胡亞軍 胡 毅 石 勇 戴振炎 鐘 蕾

(1. 湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)湖南省特色水產(chǎn)資源利用工程技術(shù)研究中心, 長(zhǎng)沙 410128;2. 水產(chǎn)高效健康生產(chǎn)湖南省協(xié)同創(chuàng)新中心, 常德 415000)

由于魚粉資源緊缺、價(jià)格上漲, 大量植物蛋白源被應(yīng)用到水產(chǎn)飼料中, 但植物蛋白源中氨基酸不平衡, 尤其是蛋氨酸缺乏, 影響了魚類生長(zhǎng)和代謝[1]。因此, 研究者通過添加蛋氨酸以期提高植物蛋白源的利用效果, 但外源性添加的蛋氨酸在水產(chǎn)動(dòng)物中的利用效果存在差異, 一些研究表明, 在低魚粉飼料中添加晶體蛋氨酸(C-Met)能顯著提高尼羅羅非魚(Oreochromis niloticus)[2]、軍曹魚(Rachycentron canadum)[3]、虹鱒(Oncorhynchus mykiss)[4]、南美白對(duì)蝦(Penaeus vannamei)[5]、異育銀鯽(Carassius auratus)[6]和黃顙魚(Pelteobagrus fulvidraco)[7]的生長(zhǎng)性能; 但是對(duì)鯉(Cyprinus carpio)[8]、斑節(jié)對(duì)蝦(Marsupenaeus japonicus)[9]、胭脂魚(Myxocyprinus asiaticus)[10]和花鱸(Lateolabrax japonocus)[11]等的促生長(zhǎng)效果卻不顯著。其原因可能是外源性添加晶體氨基酸與飼料中蛋白質(zhì)態(tài)氨基酸吸收不同步,而造成的氨基酸代謝效率下降[12]。針對(duì)此問題, 有學(xué)者通過包膜和膠囊化方式對(duì)C-Met進(jìn)行緩釋處理來提高氨基酸的利用率。據(jù)報(bào)道, 包膜蛋氨酸(EMet)在鯉[8]、異育銀鯽[13]、草魚(Ctenopharyngodon idellus)[14]和羅非魚[2]中的利用效果優(yōu)于CMet。蛋氨酸羥基類似物(MHA), 是由蛋氨酸的氨基被羥基取代的具有類似蛋氨酸功能的褐色黏液,具有較強(qiáng)的硫化物刺激性氣味, 且酸性較強(qiáng)。MHA與氫氧化鈣或氧化鈣中和反應(yīng), 即為固體粉狀的蛋氨酸羥基類似物鈣(MHA-Ca), 雖然MHA與MHA-Ca無氨基, 但在動(dòng)物體內(nèi)可通過生成L-蛋氨酸發(fā)揮作用, 有研究表明, 建鯉(Cyprinus carpiovarJian)對(duì)MHA和MHA-Ca的利用效果優(yōu)于C-Met[15]。

黃鱔(Monopterus albus)是我國(guó)重要的名特優(yōu)水產(chǎn)品養(yǎng)殖對(duì)象。本實(shí)驗(yàn)室前期研究表明, 去除皂素、多種凝集素、抗胰蛋白酶等抗?fàn)I養(yǎng)因子的大豆?jié)饪s蛋白的魚粉替代效果優(yōu)于豆粕, 但當(dāng)替代水平超過60%后, 黃鱔生長(zhǎng)性能顯著下降[16]。本試驗(yàn)以大豆?jié)饪s蛋白為主要植物蛋白源, 比較研究在低魚粉飼料中添加C-Met、E-Met、MHA-Ca及MHA對(duì)黃鱔生長(zhǎng)及氨基酸代謝的影響, 為蛋氨酸在低魚粉黃鱔飼料中的合理應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)飼料

