郭 強

（商丘學院體育學院，河南 商丘 476000）

食用菌鮮美可口，同時包含人體所需氨基酸、蛋白質(zhì)、維生素及多糖等多種營養(yǎng)成分，且不含膽固醇及淀粉，經(jīng)常食用可顯著提高人體對食物營養(yǎng)的吸收率，在抗腫瘤方面同樣具有顯著的效果，具有提高人體免疫力、降低血壓，保護肝臟組織，預防粥樣動脈硬化等多種作用[1]。

目前，市場上關(guān)于培養(yǎng)食用菌液體發(fā)酵的試驗層出不窮，工藝也越來越精湛。據(jù)相關(guān)報道，食用菌發(fā)酵后，得到的液體不僅可以抑制腫瘤活性，而且還可以美白保濕，保護人體肝臟，但抗疲勞和抗氧化能力沒有被明確提出[1]。通過食用菌液體的發(fā)酵，我們可以獲得質(zhì)量相當穩(wěn)定的發(fā)酵液，而且這種方式相對于固體培養(yǎng)有更多的優(yōu)勢。第一，可以獲得更高的產(chǎn)量。第二，液體發(fā)酵的條件沒有那么苛刻，發(fā)酵的周期不但短而且過程便于控制[2]。

本文中采用強制喂食小鼠長柄側(cè)耳發(fā)酵液，不斷反復地研究小白鼠的運動能力，耐缺氧時間，血乳酸、尿素氮、肝糖原儲存量肝糖原儲存量等指標。據(jù)研究表明，側(cè)耳屬類食用菌不管是在機體免疫力上，抗腫瘤上，還有降壓降脂方面都具有比其他食用菌較好的作用，該項目的重點是研究長柄側(cè)耳的菌種發(fā)酵對有血清中的膽固醇或者甘油三酯高于正常值的小鼠的預防作用，以及怎樣保護小白鼠的肝臟和提高小鼠抗氧化能力的，以便為長柄側(cè)耳菌種的使用發(fā)展提供科學依據(jù)[1]。為進一步研究和發(fā)揮食用菌在藥材方面的作用提供參考。

1 實驗方法

1.1 材料與方法

1.1.1 材料與試劑

長柄側(cè)耳菌株 502001（Changxingjin land ecological agriculture development Co.Ltd.）；尿素氮（Produit par zhejiang aikang biotech Co.Ltd.）、Blood lactic acid試劑盒；葡萄糖、乙醇等（Hangzhou zhengshan chemical Co.Ltd.），均為分析純；400只清潔級ICR57小鼠（Jinan jinfeng experimental animal Co.Ltd），雄性，30 g～32 g，動物許可證號為SCXK2016-0001。SOD、MDA、GSH-PX測試盒。

液體培養(yǎng)基：葡萄糖2%、蛋白胨1%、酵母浸粉 1%、磷酸二氫鉀 0.05%、硫酸鎂 0.05%[3]。

1.1.2 主要用到的儀器

EKF lactatescout便攜式Blood lactic acid測定儀；TS-5型離心機；WFJ-15型超微粉碎機；電熱恒溫水浴鍋；可見分光光度計小鼠飼養(yǎng)籠；Hei-VAPA dvantage旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀；小鼠恒溫游泳池。

1.1.3 長柄側(cè)耳發(fā)酵液的制備

先于0.5 L的錐形瓶容器裝入0.3 kg的液體培養(yǎng)基，液體發(fā)酵罐的菌種量比例是1%，以30℃的溫度培養(yǎng)5 d得到液體菌種。0.5 L搖瓶裝入液體培養(yǎng)基0.3 kg，之后移入液體菌種，液體發(fā)酵罐的菌種量控制在1%，200 r·min-1、26℃培養(yǎng)5 d[4]。通過抽吸過濾發(fā)酵液體，獲得用于小鼠試驗的發(fā)酵的試發(fā)酵液。

1.2 灌胃劑量與分組

把試驗小白鼠分為4個組，各試驗每組小鼠20只分別進行食用菌發(fā)酵液的喂食，每天按照體重分別灌胃 10 mg·kg-1d-1、20 mg·kg-1d-1和 30 mg·kg-1d-1的劑量，對照組灌胃每天10 mg·kg-1蒸餾水，持續(xù)1個月。

1.3 負重游泳實驗

小白鼠最后1次灌胃0.5 h后，在小白鼠的尾巴上扣上其體重4%重量的的鉛絲，然后把它丟入試驗游泳箱中，水溫控制在30℃左右，水的高度0.3 m，然后把小白鼠完全在水面下面的游泳時間超過5 s的時間的長短記錄下來。

