鄭恒光，沈恒勝，楊道富，翁敏劼，陳君琛*

（福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)工程技術(shù)研究所，福建 福州 350003）

杏鮑菇（Pleurotus eryngii）是一種集食用、藥用、食療于一體的珍稀食用菌，富含多糖等生物活性物質(zhì)[1]。近年來，隨著工廠化杏鮑菇產(chǎn)量的成倍增加，栽培副產(chǎn)物的開發(fā)利用引起廣泛重視，尤以杏鮑菇菇頭的開發(fā)利用最緊迫[2]。

杏鮑菇菇頭是杏鮑菇子實體和栽培料之間的海綿狀菌體，質(zhì)量可達子實體的20%～30%[3]，它由杏鮑菇菌體組成，其口感風(fēng)味雖然與商品菇差異不大，但由于形狀各異，且易夾帶栽培料碎屑而難以作為商品銷售，目前未得到有效利用。盡管如此，多數(shù)學(xué)者仍看好這一數(shù)量巨大的加工副產(chǎn)物資源，希望將其開發(fā)為提取杏鮑菇多糖的廉價原料[4]。目前，杏鮑菇子實體多糖的提取、純化、結(jié)構(gòu)分析以及生物活性已經(jīng)得到廣泛研究，已有研究表明，杏鮑菇多糖主要由葡萄糖單元組成，鏈接方式以β-1,3-糖苷鍵為主，具有抗氧化、抗腫瘤、增強免疫力、保肝、降血脂、抑菌、抗病毒等多種生物活性[5]。然而，目前關(guān)于杏鮑菇菇頭多糖的研究報道仍比較少，僅有研究結(jié)果表明，杏鮑菇菇頭多糖和杏鮑菇多糖相似，同樣由葡萄糖單元組成，但鏈接方式尚不清楚；此外，它同樣具有多種生物活性，具體包括：體外抑制子宮頸癌Hela細胞、抗氧化和抑菌等生物活性[6-8]。為進一步闡明杏鮑菇菇頭多糖和子實體多糖在特征營養(yǎng)成分方面的共性，本研究對杏鮑菇菇頭粗多糖的結(jié)構(gòu)特征及生物活性進行研究，以期為其在食品及醫(yī)藥領(lǐng)域的廣泛應(yīng)用提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

杏鮑菇菇頭由福建省成發(fā)農(nóng)業(yè)開發(fā)有限公司提供，經(jīng)60 ℃烘干，中藥粉碎機粉碎，再過100 目篩后備用。

牛血清白蛋白、VC、單糖及多糖標(biāo)準(zhǔn)品 美國Sigma公司；3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴鹽（3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide，MTT） 美國Amresco公司；RPMI Medium 1640培養(yǎng)基 美國GIBCO公司；胎牛血清 杭州四季青生物有限公司；MGC-803和人宮頸癌U14細胞 中國科學(xué)院上海生命科學(xué)院細胞資源中心；ICR小鼠（雄性20～22 g）（合格證號：Scxk（滬）2017-0005） 上海斯萊克實驗動物中心。

1.2 儀器與設(shè)備

DG5032型酶聯(lián)免疫檢測儀 南京華東電子集團醫(yī)療設(shè)備有限公司；HH·CP-01W型細胞培養(yǎng)箱 上海博訊實業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠；SP-756P紫外-可見分光光度計上海光譜儀器有限公司；7890N氣相色譜儀 美國安捷倫科技有限公司；GCMS-QP 2010氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀 日本島津公司；515泵系統(tǒng)凝膠滲透色譜（gel permeation chromatography，GPC）儀 美國Waters公司；RI-101示差折光指數(shù)檢測器（refractive index detector，RID）儀 日本SHOKO公司；十八角激光散射（multiangle light scattering，MALLS）儀 美國Wyatt公司。

1.3 方法

1.3.1 杏鮑菇菇頭粗多糖的制備

取100 g杏鮑菇菇頭粉，于95%乙醇溶液中室溫浸泡24 h脫脂，過濾、晾干，將濾渣分散于20 倍體積水中，100 ℃電磁爐蒸煮2 h，用紗布過濾出粗濾渣，然后5 000 r/min離心20 min棄去沉淀，收集上清液。用電磁爐煮沸，將提取液的體積濃縮至原來的1/5，冷卻后加入3 倍體積的95%乙醇溶液，過濾收集乙醇沉淀物，加少量熱水復(fù)溶后冷凍干燥[9]，得到7.8 g粗多糖，置于干燥器內(nèi)室溫保存。

