陳秀娜 王力君 韓永輝

摘? ? ? 要：以青海省海東市富硒產(chǎn)業(yè)園區(qū)農(nóng)產(chǎn)品（雞蛋、甜瓜、菜籽、清油等）為樣本，采用氫化物原子熒光法來測定硒的含量， 研究了富硒飼料對雞蛋中硒含量的影響。通過給相同狀態(tài)的雞群喂以不同天數(shù)和不同配方的富硒飼料，收集雞蛋，比較它們的硒含量測試結(jié)果。通過實(shí)驗(yàn)選擇合適的配方和喂養(yǎng)天數(shù)，為養(yǎng)雞用戶科學(xué)養(yǎng)雞提供理論依據(jù)。采用氫化物原子熒光法測定產(chǎn)業(yè)園區(qū)不同的樣本，所得硒的曲線線性良好，檢出限為0.017 mg/kg，該方法的準(zhǔn)確度和精密度都較好，RE為0.77%～4.76%，RSD在0.16%～3.59%之間。通過對不同樣本加標(biāo)測定其回收率，所得回收率在95.0%～102%之間。

關(guān)? 鍵? 詞：農(nóng)產(chǎn)品; 雞蛋; 原子熒光; 富硒飼料

中圖分類號：O433.4? ? ? 文獻(xiàn)標(biāo)識碼： A? ? ? ?文章編號： 1671-0460（2019）10-2328-04

Abstract： The selenium contents of agricultural products （eggs，melon，rapeseed，oil，etc.） from the selenium-rich industrial park in Haidong city of Qinghai province were determined by hydride atomic fluorescence method. The effect of selenium-rich feed on selenium content in the egg was studied. Chickens in the same state were fed selenium enriched diets with different formulations and different days.At the same time， eggs were collected，and their selenium test results were compared. The proper formulation and feeding days were determined through experiments， which can provide theoretical foundations for chicken farmers to raise chickens scientifically. In this paper， hydride atomic fluorescence method was used to determine different samples in the industrial park. The obtained selenium curve was linear with a detection limit of 0.017 mg/kg. The accuracy and precision of this method were good， with RE ranging from 0.77% to 4.76% and RSD ranging from 0.16% to 3.59%.The recovery rate was 95.0%～102% in different samples.

Key words： Agricultural products; Eggs; Atomic fluorescence; Selenium-rich feed

硒是自然界中廣泛分布的一種準(zhǔn)金屬元素，也是人體和動(dòng)物生命所必需的微量元素之一，能提高人體免疫力，具有減輕和緩解重金屬毒性的作用 [1]。硒缺乏或過量都會(huì)導(dǎo)致人和動(dòng)物產(chǎn)生疾病[2]。人體缺硒會(huì)造成大骨節(jié)病、癌癥、心血管疾病、克山病、白內(nèi)障、高血壓和甲狀腺腫大等多種疾病[1]。但是硒攝入過量也會(huì)導(dǎo)致人體中毒、出現(xiàn)指甲脫落、脫發(fā)等[2]。研究發(fā)現(xiàn)缺硒會(huì)造成器官機(jī)能失調(diào)，適量補(bǔ)硒可以防止心血管疾病、抗癌等。人體中的硒主要通過日常飲食獲得，因此農(nóng)產(chǎn)品中硒的含量的高低直接影響人們?nèi)粘Ｎ康臄z入量。

近幾年來，富硒食品例如富硒雞蛋、富硒雞肉、富硒大蒜、富硒蔬菜等被人們炒的火熱，富硒產(chǎn)業(yè)也迎來了發(fā)展的熱潮[3，4]。通過生物學(xué)方法生產(chǎn)富硒食品是一種安全有效的方法，主要包括：微生物富集法、植物轉(zhuǎn)化法和動(dòng)物轉(zhuǎn)化法三種方法，其中動(dòng)物轉(zhuǎn)化法是采用含硒量較高的飼料喂養(yǎng)動(dòng)物以生產(chǎn)富硒類產(chǎn)品[5]。