以魚粉、大豆?jié)饪s蛋白和玉米蛋白粉為蛋白源, 魚油為脂肪源。以基礎(chǔ)飼料為對(duì)照組, 蛋氨酸添加量參照前期研究[17], 分別向基礎(chǔ)飼料中添加有效含量為2 g/kg的晶體蛋氨酸(C-Met, 98%)、包膜蛋氨酸(E-Met, 49%)、蛋氨酸羥基類似物鈣(MHA-Ca, 86%)、蛋氨酸羥基類似物(MHA,88%)。氨基酸產(chǎn)品由安迪蘇生命科學(xué)制品上海有限公司提供, 飼料配方見表 1和表 2。在飼料原料粉碎過80目篩后, 按飼料配方稱取各原料并混合均勻, 在室溫下風(fēng)干至水分含量低于10%, 再置于-20℃冰箱中保存?zhèn)溆? 投喂前加水調(diào)成面團(tuán)狀使用。

1.2 飼養(yǎng)與管理

試驗(yàn)動(dòng)物來源于洞庭湖區(qū)規(guī)格整齊的野生黃鱔, 初始體重(30.00±0.45) g。黃鱔入箱饑餓48h后進(jìn)行馴食, 首先投喂少許1:1的蚯蚓和鮮魚漿, 并根據(jù)攝食情況逐漸增加鮮魚漿的比例以及投喂量, 直到黃鱔能完全攝食鮮魚漿, 再添加粉狀飼料(鮮魚漿/試驗(yàn)飼料為4:1), 并依照攝食情況適當(dāng)增加粉狀飼料的比例, 直到黃鱔完全攝食粉狀飼料。在馴食結(jié)束后, 饑餓24h, 挑選健康、體格均勻的黃鱔, 隨機(jī)分成5個(gè)試驗(yàn)組, 每組設(shè)3個(gè)重復(fù), 共15個(gè)網(wǎng)箱(1.5 m×2.0 m×1.5 m), 每個(gè)網(wǎng)箱放養(yǎng)50尾黃鱔。根據(jù)黃鱔的攝食習(xí)性和減少氨基酸溶失, 試驗(yàn)飼料置于網(wǎng)箱中的水花生上。養(yǎng)殖試驗(yàn)在常德西湖區(qū)黃鱔養(yǎng)殖基地中進(jìn)行, 時(shí)間持續(xù)10周, 試驗(yàn)期間, 每天投喂1次(17:30—18:30), 投喂量為黃鱔體重的3%—5%,每7天調(diào)整1次投喂量。養(yǎng)殖期間, 水溫(28±3.5)℃,溶氧高于5.0 mg/L, 氨氮低于0.5 mg/L。在飼養(yǎng)結(jié)束后, 停食24h后進(jìn)行采樣。

表1 飼料組成及營(yíng)養(yǎng)水平(干物質(zhì), %)Tab. 1 The diet composition at each nutrition level (dry matter, %)

1.3 生長(zhǎng)指標(biāo)

所用黃鱔均在養(yǎng)殖試驗(yàn)前后禁食24h, 稱量各網(wǎng)箱黃鱔重量并統(tǒng)計(jì)尾數(shù), 在養(yǎng)殖過程中記錄黃鱔的攝食量。本試驗(yàn)所測(cè)生長(zhǎng)指標(biāo)包括: 成活率(Survival rate,SR)、增重率(Weight gain rate,WGR)、飼料系數(shù)(Feed conversion rate,FCR)、蛋白質(zhì)效率比(Protein

表2 試驗(yàn)飼料中氨基酸含量Tab. 2 The contents of amino acids of the experimental diets(g/kg)

SR()=100×Nt/N0WGR((W2-W1)/W1

FCR=W0/(W2-W1)

PER=100×(W2-W1)/(W0×P)HSI=100×W5/W3

VSI=100×(W3-W4)/W3

CF（g/m3）=W3/L3)=100式中:Nt為試驗(yàn)魚結(jié)束尾數(shù),N0為試驗(yàn)魚初始尾數(shù),P為試驗(yàn)飼料蛋白質(zhì)含量,W0為試驗(yàn)魚平均攝食飼料干物質(zhì)量(g),W1為試驗(yàn)魚初均重(g),W2為試驗(yàn)魚末均重 (g),W3為試驗(yàn)結(jié)束時(shí)魚體重(g),W4為試驗(yàn)結(jié)束時(shí)魚空殼重(g),W5為試驗(yàn)結(jié)束時(shí)魚肝臟重(g),L為試驗(yàn)結(jié)束時(shí)魚體長(zhǎng)(cm)。