1.3.2 GPC-RID-MALLS聯(lián)用法檢測粗多糖的分子質(zhì)量分布

1.3.2.1 凝膠色譜條件

Shodex SB-806 HQ凝膠柱（Φ8 mm×300 mm）；流速0.5 mL/min；流動相氯化鈉溶液＋0.02%疊氮鈉，流速0.1 mL/min；進樣量100 μL[10]。

1.3.2.2 樣品溶液制備

用流動相配制質(zhì)量濃度5 mg/L多糖樣品溶液，用0.2 μm柱頭過濾器過濾后進樣。

1.3.2.3 分子質(zhì)量分布檢測

采用RID和激光檢測器分別記錄供試品質(zhì)量濃度和供試品在不同角度的光散射強度，折光指數(shù)增加量（dn/dC）值為0.135，通過數(shù)據(jù)處理軟件ASTRA6.1獲取供試樣品的分子質(zhì)量分布圖。

1.3.3 粗多糖的單糖組成測定

采用糖精乙酸酯衍生物氣相色譜法對杏鮑菇菇頭粗多糖的單糖組成進行分析[11]。

1.3.3.1 粗多糖樣品的水解

稱取粗多糖樣品20 mg，加入4 mol/L三氟乙酸溶液5 mL，110 ℃水解2 h。水解液于50 ℃真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干，用色譜純甲醇清洗3 次，得粗多糖水解物。

1.3.3.2 粗多糖水解物的衍生反應(yīng)

在粗多糖水解物中依次加入10 mg鹽酸羥胺、1 mg內(nèi)標(biāo)肌醇和2 mL吡啶，密封，90 ℃水浴30 min后加入2 mL醋酸酐90 ℃水浴30 min，加入2 mL水終止反應(yīng)。加入2 mL二氯甲烷萃取，重復(fù)2 次，合并二氯甲烷相，加入無水硫酸鈉干燥過膜備用。

1.3.3.3 氣相色譜測定

使用HP-5石英毛細管柱（30 m×0.32 mm，0.25 μm），恒流模式，流速3 mL/min。升溫程序：初始柱溫100 ℃，保持1 min；然后以2 ℃/min升至160 ℃，保持5 min；以5 ℃/min升至180 ℃，保持3 min；再以20 ℃/min升到300 ℃，保持5 min。進樣口采用分流模式，分流比10∶1；溫度250 ℃；氮氣為載氣。氫火焰離子檢測器溫度250 ℃，氮氣、氫氣、空氣流速分別為25、30 mL/min和400 mL/min；進樣體積1 μL。單糖標(biāo)準(zhǔn)品（鼠李糖、阿拉伯糖、巖藻糖、木糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖）按照相同步驟進行實驗，并且按照相同的檢測程度，將處理后的標(biāo)準(zhǔn)品單糖進行氣相色譜分析。

1.3.4 粗多糖糖苷鍵連接方式測定[12]

1.3.4.1 粗多糖甲基化衍生反應(yīng)

粗多糖樣品20 mg，加入8 mL無水二甲基亞砜，超聲溶解10 min，快速加入200 mg NaOH粉末，超聲溶解15 min，室溫靜置30 min，加入3 mL碘甲烷，室溫避光反應(yīng)24 h，加入4.0 mL蒸餾水終止反應(yīng)。甲基化粗多糖用氯仿萃取，每次3 mL，共4 次。合并萃取液，用蒸餾水洗滌（10 mL×2），于60 ℃減壓旋干。

1.3.4.2 甲基化產(chǎn)物的水解、還原和乙酰化

旋干后粗多糖樣品加入4 mol/L三氟乙酸10 mL，100 ℃反應(yīng)2 h，水解液于60 ℃減壓旋干，再加入少量乙醇，旋干，重復(fù)3 次，烘干。水解后旋干樣品加入4 mL蒸餾水溶解，用1% NaOH溶液調(diào)節(jié)pH值至10，加入20 mg NaBH4，室溫反應(yīng)6 h，再加入冰乙酸，調(diào)節(jié)pH值至5.5，終止反應(yīng)。水解液濃縮至干后，再加入2 mL吡啶，2 mL乙酸酐，100 ℃反應(yīng)1 h，隨后加入2 mL蒸餾水終止反應(yīng)。加入2 mL二氯甲烷萃取，重復(fù)2 次，合并二氯甲烷相，加入無水硫酸鈉干燥過膜備用。

