沈萍萍　蔣素敏　吳益群　林琪　沙洪存　方文佳

[摘要] 目的 探討腫瘤標(biāo)志物癌胚抗原（CEA）、糖類抗原19-9（CA199）及分泌性白細(xì)胞蛋白酶抑制因子（SLPI）在胃癌患者血清中的表達(dá)及應(yīng)用價(jià)值。 方法 選取2017年4～8月我院治療的胃癌患者43例為胃癌組，胃鏡提示非萎縮性胃炎的25例體檢者為對(duì)照組，采用電化學(xué)發(fā)光法和酶聯(lián)免疫法檢測(cè)胃癌組與對(duì)照組血清CEA、CA199及SLPI，分析其與胃癌腫瘤大小、組織分化類型、淋巴轉(zhuǎn)移、浸潤(rùn)深度、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移及臨床分期的關(guān)系及3項(xiàng)指標(biāo)單一、聯(lián)合檢測(cè)的陽(yáng)性率。 結(jié)果 CEA、CA199及SLPI在胃癌組中的表達(dá)明顯高于對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;血清CEA、CA199及SLPI的表達(dá)與胃癌淋巴轉(zhuǎn)移、臨床分期、浸潤(rùn)深度、腫瘤大小有關(guān)（P<0.05）;3項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)陽(yáng)性率達(dá)88.37%，明顯高于單項(xiàng)指標(biāo)檢測(cè)（P<0.05）。 結(jié)論 胃癌患者血清CEA、CA199及SLPI水平與胃癌的發(fā)生、發(fā)展關(guān)系密切，聯(lián)合檢測(cè)血清水平變化對(duì)胃癌診斷及病情變化的判斷具有重要意義。

[關(guān)鍵詞] 胃癌;癌胚抗原;糖類抗原19-9;分泌性白細(xì)胞蛋白酶抑制因子

[中圖分類號(hào)] R735.2? ? ? ? ? [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A? ? ? ? ? [文章編號(hào)] 1673-9701（2019）22-0013-04

[Abstract] Objective To investigate the expression and application value of tumor marker carcinoembryonic antigen（CEA）， carbohydrate antigen 19-9（CA199） and secretory leukocyte protease inhibitory factor（SLPI） in serum of patients with gastric cancer. Methods 43 patients with gastric cancer who treated in our hospital from April to August 2017 were selected as gastric cancer group. 25 patients with non-atrophic gastritis showed by gastroscope were selected as control group. The serum levels of CEA， CA199 and SLPI in gastric cancer group and control group were detected by electrochemiluminescence and enzyme-linked immunosorbent assay， and their relationship between tumor size， tissue differentiation type， lymphatic metastasis， depth of invasion， distant metastasis and clinical stage， and the positive rate of single index and combined detection were analyzed. Results The expression of CEA， CA199 and SLPI in gastric cancer group was significantly higher than that in control group， and the difference was significant （P<0.05）. The expression of serum CEA， CA199 and SLPI was related to lymph node metastasis， clinical stage， infiltration depth and tumor size of gastric cancer（P<0.05）. The positive rate of the combined detection of the three indicators was 88.37%， which was significantly higher than that of the single index（P<0.05）. Conclusion The levels of serum CEA， CA199 and SLPI in patients with gastric cancer are closely related to the occurrence and development of gastric cancer. Combined detection of serum levels is important for the diagnosis of gastric cancer and the change of disease condition.

[Key words] Gastric cancer;Carcinoembryonic antigen;Carbohydrate antigen 19-9;Secretory leukocyte protease inhibitor

