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長柄側(cè)耳發(fā)酵液對小鼠肝臟組織抗氧化能力的研究*

2019-12-03 01:49:22
中國食用菌 2019年11期
關(guān)鍵詞:長柄側(cè)耳小白鼠

郭 強

(商丘學院體育學院,河南 商丘 476000)

食用菌鮮美可口,同時包含人體所需氨基酸、蛋白質(zhì)、維生素及多糖等多種營養(yǎng)成分,且不含膽固醇及淀粉,經(jīng)常食用可顯著提高人體對食物營養(yǎng)的吸收率,在抗腫瘤方面同樣具有顯著的效果,具有提高人體免疫力、降低血壓,保護肝臟組織,預防粥樣動脈硬化等多種作用[1]。

目前,市場上關(guān)于培養(yǎng)食用菌液體發(fā)酵的試驗層出不窮,工藝也越來越精湛。據(jù)相關(guān)報道,食用菌發(fā)酵后,得到的液體不僅可以抑制腫瘤活性,而且還可以美白保濕,保護人體肝臟,但抗疲勞和抗氧化能力沒有被明確提出[1]。通過食用菌液體的發(fā)酵,我們可以獲得質(zhì)量相當穩(wěn)定的發(fā)酵液,而且這種方式相對于固體培養(yǎng)有更多的優(yōu)勢。第一,可以獲得更高的產(chǎn)量。第二,液體發(fā)酵的條件沒有那么苛刻,發(fā)酵的周期不但短而且過程便于控制[2]。

本文中采用強制喂食小鼠長柄側(cè)耳發(fā)酵液,不斷反復地研究小白鼠的運動能力,耐缺氧時間,血乳酸、尿素氮、肝糖原儲存量肝糖原儲存量等指標。據(jù)研究表明,側(cè)耳屬類食用菌不管是在機體免疫力上,抗腫瘤上,還有降壓降脂方面都具有比其他食用菌較好的作用,該項目的重點是研究長柄側(cè)耳的菌種發(fā)酵對有血清中的膽固醇或者甘油三酯高于正常值的小鼠的預防作用,以及怎樣保護小白鼠的肝臟和提高小鼠抗氧化能力的,以便為長柄側(cè)耳菌種的使用發(fā)展提供科學依據(jù)[1]。為進一步研究和發(fā)揮食用菌在藥材方面的作用提供參考。

1 實驗方法

1.1 材料與方法

1.1.1 材料與試劑

長柄側(cè)耳菌株 502001(Changxingjin land ecological agriculture development Co.Ltd.);尿素氮(Produit par zhejiang aikang biotech Co.Ltd.)、Blood lactic acid試劑盒;葡萄糖、乙醇等(Hangzhou zhengshan chemical Co.Ltd.),均為分析純;400只清潔級ICR57小鼠(Jinan jinfeng experimental animal Co.Ltd),雄性,30 g~32 g,動物許可證號為SCXK2016-0001。SOD、MDA、GSH-PX測試盒。

液體培養(yǎng)基:葡萄糖2%、蛋白胨1%、酵母浸粉 1%、磷酸二氫鉀 0.05%、硫酸鎂 0.05%[3]。

1.1.2 主要用到的儀器

EKF lactatescout便攜式Blood lactic acid測定儀;TS-5型離心機;WFJ-15型超微粉碎機;電熱恒溫水浴鍋;可見分光光度計小鼠飼養(yǎng)籠;Hei-VAPA dvantage旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀;小鼠恒溫游泳池。

1.1.3 長柄側(cè)耳發(fā)酵液的制備

先于0.5 L的錐形瓶容器裝入0.3 kg的液體培養(yǎng)基,液體發(fā)酵罐的菌種量比例是1%,以30℃的溫度培養(yǎng)5 d得到液體菌種。0.5 L搖瓶裝入液體培養(yǎng)基0.3 kg,之后移入液體菌種,液體發(fā)酵罐的菌種量控制在1%,200 r·min-1、26℃培養(yǎng)5 d[4]。通過抽吸過濾發(fā)酵液體,獲得用于小鼠試驗的發(fā)酵的試發(fā)酵液。

1.2 灌胃劑量與分組

把試驗小白鼠分為4個組,各試驗每組小鼠20只分別進行食用菌發(fā)酵液的喂食,每天按照體重分別灌胃 10 mg·kg-1d-1、20 mg·kg-1d-1和 30 mg·kg-1d-1的劑量,對照組灌胃每天10 mg·kg-1蒸餾水,持續(xù)1個月。

1.3 負重游泳實驗

小白鼠最后1次灌胃0.5 h后,在小白鼠的尾巴上扣上其體重4%重量的的鉛絲,然后把它丟入試驗游泳箱中,水溫控制在30℃左右,水的高度0.3 m,然后把小白鼠完全在水面下面的游泳時間超過5 s的時間的長短記錄下來。