1.4 飼料氨基酸含量測(cè)定、飼料及全魚常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分分析

飼料水解氨基酸含量測(cè)定: 參照國(guó)標(biāo)(GB/5009.124-2003)食品中氨基酸的測(cè)定方法。將待測(cè)飼料樣品干燥, 取100 mg樣品置于水解管, 加入5 mL 6 mg/L的鹽酸, 封住水解管管口, 在110℃恒溫下干燥水解22h, 取出冷卻, 打開水解管, 將水溶液過濾, 定容至100 mL, 取1 mL稀釋至10 mL, 取樣上機(jī)分析(氨基酸自動(dòng)分析儀, A300, 德國(guó))。

常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分測(cè)定: 取待測(cè)飼料樣品和全魚(每個(gè)網(wǎng)箱中隨機(jī)選取5尾黃鱔), 水分: 105℃常壓干燥法(GB/T5009.3-1985), 粗蛋白: 凱氏定氮法(GB/T5009.5-1985), 粗脂肪: 乙醚萃取法(GB/T5009.6-1985), 粗灰分: 550℃高溫灰化法(GB/T5009.4-1985)。

1.5 血清部分生化指標(biāo)測(cè)定

在養(yǎng)殖試驗(yàn)結(jié)束, 每箱隨機(jī)取6尾魚尾靜脈采血, 每箱隨機(jī)采血6尾, 血液隨機(jī)混合于2 mL無菌離心管中, 4℃靜置12h后, 4000 r/min離心10min, 取上層血清混合后于-80℃冰箱保存?zhèn)溆?。高密度脂蛋白膽固?High-density lipoprotein cholestero, HDLC)、低密度脂蛋白膽固醇(Low-density lipoprotein cholesterol, LDL-C)、總膽汁酸(Total bile acid,TBA)、甘油三酯(Triglyceride, TG)、總膽固醇(Total cholesterol, TC)、總蛋白(Total protein, TP)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(Glutamic oxalacetic transaminase,GOT)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(Glutamate pyruvic transa,GPT)、尿素氮(Blood urea nitrogen, BUN)以及血氨(Serum ammonia, Amon)采用南京建成生物工程研究所的試劑盒測(cè)定, 血糖(Glucose, Glu)采用浙江伊利康生物技術(shù)有限公司試劑盒測(cè)定。

血清游離氨基酸含量測(cè)定: 分別對(duì)黃鱔攝食0、3h、6h、9h、12h、24h進(jìn)行尾靜脈取血, 取血方式和處理方式同上。取200 μL血清于1.5 mL離心管中, 并加入等體積8%磺基水楊酸, 充分混勻,4℃沉淀過夜。取出離心管, 在4℃條件下, 10000 r/min離心10min。將上清液吸出, 經(jīng)0.22 μm濾膜過濾, 取樣上機(jī)分析(氨基酸自動(dòng)分析儀, A300, 德國(guó))。

1.6 腸道消化酶活性測(cè)定

每箱隨機(jī)取5尾黃鱔, 解剖, 取整個(gè)腸道, 去除內(nèi)容物, 并用冰生理鹽水清洗腸道, 濾紙吸干, 稱重、剪碎并勻漿, 4℃ 3000 r/min離心10min, 取上清液, 于24h內(nèi)分析。腸道淀粉酶(Amylase, AMS)、脂肪酶(Lipase, LPS)和胃蛋白酶(Trypsin, TRYP)采用南京建成生物研究所試劑盒測(cè)定。

1.7 肌肉質(zhì)構(gòu)參數(shù)分析

每箱選取5尾黃鱔, 取背部肌肉(0.5 cm×0.5 cm×0.5 cm), 采用質(zhì)構(gòu)儀(TMS-PRO, FTC, USA)測(cè)硬度(Hardness)、膠黏性(Gumminess)、咀嚼性(Chewiness)、黏附性(Adhesiveness)、內(nèi)聚性(Cohesive-ness)及彈性(Springiness)。測(cè)試速度為30 mm/min,接觸力為0.1 N, 形變量為60%。