1.3.4.3 氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用分析

HP-5石英毛細管柱（30 m×0.32 mm，0.25 μm）；恒壓模式20 psi；升溫程序：柱溫度起始150 ℃，維持3 min，以10 ℃/min升到260 ℃，再維持5 min。柱流速0.6 mL/min，分流比50∶1，進樣口溫度260 ℃，離子源溫度280 ℃，進樣量1 μL。

1.3.5 粗多糖的ABTS陽離子自由基清除率測定

1.3.5.1 ABTS工作液的配制

取7.4 mmol/L 2,2’-聯(lián)氨-雙-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸（2,2’-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulphonic acid)，ABTS）和2.6 mmol/L K2S2O8各0.2 mL，混勻，在暗處放置12 h，用去離子水稀釋50 倍得到ABTS工作液[13]。

1.3.5.2 空白組吸光度A0的測定

取0.8 mL ABTS工作液，加入0.2 mL去離子水，振搖使之充分混勻，靜置6 min后，在734 nm波長處測定A0。

1.3.5.3 處理組吸光度的測定

取6 只比色皿，分別加入5 mg/mL待測樣液0.04、0.08、0.12、0.16、0.20、0.24 mL，加入去離子水使總體積為2.00 mL，再加入8.00 mL ABTS溶液，混合，靜置6 min，在734 nm波長處測定吸光度A。

1.3.5.4 ABTS陽離子自由基清除率計算

按式（1）計算ABTS陽離子自由基清除率：

式中：A0為空白組吸光度；A為樣品組吸光度。

1.3.6 粗多糖的體外抗腫瘤活性測定[14]

1.3.6.1 MGC-803細胞培養(yǎng)

將復(fù)蘇后的MGC-803細胞接入滅菌的RPMI1640培養(yǎng)基（含10%的胎牛血清和青霉素、鏈霉素各100 IU/mL），于二氧化碳培養(yǎng)箱（37 ℃、5% CO2）中培養(yǎng)。

1.3.6.2 粗多糖對MGC-803腫瘤細胞增殖的抑制率

采用MTT法檢測。取對數(shù)生長期的MGC-803細胞，經(jīng)臺盼藍染色后計數(shù)，以1×105的密度接種于96 孔板中，每孔加入細胞懸液100 μL。培養(yǎng)24 h后，空白組每孔加入100 μL滅菌后RPMI1640培養(yǎng)基溶液，而樣品組分別加入體積為100 μL不同質(zhì)量濃度的杏鮑菇粗多糖溶液，設(shè)置粗多糖溶液的質(zhì)量濃度梯度分別為25、50、100、200、400 μg/mL和800 μg/mL。粗多糖溶液與MGC-803腫瘤細胞接觸72 h后，每孔加入20 μL質(zhì)量濃度為5 mg/mL的MTT溶液，置于培養(yǎng)箱孵育4 h，1 000 r/min離心5 min后移除上清液，每孔再加入180 μL二甲基亞砜溶液，輕微振蕩96 孔板10 min，使用酶標(biāo)儀在492 nm波長處測定每孔吸光度。重復(fù)實驗3 次，按式（2）計算細胞相對生長抑制率：

式中：A0為空白組吸光度；A為樣品組吸光度。

1.3.7 粗多糖的體內(nèi)抗腫瘤活性測定[15]

1.3.7.1 荷瘤小鼠移植瘤模型的建立

取腹水瘤小鼠，在無菌操作臺內(nèi)抽取腹水，用生理鹽水稀釋成約1×107個/mL的細胞懸液，接種于小鼠右腋皮下，每只接種體積為0.2 mL。

1.3.7.2 動物分組與給藥

小鼠稱質(zhì)量，隨機分成5 組，每組10～12 只，即模型對照組（等體積生理鹽水組）、環(huán)磷酰胺（cyclophosphamide，C T X）陽性組（C T X 2 0 m g/（k g·d））、杏鮑菇粗多糖高、中、低劑量組（劑量分別為200、100 mg/（kg·d）和50 mg/（kg·d））。均灌胃給藥，小鼠預(yù)先給藥3 d，小鼠接種腫瘤后，繼續(xù)給藥，陽性組在接種腫瘤后第1、3、5天分別灌胃CTX一次，給藥組灌胃不同質(zhì)量濃度的藥物，模型對照組和陽性對照組灌胃等體積的生理鹽水。模型組給予等體積生理鹽水，連續(xù)給藥12 d。