全球范圍內(nèi)三大常見(jiàn)的惡性腫瘤之一胃癌起源于胃黏膜。胃癌發(fā)病有特別明顯的地域性差異，在我國(guó)的西北與東部沿海地區(qū)胃癌發(fā)病率比南方地區(qū)明顯為高。好發(fā)年齡在50歲以上，男女發(fā)病率之比為2∶1。胃癌逐漸呈現(xiàn)年輕化的傾向，這是由于飲食結(jié)構(gòu)的改變、工作壓力增大以及幽門螺桿菌的感染等原因，胃癌可發(fā)生于胃的任何部位，其中半數(shù)以上發(fā)生于胃竇部，胃大彎、胃小彎及前后壁均可受累。絕大多數(shù)胃癌屬于腺癌，早期無(wú)明顯癥狀，或出現(xiàn)上腹不適、噯氣等非特異性癥狀，常與胃炎、胃潰瘍等胃慢性疾病癥狀相似，易被忽略，因此，目前我國(guó)胃癌的早期診斷率仍較低。胃癌的預(yù)后與胃癌的病理分期、部位、組織類型、生物學(xué)行為以及治療措施有關(guān)。相關(guān)統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示，國(guó)內(nèi)的胃癌患者經(jīng)手術(shù)治療后，5年生存率僅為30%～50%。如果胃癌能夠在早期就被診斷，5年生存率可達(dá)90%以上[1-2]。因此，對(duì)于降低胃癌的病死率及提高胃癌治療預(yù)后起十分重要作用的是早期胃癌的診斷。胃癌有效治療的基礎(chǔ)是胃癌的早發(fā)現(xiàn)和早診斷，但是目前對(duì)于胃癌的早期發(fā)現(xiàn)和診斷多采用胃鏡病理活檢等影像學(xué)檢測(cè)，專業(yè)性較高且費(fèi)時(shí)費(fèi)力，不易大范圍的普及應(yīng)用[3]。有研究發(fā)現(xiàn)，腫瘤標(biāo)志物的聯(lián)合檢測(cè)有助于腫瘤的診斷[4]。

目前廣泛應(yīng)用CEA來(lái)篩查胃癌，其臨床價(jià)值已得到肯定;但由于其特異性不強(qiáng)，早期胃癌陽(yáng)性率不高，因而難以做到早期診斷。因此，需要尋找一種或多種腫瘤標(biāo)志物與CEA聯(lián)合檢測(cè)，以提高胃癌的早期診斷率。分泌性白細(xì)胞蛋白酶抑制因子（secretory leukocyte peptidase inhibitor，SLPI）屬于Kazal型絲氨酸蛋白酶抑制劑家族，具有調(diào)控細(xì)胞分化增殖的能力[5]。之前已有相關(guān)研究表明在胃癌組織SLPImRNA及蛋白明顯升高[6-9]。國(guó)內(nèi)尚未見(jiàn)該血清指標(biāo)在胃癌中的研究報(bào)道。本研究聯(lián)合檢測(cè)分泌性白細(xì)胞蛋白酶抑制因子（SLPI）及CEA、CA199對(duì)胃癌進(jìn)行診斷，將其與健康對(duì)照組及早期胃癌組結(jié)果進(jìn)行比較，并比較這些指標(biāo)在胃癌不同臨床病理特征的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1一般資料

選取2017年4～8月于我院治療的胃癌患者43例為胃癌組。其中男32例，女11例;年齡35～88歲，平均（67.33±13.29）歲;所有患者均經(jīng)胃鏡活組織病理檢查確診為胃癌，普外科手術(shù)患者術(shù)前均未給予放化療，腫瘤科化療患者未行手術(shù)治療，根據(jù)影像學(xué)檢查及術(shù)后病理切片檢查，Ⅰ～Ⅱ期24例，Ⅲ～Ⅳ期19例。以體檢正常者25例為對(duì)照組，查胃鏡均為未萎縮性胃炎，其中男16例，女9例;年齡55～74歲，平均（62.33±6.54）歲。

1.2 方法

采用電化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)患者血清中的腫瘤標(biāo)志物。測(cè)定儀器采用CENTAUR XP全自動(dòng)免疫分析儀;試劑均為配套的CA199、CEA 試劑。對(duì)照組患者于入院體檢時(shí)，抽取空腹外周靜脈血5 mL，胃癌組患者于手術(shù)前抽取外周靜脈血5 mL，分離出血清，于-80℃冰箱保存，用于檢測(cè)。SLPI測(cè)定采用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法，所用試劑盒購(gòu)自于上海江萊生物有限公司，SLPI標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)準(zhǔn)曲線的制定按照說(shuō)明書進(jìn)行，酶標(biāo)儀450 nm波長(zhǎng)測(cè)定光密度值（OD值）。

1.3 判定標(biāo)準(zhǔn)