目前硒含量的測試方法主要有電化學(xué)法、氣相色譜法、比色法、中子活化法、原子吸收法等。這些方法在測定中均存在一些缺點(diǎn)，例如比色法靈敏度低，試劑不穩(wěn)定;電化學(xué)法受干擾嚴(yán)重;中子活化法所需設(shè)備要求較高;氫化物原子吸收法靈敏度較高，但是線性范圍較窄，樣品用量大。氫化物原子熒光光譜法選擇性強(qiáng)、靈敏度高、線性范圍寬[6，7]。因此本文主要采用動(dòng)物轉(zhuǎn)化法來研究富硒飼料對雞蛋中硒含量的影響。采用原子熒光光譜法[8，9]來測試農(nóng)產(chǎn)品中硒的含量，通過給同樣狀態(tài)的雞群喂以不同天數(shù)和不同配方的富硒飼料，選擇合適的配方和喂養(yǎng)天數(shù)，為養(yǎng)雞用戶科學(xué)養(yǎng)雞提供理論依據(jù)。

1? 實(shí)驗(yàn)部分

1.1? 儀器與試劑

（1）AFS-8330雙道原子熒光光度計(jì)（北京吉天公司）配硒空心陰極燈;

（2）MARSXPress微波消解儀（美國CEM公司）;

（3）JYL-C03V食品粉碎機(jī)（九陽）;

（4）電子天平（BSA124S）;

（5）硒標(biāo)準(zhǔn)溶液：100mg/L（國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中心）;

（6）20%鹽酸（優(yōu)級純）;

（7）硝酸（優(yōu)級純）;

（8）高氯酸（優(yōu)級純）;

（9）過氧化氫（優(yōu)級純）;

（10）硼氫化鉀（優(yōu)級純）;

（11）氫氧化鉀（優(yōu)級純）;

（12）一級水。

1.2? 儀器工作參數(shù)

測試前，先將儀器預(yù)熱足夠長的時(shí)間，使儀器的靈敏度和穩(wěn)定性等參數(shù)達(dá)到最佳狀態(tài)，其余的優(yōu)化后的儀器參數(shù)見表1。

1.3? 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1? 試樣制備

青海省海東市平安富硒園區(qū)雞蛋、甜瓜、菜籽、清油若干，取不同配方（1-4）和不同喂養(yǎng)天數(shù)（5，10，15，20）的雞蛋，將雞蛋殼敲碎，倒出蛋清和蛋黃，攪勻，將甜瓜和菜籽用食品粉碎機(jī)分別粉碎，備用。

1.3.2? 實(shí)驗(yàn)過程

稱0.2～0.5 g樣品于微波消解管中，加入10 mL硝酸，2 mL雙氧水，靜置過夜。然后在120 ℃加熱保溫30 min，之后蓋上內(nèi)塞和外塞放入微波消解儀中，設(shè)定消解程序。微波消解程序設(shè)定如下：

step1.最大功率1 600 W（90%），以10 ℃/min速率到100 ℃，保持10 min;

step2.最大功率1 600 W（90%），以5 ℃/min速率到150 ℃，保持10 min;

step3.最大功率1 600 W（90%），以5 ℃/min速率到190 ℃，保持40 min。

消解完畢后，將消解管中的溶液轉(zhuǎn)移至干凈的100 mL燒杯中，并用蒸餾水沖洗管壁，加入1 mL高氯酸。將燒杯置于電熱板上低溫加熱，直至高氯酸白煙冒出，取下，放涼，加入5 mL鹽酸，再將此溶液置于電熱板上低溫加熱至溶液產(chǎn)生泡泡后，將六價(jià)硒還原成四價(jià)硒，取下，轉(zhuǎn)移至10 mL比色管中，定容至刻度并搖勻，同時(shí)做試劑空白實(shí)驗(yàn)。在AFS-8330原子熒光光度計(jì)上測定硒的含量。

1.3.3? 實(shí)驗(yàn)結(jié)果測試

以20%的鹽酸溶液為載流，硼氫化鉀堿溶液（2%）為還原劑，連續(xù)用標(biāo)準(zhǔn)系列的零管進(jìn)樣，待讀數(shù)穩(wěn)定后，將硒標(biāo)準(zhǔn)溶液按照濃度由低到高，分別測試，測定其熒光強(qiáng)度，以質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，熒光強(qiáng)度為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。在此儀器條件不變的情況下，分別測試空白溶液和試樣溶液的熒光強(qiáng)度，并與標(biāo)準(zhǔn)系列比較定量結(jié)果。試樣中硒的含量以質(zhì)量分?jǐn)?shù)ω（Se）計(jì)，單位以mg/kg表示，計(jì)算公式如下：

ω（Se）=（ρ1-ρ0）×V/（m×1 000）

式中：ρ1—從校準(zhǔn)曲線上查得試樣溶液中的硒量，ng/mL;

ρ0—從校準(zhǔn)曲線上查得空白溶液中的硒量，ng/mL;

m—試料質(zhì)量， g;