1.3.7.3 樣本采集

末次給藥后24 h，頸椎脫臼處死各組小鼠，解剖，剝離瘤塊，稱體質(zhì)量、瘤質(zhì)量，抑瘤率按式（3）計算：

式中：A0為模型對照組吸光度；A為處理組吸光度。

1.4 數(shù)據(jù)處理

采用SPSS 17.0軟件進行統(tǒng)計學(xué)分析。組間采用配對樣本t檢驗，P＜0.05，差異顯著；P＜0.01，差異極顯著。圖表繪制采用Microsoft Office Excel 2007軟件。數(shù)據(jù)以表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 杏鮑菇菇頭粗多糖的分子質(zhì)量分布分析

圖1 杏鮑菇菇頭粗多糖樣品的分子質(zhì)量分布Fig. 1 Molecular distribution pro file of crude polysaccharide extracted from the stalk residue of P. eryngii

表1 分子質(zhì)量與均方回轉(zhuǎn)半徑Table 1 Molecular masses and mean square radii of four polysaccharide fractions

如圖1、表1所示，杏鮑菇菇頭粗多糖的分子質(zhì)量分布范圍寬泛，最高達到千萬道爾頓級別，主要由3.816×107、2.010×106、4.572×105Da以及1.849×105Da 4 個峰組成，其中，高分子質(zhì)量（1號峰）和低分子質(zhì)量（4號峰）所占比重較大。聚合物分散指數(shù)表明，1號峰和4號峰的粒徑均一度高于2號峰和3號峰，均方回轉(zhuǎn)半徑隨著分子質(zhì)量增大而縮小。聚合物的均方回轉(zhuǎn)半徑通常取決于分子質(zhì)量和支化度2 個關(guān)鍵因素[16]，這表明，杏鮑菇菇頭粗多糖中，大分子質(zhì)量組分比小分子質(zhì)量組分的支化度小。

2.2 杏鮑菇菇頭粗多糖的單糖組成分析

圖2 混合標(biāo)準(zhǔn)品（A）和杏鮑菇菇頭粗多糖樣品（B）的單糖組成氣相色譜圖Fig. 2 Gas chromatograms for mixed monosaccharide standards (A)and composition analysis of the crude polysaccharide extracted from the stalk residue of P. eryngii (B)

如圖2所示，各單糖出峰時間依次為7.20、8.41、8.68、8.88、14.91、15.25、15.92 min和18.94 min。各標(biāo)準(zhǔn)單糖出峰分離度較好，無干擾現(xiàn)象，可作為多糖組成進一步分析的依據(jù)。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品與樣品的保留時間確定單糖種類，由各峰面積比計算其物質(zhì)的量比。如圖3所示，杏鮑菇菇頭粗多糖中，5 種單糖殘基的物質(zhì)的量比為阿拉伯糖∶巖藻糖∶甘露糖∶葡萄糖∶半乳糖=2.06∶0.24∶1∶17.60∶0.37。其中，葡萄糖的物質(zhì)的量比最大，其質(zhì)量百分比大約占84.4%。另外，由于實驗條件及材料限制，還有7.0～7.5、9、14.5～15 min等個峰未能確定。

2.3 杏鮑菇菇頭粗多糖的糖苷鍵連接方式分析

由表2可知，杏鮑菇菇頭粗多糖的糖苷鍵鏈接主要方式有1,3-葡萄糖（占42.7%）和1,6-葡萄糖（占35.5%）。該分析結(jié)果也印證了單糖組成分析結(jié)論，即：該粗多糖主要由葡萄糖組成，其他種類單糖在粗多糖分子結(jié)構(gòu)中所占比例不大。

表2 杏鮑菇菇頭粗多糖的甲基化Table 2 Methylation analysis of crude polysaccharide extracted from the stalk residue of P. eryngii

2.4 杏鮑菇菇頭粗多糖對ABTS陽離子自由基清除效果

圖3 杏鮑菇菇頭粗多糖對ABTS陽離子自由基的清除率Fig. 3 Scavenging activity against ABTS radical cation of crude polysaccharide extracted from the stalk residue of P. eryngii

