武利濤，郭 楠，李寶萍，王金霞，張 梅，尚 娥，楊郝亮，楊曦明

(北京中醫(yī)藥大學(xué)東直門醫(yī)院 檢驗科，北京100700)

人乳頭瘤病毒(HPV)是一種常見的性傳播DNA病毒，國際癌癥研究機(jī)構(gòu)(IIARC))通過對9個國家的11次病例對照研究資料進(jìn)行分析，將HPV6,11,40,42,43,44,54,61,70,72,81,cp6108等12種劃分為低危型，主要引起泌尿生殖道、肛周皮膚外生性濕疣類病變、扁平濕疣類病變和低度子宮頸上皮內(nèi)瘤樣變(CIN)，多表現(xiàn)為一過性，可以自然逆轉(zhuǎn)；而高危型主要為HPV16，18，31，33，35，39，45，51，52，56，58，59，68，73，82等15種亞型，主要引起CINⅡ至CINⅢ級病變和宮頸癌的發(fā)生,持續(xù)高危型HPV感染的CINⅠ級也容易進(jìn)行性發(fā)展為CINⅡ-Ⅲ[1]。目前HPV檢測已經(jīng)廣泛用于宮頸癌的早期篩查，通過篩查，可以及時發(fā)現(xiàn)HPV感染，確認(rèn)后可以及時進(jìn)行治療，從而預(yù)防宮頸癌。由于HPV亞型較多，并且有著明顯的地區(qū)分布及年齡階段的差異[3,4]，所以本研究對2017年來我院就診的患者高危型HPV檢測數(shù)據(jù)進(jìn)行回顧性分析，以了解北京高危HPV亞型在女性患者中的感染狀況，為HPV防治提供參考。

1 對象與方法

1.1 研究對象

2017年1月1日-12月31日來我院檢測高危HPV女性患者共2187例，年齡17-84歲，其中育齡女性(15-49歲)1584例，絕經(jīng)期女性(≥50歲)599例。

1.2 納入標(biāo)準(zhǔn)與排除標(biāo)準(zhǔn)

納入標(biāo)準(zhǔn)：有性生活，非月經(jīng)期，采樣前24 h內(nèi)無性生活、無陰道灌注、檢查， 3天內(nèi)無陰道內(nèi)用藥者。排除標(biāo)準(zhǔn)：無性生活、孕婦、子宮切除者。

1.3 方法

1.3.1標(biāo)本采集 用無菌生理鹽水棉球洗去宮頸外分泌物，再用無菌棉拭子插入宮頸內(nèi)，停5秒鐘后旋動棉拭子采取宮頸分泌物，將棉拭子置入無菌玻璃管，密閉送檢。

1.3.2實驗及結(jié)果判定 采用熒光實時定量聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)法，使用上海之江科技有限公司高危型人乳頭瘤病毒(HPV)分型核酸測定試劑盒(熒光PCR法)對15種HPV亞型(16型、18型、31型、33型、35型、39型、45型、51型、52型、56型、58型、59型、68型、66型、82型)進(jìn)行檢測。實驗按試劑盒提供的說明書進(jìn)行操作。

1.3.3統(tǒng)計學(xué)分析 采用SPSS19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析，采用χ2檢驗方法，P<0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 高危型HPV的總檢出率及亞型分布

在2183例樣本中，高危型HPV檢出407例，總檢出率18.61%，15個高危亞型均有檢出，由于存在多型復(fù)合感染，407例陽性患者中共檢出HPV亞型537例次，檢出最多的5種亞型依次為HPV52、51、16、58、39。407例HPV陽性患者中，76.66%(312/407)的陽性樣本為一型感染，23.34%(95/407)的陽性樣本為多型感染。95例多型感染中，二重感染72例，三重感染14例，四重感染6例，五重感染3例。高危亞型檢出情況見表1、分布情況圖1。

表1 HPV各亞型的檢出情況

圖1 HPV各亞型比例分布圖

2.2 高危型HPV年齡分布情況

按照ACOG推薦的宮頸癌篩查指南，≤25歲和≥66歲單獨(dú)兩組，26-65期間每10年一個階段，本研究將研究對象按年齡分為6組，結(jié)果顯示隨著年齡增大，感染率曲線先下降后回升，≤25歲感染者陽性率最高，25歲以后逐漸下降，36-65歲陽性率處于較低水平，66歲以后陽性率有回升趨勢。見表2、圖2。

表2 不同年齡階段高危型HPV感染情況

2.3 育齡期女性和絕經(jīng)期女性高危HPV感染及分布情況

根據(jù)女性生理發(fā)展特點，本研究將所有HPV陽性女性分為育齡期女性(15-49歲)和絕經(jīng)期女性(≥50歲)，結(jié)果顯示育齡期女性高危HPV總陽性率低于絕經(jīng)期女性，育齡期女性高危HPV亞型前5位為：HPV52、16、51、58、39亞型；絕經(jīng)期女性高危HPV亞型排在前5位的是：52、51、58、66、56亞型。見表3、表4。