V—試樣定容體積， mL;

1 000—換算系數(shù)。

2? 結(jié)果與討論

2.1? 硼氫化鉀溶液濃度的選擇

硼氫化鉀溶液是常用的還原劑之一，當(dāng)硼氫化鉀溶液濃度過低時(shí)，其還原能力差，反應(yīng)速度慢，靈敏度低[6]，不能很好的將六價(jià)硒還原成四價(jià)硒，導(dǎo)致測試結(jié)果偏低。當(dāng)硼氫化鉀溶液濃度過高時(shí)，產(chǎn)生過量的氫氣會(huì)稀釋硒的氫化物，導(dǎo)致靈敏度下降[6]，影響測試結(jié)果。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：當(dāng)硼氫化鉀溶液的質(zhì)量濃度在2%～5%之間時(shí)，硒的熒光強(qiáng)度值趨于相對穩(wěn)定，故本文選擇硼氫化鉀溶液的濃度為2%。

2.2? 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

取100 mg/L的硒標(biāo)準(zhǔn)溶液用20%的稀鹽酸逐級稀釋到10 ng/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液，分別配制成0.25、0.50、0.75、1.00、2.50、5.00、10.0 ng/mL等不同濃度水平的標(biāo)準(zhǔn)系列，以硒標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為橫坐標(biāo)，熒光值為縱坐標(biāo)，繪制校準(zhǔn)曲線，校準(zhǔn)曲線如圖1所示。

2.3? 方法檢出限

鑒于氫化物原子熒光光譜法測試硒已經(jīng)是非常成熟的方法，本文采用國家一級標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)GSB24（河南小麥）按照前文所述實(shí)驗(yàn)條件平行處理7次，以7次的測定結(jié)果計(jì)算檢出限，結(jié)果見表2。通過表2可以得知，該方法的檢出限為0.017 mg/kg，測定值均在標(biāo)準(zhǔn)推薦值范圍內(nèi)。

2.4? 方法準(zhǔn)確度和精密度

本文采用國家一級標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)GSB3、GSB13、GSB21、GSB26作為監(jiān)控樣，按照前文所述的實(shí)驗(yàn)條件處理樣品后，按照表1的條件平行測試7次，實(shí)驗(yàn)測試結(jié)果見表3。通過表3可見，該方法的準(zhǔn)確度和精密度都較好，RE為0.77%～4.76%，RSD在0.16%～3.59%之間，測定值均在標(biāo)準(zhǔn)推薦值范圍內(nèi)。

2.5? 配方的選擇

選擇長勢相同的雞群分別按照配方1、配方2、配方3和配方4喂養(yǎng)相同的天數(shù)，其中選取一組普通喂養(yǎng)（即不添加富硒飼料），收集雞蛋，經(jīng)過消解處理后上機(jī)測試。經(jīng)過測試發(fā)現(xiàn)，普通組雞蛋中硒也有檢出，只是含量較配方雞蛋略低，測試結(jié)果見表4。通過表4可以發(fā)現(xiàn)用配方2飼養(yǎng)的雞中的雞蛋硒含量最高，故選擇配方2喂養(yǎng)雞群。

2.6? 喂養(yǎng)天數(shù)的選擇

選擇長勢相同的雞群按照配方2分別喂養(yǎng)0、5、10、15、20 d，收集雞蛋，經(jīng)過消解處理后上機(jī)測試，測試結(jié)果見表5。通過表2可以發(fā)現(xiàn)喂養(yǎng)天數(shù)在10和15 d時(shí)較為合適，考慮到富硒飼料的價(jià)格成本問題，以及人體吸收等綜合因素，建議選擇喂養(yǎng)10 d收集雞蛋。

2.7? 實(shí)際樣品的測定

選取園區(qū)中雞蛋、甜瓜、菜籽、清油等不同樣品，按照前文所述的實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，同時(shí)做加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)測試數(shù)據(jù)見表6?；厥章试?5.0%～102%之間，結(jié)果令人滿意。

3? 結(jié)束語

本文采用氫化物原子熒光法測定產(chǎn)業(yè)園區(qū)不同的樣本，所得硒的曲線線性良好，檢出限為0.017 mg/kg，該方法的準(zhǔn)確度和精密度都較好，RE為0.77%～4.76%，RSD在0.16%～3.59%之間。通過實(shí)驗(yàn)，選取配方2和喂養(yǎng)天數(shù)10天為最佳。通過對富硒產(chǎn)業(yè)園區(qū)的不同樣本的加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)，所得回收率在95.0%～102%之間。

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