從圖3可以看出，陽性對照VC在0～3 mg/mL質(zhì)量濃度范圍內(nèi)呈劑量依賴關(guān)系，對ABTS陽離子自由基清除率增加迅速，質(zhì)量濃度為3 mg/mL時的清除率約為85.0%；質(zhì)量濃度超過3 mg/mL后，清除率趨于穩(wěn)定，維持在90%左右。雖然杏鮑菇菇頭粗多糖對ABTS陽離子自由基的清除率低于VC。但在0～5 mg/mL質(zhì)量濃度范圍內(nèi)，隨著質(zhì)量濃度的增加，杏鮑菇菇頭粗多糖對ABTS陽離子自由基清除率呈逐漸上升趨勢；質(zhì)量濃度為5 mg/mL時的清除率可達到70.9%。

2.5 杏鮑菇菇頭粗多糖的體外抗腫瘤活性分析

表3 杏鮑菇菇頭粗多糖質(zhì)量濃度對人胃癌MGC-803細胞的抑制作用（n=10）Table 3 Inhibitory effects of different concentrations of crude polysaccharide extracted from the stalk residue of P. eryngii on proliferation of human gastric cancer MGC-803 cells (n= 10)

如表3所示，2～4組與1組的吸光度相比，有顯著差異（P＜0.05）；5、6組與1組的吸光度相比，有極顯著差異（P＜0.01）。結(jié)果表明，杏鮑菇菇頭粗多糖在低質(zhì)量濃度下（0.01 mg/mL）即可顯著抑制人胃癌MGC-803細胞的生長，當(dāng)質(zhì)量濃度大于0.5 mg/mL后，可達到極顯著的抑制效果，說明該抑制作用基本呈劑量依賴關(guān)系。

2.6 杏鮑菇菇頭粗多糖的體內(nèi)抗腫瘤活性分析

表4 杏鮑菇菇頭粗多糖對U14荷瘤小鼠體質(zhì)量和腫瘤質(zhì)量的影響（n=10）Table 4 Effects of crude polysaccharide extracted from the stalk residue of P. eryngiion body and tumor massof U14 tumor-bearing mice (n= 10)

如表4所示，杏鮑菇菇頭粗多糖的低、中、高各劑量組對U14荷瘤小鼠的抑瘤率分別達到了12.21%，30.78%和39.84%，存在明顯的劑量-效應(yīng)關(guān)系。中、高劑量組與模型組比較具有極顯著差異（P＜0.01），而低劑量組沒有差異。初步判定，該粗多糖對荷瘤小鼠的體質(zhì)量增加無抑制作用，安全且無副作用。

3 討 論

杏鮑菇菇頭是伴隨杏鮑菇大量栽培而產(chǎn)生的非商品化廉價資源。從中提取粗多糖，是直接而有效利用這一加工副產(chǎn)物的重要方式。研究和開發(fā)杏鮑菇菇頭粗多糖的生物活性，可以提升該多糖的利用價值，增加企業(yè)效益，推動相關(guān)技術(shù)的產(chǎn)業(yè)化。然而，目前科技水平對多糖結(jié)構(gòu)的測定仍有一定困難。這主要是因為多糖的生物合成由遺傳基因間接控制，不具備蛋白質(zhì)嚴(yán)格一致的化學(xué)結(jié)構(gòu)[17]，而這種復(fù)雜易變的多糖分子結(jié)構(gòu)容易導(dǎo)致其生物活性呈現(xiàn)多樣性。對于食用菌多糖而言，其化學(xué)結(jié)構(gòu)及生物活性還容易受到菌種、栽培工藝、提取方法等多種因素的影響[18]，盡管如此，大量研究表明，在各個制備參數(shù)固定的條件下，多糖的結(jié)構(gòu)和活性相對穩(wěn)定，實驗結(jié)果仍具有一定的重復(fù)性。鑒于不同研究者在不同制備條件下得到的多糖分析結(jié)論有可能存在一定的差異，僅依據(jù)少數(shù)幾個研究還難以有效概括杏鮑菇菇頭多糖的特性，所以很有必要進行廣泛和深入的研究。