CEA>10 ng/mL為陽(yáng)性，CA199>37 U/mL為陽(yáng)性。SLPI>50 ng/mL為陽(yáng)性。聯(lián)合檢測(cè)判定標(biāo)準(zhǔn)：SLPI、CEA 或CA199 有一項(xiàng)陽(yáng)性即為陽(yáng)性，三者均陰性為陰性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用 SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，明確檢驗(yàn)數(shù)據(jù)分布情況后，計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，兩樣本比較應(yīng)用樣本t檢驗(yàn)或近似t檢驗(yàn)。計(jì)數(shù)資料陽(yáng)性率比較應(yīng)用χ2檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組血清 SLPI、CEA及CA199水平比較

胃癌組血清 SLPI、CEA及CA199水平明顯高于對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見(jiàn)表1。

2.2 兩組血清SLPI、CEA及CA199水平比較

早期胃癌組是將胃癌組織局限于胃黏膜層及黏膜下層的胃癌，不管有無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，共18例。檢測(cè)得出早期胃癌組中血清SLPI水平明顯高于對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。而血清CEA、CA199水平兩者無(wú)區(qū)別。見(jiàn)表2。

2.3胃癌患者血清SLPI、CEA及CA199表達(dá)水平與臨床病理特征的關(guān)系

臨床分期Ⅲ～Ⅳ期的胃癌患者血清SLPI、CEA及CA199顯著高于Ⅰ～Ⅱ期患者，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。有漿膜浸潤(rùn)（T3、T4）及有淋巴轉(zhuǎn)移的胃癌患者各血清指標(biāo)表達(dá)量均顯著高于無(wú)漿膜浸潤(rùn)（T1、T2）及無(wú)淋巴轉(zhuǎn)移胃癌患者，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。腫瘤直徑≥5 cm的胃癌患者血清SLPI、CEA及CA199顯著高于腫瘤<5 cm（P<0.05）。分化類型上低分化胃癌患者血清SLPI及CEA表達(dá)水平較高中分化高（P<0.05）。有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移胃癌患者血清CEA及CA199表達(dá)水平顯著高于無(wú)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移胃癌患者（P<0.05）。三者血清水平表達(dá)與腫瘤部位、性別、年齡均無(wú)相關(guān)。見(jiàn)表3。

2.4 血清SLPI、CEA及CA199的聯(lián)合診斷價(jià)值

CEA、CA199及SLPI單項(xiàng)指標(biāo)在胃癌患者血清中的陽(yáng)性檢出率較低（27.91%～72.09%），3 項(xiàng)聯(lián)合檢測(cè)的陽(yáng)性檢出率達(dá)88.37%，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見(jiàn)表4。

3 討論

腫瘤標(biāo)志物是腫瘤生長(zhǎng)過(guò)程中，由腫瘤細(xì)胞自身產(chǎn)生或有機(jī)體自身免疫反應(yīng)產(chǎn)生，一般不存在于正常成人組織，是反映腫瘤生長(zhǎng)與存在的一類物質(zhì)，包括蛋白質(zhì)、酶、多胺、激素等，通常在患者血液或是體液中能檢測(cè)出[10]。

CEA是癌細(xì)胞膜上的一種含糖蛋白質(zhì)，常見(jiàn)于消化道和胚胎的胰腺、肝、腸組織中，在惡性腫瘤中表達(dá)多于良性腫瘤和正常組織，是目前研究最廣泛的消化道腫瘤標(biāo)志物之一。有報(bào)道稱CEA升高對(duì)于Ⅲ期胃癌患者復(fù)發(fā)有著重要的意義[11]。此外還有報(bào)道證實(shí)，CEA對(duì)于胃癌手術(shù)中腫瘤切除是否徹底有重要的指示作用，且與胃部惡性腫瘤的肝轉(zhuǎn)移有密切的相關(guān)性[12]。本研究中胃癌患者血清CEA陽(yáng)性率達(dá)27.91%，與既往研究[13]的陽(yáng)性檢出率23%～45%相符。

CA199是一種非特異性的腫瘤糖類抗原，是目前報(bào)道的對(duì)胰腺癌靈敏度和特異度最高的腫瘤標(biāo)志物[14]，對(duì)于胃癌也有一定的指示作用。有報(bào)道稱血清CA199水平與胃癌的分期、有無(wú)漿膜浸潤(rùn)、有無(wú)淋巴結(jié)或腹膜轉(zhuǎn)移密切相關(guān)[15]。本研究CA199在胃癌患者血清中陽(yáng)性率達(dá)39.53%，與此報(bào)道一致，可見(jiàn)血清CA199可作為胃癌診斷和療效觀察的一個(gè)參考指標(biāo)。本研究發(fā)現(xiàn)，胃癌晚期患者血清CEA和CA199水平較早期患者顯著性增高，此結(jié)果再次證明血清腫瘤標(biāo)志物CEA、CA199水平與胃癌臨床病理分期密切相關(guān)，對(duì)手術(shù)方式的選擇和提示預(yù)后有重要應(yīng)用價(jià)值。