表3 育齡期和絕經(jīng)期女性高危HPV感染情況

表4 育齡期女性和絕經(jīng)期女性高危HPV亞型的分布情況

3 討論

宮頸癌是全球女性中位于第四位的惡性腫瘤，全世界每年新發(fā)病例超過50萬，全球平均每兩分鐘就有一個人死于宮頸癌。在我國，宮頸癌是我國第二大女性惡性腫瘤，每年的新發(fā)病例高達(dá)13萬，嚴(yán)重威脅我國女性的健康[5-7]。HPV感染是引起宮頸癌發(fā)生的最主要危險因素和必要條件，研究表明，機(jī)體感染HPV病毒后，免疫系統(tǒng)會發(fā)生改變，產(chǎn)生大量的炎癥因子和細(xì)胞因子，造成機(jī)體出現(xiàn)炎癥反應(yīng)和組織損傷，可以引起人體從黏膜增生到惡性腫瘤的多種病變[8]。高危型HPV感染作為引發(fā)宮頸癌的主要因素，一直是研究人員關(guān)注的熱點，2012年一項納入中國37個城市超過12萬人的人群篩查結(jié)果顯示總的HPV感染率為21.07%[9]。另有研究顯示廣州地區(qū)的HPV感染率為28.43%，高危型HPV感染率為27.85%、深圳地區(qū)HPV感染率為15.9%[10,11]，云南省的HPV感染調(diào)查研究顯示，西南地區(qū)HPV總感染率為19.9%、西北地區(qū)為18%、東南地區(qū)為13.3%、最低為中部地區(qū)12.9%[12]，山西地區(qū)HPV感染率達(dá)25.86%[13]，許曉躍等[14]報道北京豐臺區(qū)HPV感染率為20.80%，本研究中北京地區(qū)的高危HPV總檢出率為18.61%，低于上述報道中全國的總感染率及廣州、云南、山西等地。

據(jù)IARC統(tǒng)計，HPV16、18型是世界范圍內(nèi)宮頸癌最常見的HPV感染亞型，兩種型別的感染率分別為57.4%和16.6%，HPV45、31、33、52、58型隨后[15,16]。但有研究對2000年以來pubmed上發(fā)表的文獻(xiàn)進(jìn)行meta分析，發(fā)現(xiàn)中國最常見5種高危HPV型別分別是16、18、58、52和33[17]，尤其是HPV52、58感染在我國南方地區(qū)比較常見[18,19]，但45型不常見。本研究發(fā)現(xiàn)北京地區(qū)檢出最多的5種高危HPV型別為52、51、16、58、39，而這是由于受地域、氣候、文化、習(xí)慣等各方面的影響，HPV的感染率和型別分布在不同人群和地區(qū)存在明顯差異。

除了地域?qū)Ω呶PV感染的影響外，年齡也是一個重要的影響因素。本研究中隨著年齡增長，高危HPV感染率呈U形，25歲以下人群感染率最高，跟這個年齡段的女性性生活頻繁，且自我保護(hù)意識不是很強(qiáng)，宮頸抵抗力較弱有關(guān)[20]，25歲以后到45歲階段感染率逐漸下降，45-65歲的感染率平穩(wěn)地維持在較低水平，這部分人群性伴侶比較固定，性生活相對較少，且身體機(jī)能比較穩(wěn)定，所以感染率水平較低，但需要警惕的是，65歲以上人群的高危HPV感染率出現(xiàn)升高趨勢，這可能由于老年人免疫力低下，雌激素水平較低導(dǎo)致的，所以要重視年齡低于25歲或高于65歲這兩類人群的宮頸癌早篩工作。

本研究通過對育齡期和絕經(jīng)期的女性的高危HPV感染率進(jìn)行統(tǒng)計發(fā)現(xiàn)，北京地區(qū)的高危HPV感染率低于全國的總感染率，且型別分布與全國的型別分布略有不同；高危HPV感染率隨年齡增長呈U形分布，需重視≤25歲及≥65歲兩類人群的篩查工作；育齡期女性的高危HPV感染率低于絕經(jīng)期女性，但宮頸癌發(fā)病風(fēng)險高于絕經(jīng)期女性。絕經(jīng)期女性的感染率比育齡期要高，除了上面說到的免疫力和激素水平的原因，還有一種觀點認(rèn)為絕經(jīng)期婦女出現(xiàn)感染高峰是由于HPV的持續(xù)性感染或HPV感染的復(fù)發(fā)所引起，可能并非新發(fā)HPV感染[21]，且二者亞型分布也有所不同，育齡期HPV16、39的比例高于絕經(jīng)期，而絕經(jīng)期66、56的比例高于育齡期，HPV52、51、58的比例在兩組都較高。宮頸癌的致病因素中，最重要的是HPV16/18，所以從本研究結(jié)果看，育齡期女性雖然高危型HPV感染率低于絕經(jīng)期女性，但是宮頸癌發(fā)病風(fēng)險高于絕經(jīng)期女性。

綜上所述，HPV感染率及分型調(diào)查可為不同地區(qū)探索HPV相關(guān)疾病的防治策略提供依據(jù)，特別是HPV疫苗于近年在中國上市，本研究也可為女性疫苗接種選擇提供參考依據(jù)，對維護(hù)女性健康有重大意義。