杏鮑菇菇頭多糖研究方面，國內(nèi)外相關(guān)的研究報道均較少，主要集中在杏鮑菇粗多糖的提取及抗氧化活性等研究。在結(jié)構(gòu)研究方面，Ma Gaoxing等[6]將菇頭粗多糖使用超濾法進行分級，并檢測各個組分的結(jié)構(gòu)和活性，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，菇頭粗多糖以分子質(zhì)量大于100 000 Da的組分為主，占79.12%；單糖組成均以葡萄糖為主（＞74.8%）；該結(jié)論和本研究基本一致。與前人研究比較，本研究不僅利用GPC-RID-MALLS聯(lián)用儀對菇頭粗多糖分子質(zhì)量分布進行更為精確的測定，而且還對其糖苷鍵的鏈接方式進行測定，進一步明確了該粗多糖一級結(jié)構(gòu)的構(gòu)成方式。在抗氧化性研究方面，本研究印證了前人研究結(jié)論[7]，即：杏鮑菇菇頭多糖對ABTS陽離子自由基具有較強的淬滅作用，表明該多糖具有顯著的抗氧化性。在抗腫瘤活性研究方面，Ma Gaoxing等[6]發(fā)現(xiàn)：杏鮑菇菇頭多糖組分對人肝癌細胞HepG-2的體外增殖生長具有顯著抑制作用。Yang Zengyue等[19]通過動物實驗發(fā)現(xiàn)，杏鮑菇子實體多糖組分具有體內(nèi)抑制人腎癌Renca細胞在小鼠增殖生長的生物活性。本研究進一步發(fā)現(xiàn)杏鮑菇菇頭粗多糖在體外對人胃癌MGC-803細胞以及體內(nèi)對人宮頸癌U14細胞具有顯著的抑制作用，對已有研究結(jié)果進行了印證和補充。

盡管目前有大量的研究表明：食用菌多糖具有抗氧化以及抗腫瘤等多種生物活性，但仍需進一步驗證。以多糖的抗氧化活性為例，由于目前的抗氧化評價體系不完善，檢測方法包括1,1-二苯基-2-三硝基苯肼、ABTS、還原力、金屬螯合能力、羥自由基、超氧離子自由基等數(shù)十種[20]。這些檢測方法基于各自的抗氧化體系和機理，尚無法統(tǒng)一為單一的檢測方法[21-22]。因此，不同物質(zhì)的抗氧化性只能在同一種檢測方法下比較強弱，不同檢測方法間則無法比較[23]。同時，多糖的體外抗氧化性也存在爭議，有學(xué)者認(rèn)為，單純的多糖沒有抗氧化性，粗多糖的體外氧化性主要是由其分子內(nèi)部夾帶的蛋白質(zhì)、多酚、半乳糖醛酸等非糖組分決定的[24-25]。與多糖體外抗氧化活性廣受爭議相比，多糖的體內(nèi)抗氧化活性似乎具有更強的說服力。多糖的抗氧化體內(nèi)實驗是通過測定小鼠心、肝、脾、腎組織和全血的脂質(zhì)過氧化物含量、谷胱甘肽過氧化物酶及超氧化物歧化酶的活性，反映多糖對機體各組織及全血抗氧化能力的影響[26]。因此，多糖的抗氧化研究應(yīng)盡量選擇體內(nèi)抗氧化活性檢測方法，以免體外抗氧化活性因自身檢測方法不夠完善而導(dǎo)致錯誤結(jié)論[27-28]，同時更有利于功能性食用菌多糖在食品和藥品中的實際應(yīng)用。此外，多糖的抗腫瘤活性檢測目前大多采用體外檢測方法，該方法具有方便篩查、費用低等諸多優(yōu)點[29]，同時適用于難以進行動物造模實驗的腫瘤細胞的檢測。但實際檢測中發(fā)現(xiàn)，在進行多糖體外抗腫瘤實驗時，由于在檢測波長下容易受到多糖顏色深和溶解度差的干擾，將導(dǎo)致吸光度檢測結(jié)果不準(zhǔn)確，可能會產(chǎn)生假陽性或假陰性的結(jié)果。此外，體外實驗還未考慮藥物在動物體內(nèi)消化吸收和代謝等復(fù)雜影響因素。因此，在條件允許情況下，同時開展體內(nèi)抗腫瘤實驗，便于印證其抗腫瘤活性[30-31]。當(dāng)然，杏鮑菇菇頭多糖的生物活性最終仍需通過人體臨床實驗進行驗證。

4 結(jié) 論

杏鮑菇菇頭粗多糖的結(jié)構(gòu)特征：主要由葡萄糖組成（占84.4%），其分子質(zhì)量分布較廣且由4 個峰組成（3.816×107、2.010×106、4.572×105Da和1.849×105Da），糖苷鍵主要鏈接方式為1,3-糖苷鍵（占42.7%）和1,6-糖苷鍵（占35.5%）。生物活性研究表明該粗多糖具有一定的抗氧化和抗腫瘤活性。