1.3.1 爬桿試驗

小鼠最后1次灌胃0.5 h后,進行爬桿試驗。記錄由于肌肉疲勞導致摔落的小白鼠開始和跌落之間的時間,反復試驗3次。

1.3.2 耐缺氧試驗

耐缺氧試驗需要在喂食長柄側(cè)耳發(fā)酵液0.5 h之后進行,首先在0.5 L容積的廣口瓶放入15 g的石灰,使之沉淀在瓶底,然后把小白鼠依次放入每個瓶子里,把瓶口密封起來,然后把從加蓋到小老鼠停止呼吸的時間記下來(不斷晃動廣口瓶,小鼠沒有動靜可判斷已死亡)。

1.3.3 尿素氮、肝糖原儲存量和血乳酸測定方法

小鼠最后1次灌胃0.5 h后,讓其在符合標準的游泳池中游1.5 h之后,去除血清并分離血清,測尿素氮的含量,取0.2 g的肝組織測肝糖原的儲存量,在眼球取血,測血乳酸含量。

1.3.4 抗氧化指標測定

小鼠最后1次灌胃0.5 h后,在小白鼠的尾巴上扣上它體重10%重量的的鉛絲,讓它在試驗游泳箱中游泳,使其精疲力竭之后(以頭部在水中10 s沒有浮出水面為標準),取其肝組織測SOD、GSH-Px的活力和MDA的水平。

2 試驗結(jié)果

2.1 長柄側(cè)耳發(fā)酵液在抗疲勞方面的作用

長柄側(cè)耳酵液對小鼠負重游泳、爬桿和耐缺氧時間的影響見表1。

表1 長柄側(cè)耳發(fā)酵液對小鼠負重游泳、爬桿和耐缺氧時間的影響Tab.1 Effects of Plearotas spodoleucas fermentation liquid on swimming,climbing and anoxia tolerance time

從表1的數(shù)據(jù)對比對照組H2O 10 mg·kg-1d-1,低劑量組 10 mg·kg-1d-1、中劑量組 20 mg·kg-1d-1;高劑量組30 mg·kg-1d-1食用菌酵液灌胃之后,小白鼠的運動時間變長久了,比如游泳或者爬桿的時候,另外,耐缺氧的時間也變長,它表明食用菌酵液對小鼠運動耐力的增強,也說明食用菌發(fā)酵液在抗疲勞方面,功能非常強大。

2.2 小鼠指標在灌胃發(fā)酵液之后的變化

食用菌酵液對小鼠指標的影響如表2所示。

由表2可知,低劑量組(10 mg·kg-1d-1)小鼠的尿素氮、血乳酸和MDA含量都在下降,肝糖原儲存量、SOD和GSH-P x活性有所上升,但差異都不是很明顯;高劑量組(30 mg·kg-1d-1)肝糖原儲存量、SOD和GSH-P x活性相對于對照組顯著上升,尿素氮、血乳酸和MDA含量也顯著下降。說明食用菌食用菌酵液越多,小鼠抗氧化能力越強。

表2 食用菌酵液對小鼠指標的影響Tab.2 Effect of Plenrotus spodoleacas fermentation liquid on mouse indexes

3 結(jié)論

市場的現(xiàn)實需求是需要符合當下社會公眾的思想認知的,兩者密不可分。也就是說,隨著生活中人們越來越看重自己的健康,因為食用菌的營養(yǎng)豐富,對健康有大有裨益,所以食用菌的需求量會越來越大,需求量的提成,也會促進更多的食用菌方面的開發(fā)和利用。因為網(wǎng)絡讓人們了解了更多的疾病,人們也已經(jīng)不再僅僅考慮如何提高生活質(zhì)量了,營養(yǎng)的實物,疾病的預防也越來越受到關(guān)注。因為食用菌安全又營養(yǎng),在疾病預防方面也有功效,所以它符合當下發(fā)展的一個健康理念,也非常受歡迎。因此購買食用菌的人很多,消費量很大,具有十分大的市場潛力。

本文的試驗材料主要是長柄側(cè)耳發(fā)酵液,根據(jù)測試過程中的數(shù)據(jù)我們可以看出小白鼠在被灌胃發(fā)酵液之后,各項的指標都有不同程度的變化,比如,低劑量組的抗疲勞和抗氧化的指數(shù)就不是很明顯,但是中高劑量組的抗疲勞和抗氧化我們就可以看出來明顯差異:第一,小白鼠游泳爬桿堅持的時間更久,而且耐缺氧能力也增強了很多,其中,小白鼠

的尿素氮含量和血乳酸含量都下降,肝糖原儲存量顯著上升,MDA含量呈下降趨勢,SOD、GSH-P x活力增強。研究結(jié)果說明中高劑量組食用菌酵液對小白鼠影響更大,提高運動能力的同時,也極大地提升了耐力。本文的研究結(jié)果雖只提供了參考,但是對以后食用菌發(fā)酵液的發(fā)展有指導作用,為食用菌在保健方面的功能和作用提供了前期理論基礎(chǔ),為它未來打開保健市場提供了參考。在后續(xù)的研究中,我們主要是考慮怎樣最大限度地讓發(fā)酵液發(fā)揮抗疲勞和抗氧化作用,然后再進行一系列試驗和分析。

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