SLPI是一種非糖基化蛋白，是黏膜分泌的上皮特異性絲氨酸蛋白酶抑制劑，它存在于人體的各種黏膜分泌液中，如唾液、胃腸道分泌液、呼吸道分泌液及宮頸黏液等。近年來(lái)較多國(guó)外文獻(xiàn)報(bào)道，SLPI與癌癥密切相關(guān)，但它在不同腫瘤中的表達(dá)水平不一，具體作用機(jī)制日前尚不完全清楚。卵巢癌及結(jié)腸癌中SLPI表達(dá)水平明顯較卵巢良性上皮及正常對(duì)照組高，且與腫瘤進(jìn)展相關(guān)[16，17]，而前列腺癌中，其表達(dá)會(huì)下降[18]。有研究[6，9]，SLPI mRNA及蛋白在胃癌組織中都過(guò)表達(dá)，其表達(dá)量顯著高于癌旁組織，說(shuō)明SLPI在胃癌組織中可能是促癌因子，癌組織可能通過(guò)SLPI表達(dá)量的變化來(lái)增加其侵襲性。其可能的作用機(jī)制：（1）通過(guò)保護(hù)顆粒蛋白前體免受降解，促進(jìn)Cyclin D等的表達(dá)及抑制抗細(xì)胞增殖因子IGFBP-3等的表達(dá)，從而促進(jìn)細(xì)胞增殖[5];（2）抑制分泌抗血管因子的彈性蛋白酶，或激活NF-κB[5]，可能與促進(jìn)血管發(fā)生有關(guān)。本研究中胃癌組及早期胃癌組的血清SLPI水平明顯高于正常對(duì)照組，臨床分期Ⅲ～Ⅳ期的胃癌患者，有漿膜浸潤(rùn)（T3、T4）及有淋巴轉(zhuǎn)移的胃癌患者各血清指標(biāo)表達(dá)量均顯著高于Ⅰ～Ⅱ期，無(wú)漿膜浸潤(rùn)（T1、T2）及無(wú)淋巴轉(zhuǎn)移胃癌患者，提示血清SLPI在早期胃癌患者即升高，對(duì)早期診斷胃癌及是否存在淋巴轉(zhuǎn)移及臨床分期等胃癌預(yù)后評(píng)估也有重要參考價(jià)值。

本研究胃癌組血清CEA、CA199、SLPI表達(dá)水平高于對(duì)照組，提示檢測(cè)上述指標(biāo)在外周血中的水平對(duì)胃癌診斷意義重大。此外，本研究中CEA、CA199、SLPI單一指標(biāo)在胃癌患者血清中的陽(yáng)性檢出率低，3項(xiàng)聯(lián)合檢測(cè)的陽(yáng)性檢出率達(dá)88.37%，明顯高于單一檢測(cè)，說(shuō)明聯(lián)合檢測(cè)比單一指標(biāo)檢測(cè)更具診斷價(jià)值，尤其對(duì)胃癌的診斷陽(yáng)性率遠(yuǎn)高于單一指標(biāo)的檢測(cè)。這也證明了今后胃癌的診斷方向?qū)⒁远喾N腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測(cè)為發(fā)展方向。

綜上所述，SLPI可能是一個(gè)有用的胃癌腫瘤標(biāo)志物，聯(lián)合檢測(cè)血清SLPI、CEA及CA199，可有效地彌補(bǔ)CEA及CA199早期診斷率低的缺點(diǎn)，提高胃癌的早期診斷率。血清CEA、CA199、SLPI表達(dá)量與胃癌有無(wú)淋巴轉(zhuǎn)移及臨床分期，浸潤(rùn)深度，分化類型，腫瘤大小，遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移相關(guān)，提示監(jiān)測(cè)血清CEA、CA199、SLPI水平可用于胃癌早期診斷、判定胃癌的惡性程度及轉(zhuǎn)移，將3 種腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測(cè)比單一檢測(cè)更具診斷價(jià)值。

[參考文獻(xiàn)]

[1] Anderson LA，Tavilla A，Brenner H，et al.Survival for oesophageal，stomach and small intestine cancers in Europe 1999-2007：results from eurocare-5[J].Eur J Cancer，2015， 51（15）：2144-2157.