1.8 數(shù)據(jù)處理與分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)使用Microsoft office Excel 2016軟件進(jìn)行初步計(jì)算, 然后采用SPSS (22.0版本)統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差分析, 當(dāng)差異顯著時(shí)(P＜0.05), 采用Duncan’s進(jìn)行多重檢驗(yàn), 分析結(jié)果用平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤(Mean±SE)表示。

2 結(jié)果

2.1 不同形式蛋氨酸對(duì)黃鱔生長(zhǎng)性能的影響

由表 3可知, 與對(duì)照組相比, 在低魚粉飼料中添加蛋氨酸均能提高黃鱔增重率和蛋白質(zhì)效率比, 降低飼料系數(shù), 且MHA-Ca和MHA組比對(duì)照組差異顯著(P＜0.05); 添加蛋氨酸組黃鱔肝體比均呈下降趨勢(shì), 且C-Met、MHA-Ca和MHA組比對(duì)照組差異顯著(P＜0.05); 添加E-Met和MHA-Ca黃鱔臟體比顯著提高(P＜0.05), 各組間黃鱔肥滿度無顯著性差異(P＞0.05)。

2.2 不同形式蛋氨酸對(duì)黃鱔腸道消化酶活力的影響

由表 4可知, 與對(duì)照組相比, 在低魚粉飼料中添加蛋氨酸均顯著提高了腸道胰蛋白酶活力(P＜0.05);添加E-Met、MHA-Ca和MHA顯著提高了腸道淀粉酶活力(P＜0.05); 添加MHA-Ca顯著提高了脂肪酶活力(P＜0.05), 但添加C-Met脂肪酶活力顯著下降P＜0.05)。

2.3 不同形式蛋氨酸對(duì)黃鱔血清部分生化指標(biāo)的影響

由表 5可知, 與對(duì)照組相比, 添加蛋氨酸均顯著提高了黃鱔血清膽汁酸、總膽固醇、總蛋白、尿素氮和血氨含量(P＜0.05); E-Met、MHA-Ca和MHA組血清葡萄糖和高密度脂蛋白膽固醇含量顯著升高(P＜0.05), 而谷草轉(zhuǎn)氨酶活力顯著下降(P＜0.05);E-Met與MHA-Ca組血清低密度脂蛋白膽固醇含量顯著上升(P＜0.05)。

2.4 不同形式蛋氨酸對(duì)黃鱔肝臟轉(zhuǎn)氨酶活力的影響

由表 6可知, 與對(duì)照組相比, E-Met、MHACa和MHA組肝臟GOT活力均顯著提高(P＜0.05), CMet組肝臟GOT活力顯著降低; C-Met、E-Met和MHA-Ca組肝臟GPT活力均顯著提高(P＜0.05)。

2.5 不同形式蛋氨酸對(duì)黃鱔肌肉質(zhì)構(gòu)參數(shù)的影響

由表 7可知, 與對(duì)照組相比, 在低魚粉飼料中添加蛋氨酸均顯著提高了肌肉黏附性和膠黏性(P＜0.05), 但對(duì)內(nèi)聚性無顯著影響(P＞0.05); 添加EMet、MHA-Ca和MHA顯著提高了肌肉硬度、彈性和咀嚼性(P＜0.05)。

2.6 不同形式蛋氨酸對(duì)黃鱔全魚體成分的影響

由表 8可知, 與對(duì)照組相比, 在低魚粉飼料中添加蛋氨酸對(duì)黃鱔全魚水分和粗脂肪含量均無顯著性影響(P＞0.05); 添加C-Met、MHA-Ca和MHA均顯著提高了全魚粗蛋白含量(P＜0.05), 添加E-Met顯著提高了全魚灰分含量(P＜0.05), 而添加C-Met和MHA-Ca顯著降低了全魚灰分含量(P＜0.05)。

表3 不同形式蛋氨酸對(duì)黃鱔生長(zhǎng)性能的影響(平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤, n=6)Tab. 3 Effects of dietary methionine on growth performance of Monopterus albus (Mean±SE, n=6)

表4 不同形式蛋氨酸對(duì)黃鱔腸道消化酶活力的影響(平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤, n=9, U/mg prot)Tab. 4 Effects of dietary methionine on the activities of intestinal digestive enzymes on Monopterus albus (Mean±SE, n=9, U/mg prot)

