19±9.59 27.40±8.64 32.87±8.30 37.54±6.14 38.66±5.62-0.869 0.333 0.015

由表7可見(jiàn)，中、高劑量組小鼠NK細(xì)胞活性與對(duì)照組比較顯著提高（p＜0.05或p＜0.01）。

3 結(jié)論

在試驗(yàn)條件下，經(jīng)口灌胃給予小鼠0.25，0.50，1.50 g/（kg·bw） 劑量的汪氏牌蜂王漿軟膠囊30 d，與對(duì)照組比較0.50，1.50 g/（kg·bw） 劑量能顯著提高小鼠NK細(xì)胞活性，1.50 g/（kg·bw） 劑量能顯著提高小鼠半血溶血值、抗體生成細(xì)胞數(shù)、淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化能力（p＜0.05），各劑量對(duì)小鼠體重增長(zhǎng)、胸腺/體重比值、脾臟/體重比值均無(wú)明顯影響（p＞0.05）。表明蜂王漿具有增強(qiáng)小鼠免疫力的功能。

綜上所述，蜂王漿在對(duì)小鼠免疫功能的影響有一定的調(diào)節(jié)作用，正常小鼠在灌食一定劑量的蜂王漿后，其體重并未發(fā)生明顯變化，臟器/體重比值也未觀察到明顯變化。中、高劑量的蜂王漿能明顯提高小鼠NK細(xì)胞活性，高劑量蜂王漿能明顯提高小鼠半血溶血值、抗體生成細(xì)胞數(shù)、淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化能力。蜂王漿所含營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)較多，營(yíng)養(yǎng)成分特別復(fù)雜，就目前已有的研究來(lái)說(shuō)，蛋白質(zhì)是蜂王漿干物質(zhì)的主要成分，蜂王漿中的蛋白質(zhì)有12種以上，此外還有許多小肽類(lèi)物質(zhì)。蜂王漿中含有很多酶類(lèi)蛋白質(zhì)，如膽堿酯酶、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽酶和堿性磷酸酶等[9]。另外，蜂王漿中還含有許多脂類(lèi)有機(jī)酸，蜂王漿的特征性成分是短鏈羥基脂肪酸，已檢測(cè)到的有：10-羥基2-癸烯酸（10-HDA）、癸酸、2-十二碳烯二酸、10-羥基癸酸、3-羥基癸酸、9-十四烯酸、9-十六烯酸、琥珀酸、十三烷酸、棕櫚酸、亞油酸、花生酸、月桂酸、亞麻酸等多種游離脂肪酸[10-11]，其中10-HDA是蜂王漿中十分重要的物質(zhì)，是特有的不飽和脂肪酸[12]，因其在不同溫度、不同保存時(shí)間的蜂王漿中含量穩(wěn)定[13-15]，因此成為評(píng)價(jià)蜂王漿品質(zhì)的重要指標(biāo)。由于蜂王漿中營(yíng)養(yǎng)成分物質(zhì)太多，具體是哪些組分對(duì)免疫功能進(jìn)行調(diào)節(jié)仍需要進(jìn)一步研究。