[2] Park HA，Nam SY，Lee SK，et al.The Korean guideline for gastric cancer screening[J].J Korean Med Assoc，2015， 26（3）：373-384.

[3] 韓文，鄭軍，馮義朝.早期胃癌內(nèi)鏡下診斷的研究現(xiàn)狀[J].山西醫(yī)藥雜志，2016，45（12）：1416-1419.

[4] 李娜，崔文博.多腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測(cè)診斷消化系統(tǒng)腫瘤探討[J].中國(guó)藥物經(jīng)濟(jì)學(xué)，2012，7（1）：164-165.

[5] Bouchard D，Morisset D，Bourbonnais Y，et al. Proteins with whey-acidic-protein motifs and cancer[J]. Lancet Oncol，2006，7（2）：167-174.

[6] 沈萍萍，林若陽(yáng)，黃智銘，等. 胃癌及癌旁組織中分泌性白細(xì)胞蛋白酶抑制因子SLPI的表達(dá)[J]. 中華內(nèi)科雜志，2010，49（6）：515-517.

[7] Cheng WL，Wang CS，Huang YH，et al. Overexpression of a secretory leukocyte protease inhibitor in human gastric cancer[J]. Int J Cancer， 2008，123（8）：1787-1796.

[8] Choi BD，Jeong SJ，Wang G，et al. Secretory leukocyte protease inhibitor is associated with MMP-2 and MMP-9 to promote migration and invasion in SNU638 gastric cancer cells[J]. Int J Mol Med，2011，28（4）：527-534.

[9] Du XY，Liu X，Wang ZJ，et al. SLPI promotes the gastric cancer growth and metastasis by regulating the expression of P53，Bcl-2 and Caspase-8[J]. Eur Rev Med Pharmacol Sci，2017，21（7）：1495-1501.

[10] 杜翠霞. 血清腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)對(duì)胃癌的診斷價(jià)值[J]. 腫瘤基礎(chǔ)與臨床，2012，25（6）：540.

[11] 王國(guó)棟，武愛(ài)文，李子禹，等.聯(lián)合檢測(cè)術(shù)前與術(shù)后CEACA199CA724對(duì)不同分期胃癌根治術(shù)后復(fù)發(fā)的預(yù)測(cè)價(jià)值[J].中國(guó)腫瘤臨床，2017，44（7）：324-330.

[12] Wada N，Kurokawa Y，Miyazaki Y，et al.The characteristics of the serum carcinoembryonic antigen and carbohydrate antigen 199 levels in gastric cancer cases[J].Surg Today，2017，47（2）：227-232.

[13] Al-Zoughbi W，Al-Zhoughbi W，Huang J，et al. Tumor macroenvironment and metabolism[J]. Semin Oncol，2014， 41（2）：281-295.

[14] Zhang Y，Jiang L，Song L. Meta-analysis of diagnostic value of serum carbohydrate antigen 199 in pancreatic cancer[J].Minerva Med，2016，107（1）：62-69.

[15] Ucar E，Semerci E，Ustun H，et al.Prognostic value of preoperative CEA，CA199，CA724，and AFP levels in gastric cancer[J].Adv Ther，2008，25（10）：1075-1084.

[16] Shigemasa K，Tanimoto H，Underwood LJ，et al. Expression of the protease inhibitor antileukoprotease and the serine protease stratum corneum chymotryptic enzyme（SCCE）is coordinated in ovarian tumors[J]. Int J Gynecol Cancer，2001，11（6）：454-461.

[17] 張立達(dá)，白陽(yáng)秋，楊玉秀. 分泌性白細(xì)胞蛋白酶抑制劑在結(jié)腸癌中的作用[J]. 中華實(shí)驗(yàn)外科雜志，2015，32（7）：1695-1697.

[18] Xuan Q，Yang X，Mo L，et al. Expression of the serine protease kallikrein 7 and its inhibitor antileukoprotease is decreased in prostate cancer[J]. Arch Pathol Lab Med，2008，132（11）：1796-1801.

（收稿時(shí)間：2019-02-25）