2.7 不同形式蛋氨酸對(duì)黃鱔血清游離氨基酸含量的影響

由圖 1可知, 對(duì)照組在攝食6h后, 血清出現(xiàn)總必需氨基酸吸收峰值, 但蛋氨酸吸收未出現(xiàn)明顯峰值,且趨勢(shì)較平穩(wěn)。C-Met與MHA-Ca組均在攝食9h后出現(xiàn)蛋氨酸和總必需氨基酸吸收峰值。E-Met組在攝食3h后血清出現(xiàn)總必需氨基酸吸收峰值, 攝食12h后出現(xiàn)血清蛋氨酸峰值。MHA組在攝食3h后出現(xiàn)血清蛋氨酸和總必需氨基酸吸收峰值, 攝食9h后再次出現(xiàn)蛋氨酸峰值。

表5 不同形式蛋氨酸對(duì)黃鱔血清部分生化指標(biāo)的影響(平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤, n=9)Tab. 5 Effects of dietary methionine on serum biochemical indexes of Monopterus albus (Mean±SE, n=9)

表6 不同形式蛋氨酸對(duì)黃鱔肝臟轉(zhuǎn)氨酶活力的影響(平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤, n=9, U/g prot)Tab. 6 Effects of dietary methionine on the activities of hepatosomatic aminotransferases on Monopterus albus (Mean±SE, n=9, U/g prot)

表7 不同形式蛋氨酸對(duì)黃鱔肌肉質(zhì)構(gòu)參數(shù)的影響(平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤, n=15)Tab. 7 Effects of dietary methionine on muscle texture of Monopterus albus (Mean±SE, n=15)

3 討論

3.1 不同形式蛋氨酸對(duì)黃鱔生長(zhǎng)性能的影響

本試驗(yàn)結(jié)果顯示, 在低魚粉飼料中添加MHACa和MHA促黃鱔生長(zhǎng)效果顯著, 但添加C-Met效果不顯著, 這與在建鯉(Cyprinus carpiovarJian)[15]和凡納濱對(duì)蝦(Litopenaeus vannamei)[18,19]上的研究結(jié)果類似。其原因可能是C-Met在腸道中被快速吸收, 蛋白質(zhì)態(tài)的結(jié)合氨基酸需經(jīng)過水解后才能被利用, 導(dǎo)致氨基酸吸收不同步。通過分析黃鱔血清游離氨基酸發(fā)現(xiàn), E-Met組蛋氨酸吸收峰值比C-Met組有所延長(zhǎng), 其原因是E-Met需先分解包膜, 使Met逐漸被腸道吸收, 具有一定緩釋效果, 但與C-Met類似, 其促生長(zhǎng)效果不顯著, 這與在建鯉(Cyprinus carpiovarJian)[15]上的結(jié)果不同, 可能是不同魚類對(duì)E-Met利用存在種屬間差異, 具體原因有待深入研究。MHA組總必需氨基酸和蛋氨酸吸收峰值比C-Met組提前, 且仍再次出現(xiàn)蛋氨酸吸收峰值, 這可能是由于L-蛋氨酸通過Na+載體被腸道吸收[20], 而MHA通過H+非立體專一性轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)被轉(zhuǎn)運(yùn)[21], 且MHA具有較強(qiáng)的酸性, 能自身提供H+,故較容易被黃鱔腸道吸收, 并在機(jī)體中再次轉(zhuǎn)化為L(zhǎng)-蛋氨酸參與代謝[22]。MHA-Ca與C-Met組蛋氨酸和總必需氨基酸吸收時(shí)間雖類似, 但MHA-Ca需先經(jīng)過分離出Ca2+, 然后轉(zhuǎn)化為L(zhǎng)-蛋氨酸參與機(jī)體代謝[23]。MHA-Ca和MHA促黃鱔生長(zhǎng)的原因可能是: (1) MHA-Ca和MHA轉(zhuǎn)化為L(zhǎng)-蛋氨酸被機(jī)體利用的過程相對(duì)C-Met具有一定的緩釋效果, 使機(jī)體氨基酸含量達(dá)到動(dòng)態(tài)平衡, 從而顯著提高黃鱔生長(zhǎng), 且MHA具有較強(qiáng)的酸性, 有利于食糜在胃中消化; (2) MHA-Ca和MHA不但具有抗氧化能力, 并且參與機(jī)體多胺(包括腐胺、亞精胺和精胺等)合成, 多胺可調(diào)控細(xì)胞間的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、機(jī)體遺傳物質(zhì)轉(zhuǎn)錄及蛋白質(zhì)翻譯[24], 調(diào)節(jié)腸道穩(wěn)態(tài), 改善腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)等[25,26]。