1.3.1 爬桿試驗

小鼠最后1次灌胃0.5 h后，進行爬桿試驗。記錄由于肌肉疲勞導致摔落的小白鼠開始和跌落之間的時間，反復試驗3次。

1.3.2 耐缺氧試驗

耐缺氧試驗需要在喂食長柄側(cè)耳發(fā)酵液0.5 h之后進行，首先在0.5 L容積的廣口瓶放入15 g的石灰，使之沉淀在瓶底，然后把小白鼠依次放入每個瓶子里，把瓶口密封起來，然后把從加蓋到小老鼠停止呼吸的時間記下來（不斷晃動廣口瓶，小鼠沒有動靜可判斷已死亡）。

1.3.3 尿素氮、肝糖原儲存量和血乳酸測定方法

小鼠最后1次灌胃0.5 h后，讓其在符合標準的游泳池中游1.5 h之后，去除血清并分離血清，測尿素氮的含量，取0.2 g的肝組織測肝糖原的儲存量，在眼球取血，測血乳酸含量。

1.3.4 抗氧化指標測定

小鼠最后1次灌胃0.5 h后，在小白鼠的尾巴上扣上它體重10%重量的的鉛絲，讓它在試驗游泳箱中游泳，使其精疲力竭之后（以頭部在水中10 s沒有浮出水面為標準），取其肝組織測SOD、GSH-Px的活力和MDA的水平。

2 試驗結(jié)果

2.1 長柄側(cè)耳發(fā)酵液在抗疲勞方面的作用

長柄側(cè)耳酵液對小鼠負重游泳、爬桿和耐缺氧時間的影響見表1。

表1 長柄側(cè)耳發(fā)酵液對小鼠負重游泳、爬桿和耐缺氧時間的影響Tab.1 Effects of Plearotas spodoleucas fermentation liquid on swimming,climbing and anoxia tolerance time

從表1的數(shù)據(jù)對比對照組H2O 10 mg·kg-1d-1，低劑量組 10 mg·kg-1d-1、中劑量組 20 mg·kg-1d-1；高劑量組30 mg·kg-1d-1食用菌酵液灌胃之后，小白鼠的運動時間變長久了，比如游泳或者爬桿的時候，另外，耐缺氧的時間也變長，它表明食用菌酵液對小鼠運動耐力的增強，也說明食用菌發(fā)酵液在抗疲勞方面，功能非常強大。

2.2 小鼠指標在灌胃發(fā)酵液之后的變化

食用菌酵液對小鼠指標的影響如表2所示。

由表2可知，低劑量組（10 mg·kg-1d-1）小鼠的尿素氮、血乳酸和MDA含量都在下降，肝糖原儲存量、SOD和GSH-P x活性有所上升，但差異都不是很明顯；高劑量組（30 mg·kg-1d-1）肝糖原儲存量、SOD和GSH-P x活性相對于對照組顯著上升，尿素氮、血乳酸和MDA含量也顯著下降。說明食用菌食用菌酵液越多，小鼠抗氧化能力越強。

表2 食用菌酵液對小鼠指標的影響Tab.2 Effect of Plenrotus spodoleacas fermentation liquid on mouse indexes

3 結(jié)論

市場的現(xiàn)實需求是需要符合當下社會公眾的思想認知的，兩者密不可分。也就是說，隨著生活中人們越來越看重自己的健康，因為食用菌的營養(yǎng)豐富，對健康有大有裨益，所以食用菌的需求量會越來越大，需求量的提成，也會促進更多的食用菌方面的開發(fā)和利用。因為網(wǎng)絡讓人們了解了更多的疾病，人們也已經(jīng)不再僅僅考慮如何提高生活質(zhì)量了，營養(yǎng)的實物，疾病的預防也越來越受到關(guān)注。因為食用菌安全又營養(yǎng)，在疾病預防方面也有功效，所以它符合當下發(fā)展的一個健康理念，也非常受歡迎。因此購買食用菌的人很多，消費量很大，具有十分大的市場潛力。

本文的試驗材料主要是長柄側(cè)耳發(fā)酵液，根據(jù)測試過程中的數(shù)據(jù)我們可以看出小白鼠在被灌胃發(fā)酵液之后，各項的指標都有不同程度的變化，比如，低劑量組的抗疲勞和抗氧化的指數(shù)就不是很明顯，但是中高劑量組的抗疲勞和抗氧化我們就可以看出來明顯差異：第一，小白鼠游泳爬桿堅持的時間更久，而且耐缺氧能力也增強了很多，其中，小白鼠

的尿素氮含量和血乳酸含量都下降，肝糖原儲存量顯著上升，MDA含量呈下降趨勢，SOD、GSH－P x活力增強。研究結(jié)果說明中高劑量組食用菌酵液對小白鼠影響更大，提高運動能力的同時，也極大地提升了耐力。本文的研究結(jié)果雖只提供了參考，但是對以后食用菌發(fā)酵液的發(fā)展有指導作用，為食用菌在保健方面的功能和作用提供了前期理論基礎(chǔ)，為它未來打開保健市場提供了參考。在后續(xù)的研究中，我們主要是考慮怎樣最大限度地讓發(fā)酵液發(fā)揮抗疲勞和抗氧化作用，然后再進行一系列試驗和分析。