表8 不同形式蛋氨酸對(duì)黃鱔全魚體成分的影響(平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤, n=9, %)Tab. 8 Effects of dietary methionine on the composition of whole body of Monopterus albus (Mean±SE, n=9, %)

本試驗(yàn)所添加蛋氨酸均不同程度提高了黃鱔腸道消化酶活力, 其中胃蛋白酶活力差異顯著, 且MHA-Ca效果最佳, 這與在花鱸上的研究結(jié)果類似[27];與此同時(shí), 黃鱔全魚粗蛋白含量與腸道胃蛋白酶活力變化趨勢(shì)一致, 這與在羅非魚(Oreochromis niloticus×O. aureus)[2]上研究結(jié)果類似, 可能是由于黃鱔與羅非魚均具有明顯的胃[2,28], 食糜在胃中儲(chǔ)存并消化, 再蠕動(dòng)至腸道, 使氨基酸吸收不同步問題得到一定程度緩解。本試驗(yàn)MHA-Ca組腸道脂肪酶活力雖顯著提高了, 但對(duì)全魚粗脂肪含量均無顯著性影響, 這與在建鯉上的研究結(jié)果類似[15], 可能是MHA-Ca并不影響黃鱔脂肪沉積, 但對(duì)肉食性的黃鱔而言, 有利于食糜消化和蛋白質(zhì)沉積[29]。

圖1 黃鱔攝食不同時(shí)間點(diǎn)血清蛋氨酸和總必需氨基酸吸收?qǐng)DFig. 1 Absorption map of methionine and serum essential amino acids at different time points of Monopterus albus

3.2 不同形式蛋氨酸對(duì)黃鱔血清和肝臟生化指標(biāo)的影響

葡萄糖是機(jī)體代謝的直接能量來源, 血糖能反映機(jī)體生理狀況和代謝能力, 本試驗(yàn)添加E-Met、MHA-Ca和MHA血清葡萄糖含量均比對(duì)照組顯著升高, 這與在黃顙魚[7]和虹鱒[30]上的研究結(jié)果類似,合理添加蛋氨酸有利于提高魚類對(duì)葡萄糖的吸收和轉(zhuǎn)運(yùn), 減少因蛋白質(zhì)供能帶來的消耗。血清總膽固醇是機(jī)體代謝的重要脂類物質(zhì), 膽汁酸能乳化脂肪顆粒, 脂蛋白由脂蛋白載體和脂質(zhì)結(jié)合形成, 是脂類物質(zhì)在體內(nèi)的一種運(yùn)輸方式, 高密度膽固醇脂蛋白是肝臟外組織中的膽固醇運(yùn)送至肝臟的載體,低密度膽固醇脂蛋白是肝臟中的膽固醇轉(zhuǎn)運(yùn)至其他組織的載體, 可反映出機(jī)體脂質(zhì)代謝狀況。與對(duì)照組相比, 本試驗(yàn)所添加蛋氨酸均顯著提高了黃鱔血清總膽固醇和膽汁酸含量, 這與在凡納濱對(duì)蝦[18]上的研究結(jié)果類似。與此同時(shí), 本試驗(yàn)E-Met、MHACa和MHA組高密度脂蛋白膽固醇含量相比對(duì)照組顯著升高, 且E-Met與MHA-Ca組血清低密度脂蛋白膽固醇含量顯著上升, 與在凡納濱對(duì)蝦上的研究結(jié)果不同[18]。蛋氨酸可能提高了黃鱔脂肪代謝能力, 增強(qiáng)機(jī)體對(duì)脂質(zhì)的吸收, 并有助于肝臟中膽固醇排出, 從而減少脂肪在肝臟中蓄積[30], 導(dǎo)致黃鱔肝體比下降。

氨基酸主要通過合成蛋白質(zhì)參與生命活動(dòng), 多余的氨基酸則主要分解為氨和碳骨架, 氨進(jìn)一步代謝為尿素氮[31], 本試驗(yàn)所添加蛋氨酸均顯著提高了黃鱔血清總蛋白、尿素氮和血氨含量, 可能是蛋氨酸的添加, 機(jī)體蛋白質(zhì)合成效率提高, 多余氨基酸則被分解。在正常狀態(tài)下, 肝臟GPT活力升高表明氨基酸代謝旺盛, 合成代謝加快, 蛋白質(zhì)分解能力下降; 肝臟GOT活性升高, 表明機(jī)體多余的氨基酸生成尿素氮的過程加快。當(dāng)肝細(xì)胞受損, 轉(zhuǎn)氨酶會(huì)大量進(jìn)入到血液中, 故而血清中轉(zhuǎn)氨酶含量能反映肝臟健康狀況。與對(duì)照組相比, 本試驗(yàn)E-Met、MHA-Ca和MHA組肝臟GOT活力均顯著提高, CMet組GOT活力顯著降低, 且C-Met、E-Met和MHA-Ca組肝臟GPT活力均顯著提高, 這與在幼建鯉[21]上的研究結(jié)果類似; 與此同時(shí), E-Met、MHACa和MHA組血清GOT活力均比對(duì)照組顯著下降,這與在花鱸[27]和建鯉[32]上的研究結(jié)果類似。其原因可能是: (1) 所添加蛋氨酸與機(jī)體蛋白質(zhì)態(tài)氨基酸吸收同步有利于肝臟健康, 提高機(jī)體氨基酸代謝效率, 進(jìn)而提高蛋白質(zhì)合成效率[30]; (2) MHA-Ca和MHA不但能促進(jìn)無機(jī)氮代謝, 并且由于沒有氨基,在代謝過程中不會(huì)發(fā)生脫氨基反應(yīng), 有利于減少有害無機(jī)氮在機(jī)體蓄積。

3.3 不同形式蛋氨酸對(duì)黃鱔肌肉質(zhì)構(gòu)參數(shù)的影響

硬度、膠黏性、咀嚼性、黏附性、內(nèi)聚性及彈性等是用來評(píng)價(jià)肌肉質(zhì)構(gòu)的物理性指標(biāo)[33], 硬度越大, 其抵抗牙齒咬力的能力越大, 彈性也越大, 膠黏性用來描述評(píng)價(jià)力作用下物體流動(dòng)性參數(shù), 咀嚼性由硬度、內(nèi)聚性和彈性相乘所得[34]。研究表明,在高植物蛋白替代魚粉后, 建鯉肌肉硬度、彈性、咀嚼性和膠黏性等肌肉質(zhì)構(gòu)參數(shù)顯著下降[35]。本試驗(yàn)結(jié)果表明, 在低魚粉飼料中添加蛋氨酸可提高肌肉黏附性和膠黏性, 其中, E-Met、MHA-Ca和MHA可顯著提高肌肉硬度、彈性和咀嚼性, 其原因可能與氨基酸平衡且同步吸收有利于蛋白質(zhì)合成, 提高肌肉發(fā)育有關(guān); 另一方面, 本試驗(yàn)為解決飼料中等氮問題, 各處理組均加入了一定量的谷氨酸,且E-Met、MHA-Ca和MHA組飼料中谷氨酸含量實(shí)測(cè)值比對(duì)照組更低, 肌肉硬度、彈性和咀嚼性仍顯著高于對(duì)照組, 而谷氨酸可顯著提高草魚肌肉硬度、彈性、咀嚼性和膠黏性[36], 由此可推測(cè), 蛋氨酸比谷氨酸對(duì)提高肌肉質(zhì)構(gòu)效果更佳, 原因可能是蛋氨酸中的巰基對(duì)肌肉發(fā)育起了一定的作用[37], 具體原因有待進(jìn)一步研究。

4 結(jié)論

在低魚粉飼料中添加C-Met、E-Met、MHACa及MHA均有提高黃鱔代謝、促進(jìn)生長(zhǎng)的趨勢(shì),其中MHA與MHA-Ca效果顯著, 且MHA效果最佳。