黃少瓊

摘 要：目的：比較Baird-Parker平板計(jì)數(shù)法和MPN計(jì)數(shù)法檢測(cè)食品中金黃色葡萄球菌的結(jié)果，比較兩種實(shí)驗(yàn)方法的優(yōu)劣。方法：隨機(jī)采集90份食品作為實(shí)驗(yàn)樣品，分為實(shí)驗(yàn)組（食品25g+生理鹽水225ml+1ml金黃色葡萄球菌菌液）、陽(yáng)性對(duì)照組（250ml生理鹽水+1ml金黃色葡萄球菌菌液）和樣品對(duì)照組（食品25g+1ml金黃色葡萄球菌菌液）各30份，應(yīng)用Baird-Parker平板計(jì)數(shù)法和MPN計(jì)數(shù)法進(jìn)行定量計(jì)數(shù)，統(tǒng)計(jì)金黃色葡萄球菌的陽(yáng)性檢出結(jié)果。結(jié)果：相比之下，MPN計(jì)數(shù)法對(duì)于金黃色葡萄球菌的陽(yáng)性檢出率（35.56%>12.22%）相對(duì)更高（P<0.05）。結(jié)論：在食品中金黃色葡萄球菌的實(shí)驗(yàn)檢測(cè)中，MPN計(jì)數(shù)法顯然是更好的選擇，可以獲得更加準(zhǔn)確的檢測(cè)結(jié)果，可作為食品質(zhì)量安全評(píng)價(jià)的重要參考。

關(guān)鍵詞：食品；金黃色葡萄球菌；檢測(cè)；實(shí)驗(yàn)方法

飲食是人們?nèi)粘Ｉ钪械闹匾顒?dòng)，是攝入營(yíng)養(yǎng)和能量的主要途徑，維持人體健康活動(dòng)。飲食安全則關(guān)系到人們的身體健康，與相關(guān)疾病的發(fā)生有著密切的聯(lián)系，應(yīng)當(dāng)引起足夠的重視。人們?cè)陲嬍车倪^(guò)程中，食品受到金黃色葡萄球菌等大腸桿菌以及沙門(mén)氏菌多種致病菌的污染，則會(huì)增加食物中毒的風(fēng)險(xiǎn)，誘發(fā)食源性疾病。在食品生產(chǎn)加工的過(guò)程中，致病菌檢驗(yàn)是十分重要的環(huán)節(jié)，對(duì)于各類(lèi)致病菌有著嚴(yán)格的限量標(biāo)準(zhǔn)。在食品安全檢驗(yàn)的，需要采用高效、靈敏、準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)方法，其實(shí)驗(yàn)結(jié)果能夠作為食品安全質(zhì)量評(píng)價(jià)的重要參考依據(jù)[1]。本研究主要對(duì)食品中的金黃色葡萄球菌進(jìn)行實(shí)驗(yàn)檢測(cè)，比較不同實(shí)驗(yàn)方法的檢測(cè)結(jié)果，現(xiàn)報(bào)告如下。

1材料與方法

1.1材料

實(shí)驗(yàn)樣品：隨機(jī)采集90份食品作為實(shí)驗(yàn)樣品，其中包括餅干18份、罐頭15份、膨化食品12份、肉制品18份、乳制品15份以及方便食品12份。培養(yǎng)基：由青島海博生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)的Baird-Parker平板、瓊脂、凍干兔血漿、氯化鈉胰酪胨大豆肉湯管（10%），營(yíng)養(yǎng)肉湯等。試劑：亞碲酸鉀卵黃增菌液（廣東環(huán)凱微生物科技有限公司）。菌株：金黃色葡萄球菌標(biāo)準(zhǔn)菌株（ATCC29213，南京便診生物科技有限公司）。應(yīng)用以上樣品、培養(yǎng)基、試劑和菌株作為實(shí)驗(yàn)材料，進(jìn)行食品中金黃色葡萄球菌的實(shí)驗(yàn)檢測(cè)。

1.2方法

1.2.1樣品制備

將實(shí)驗(yàn)樣品分為三組：實(shí)驗(yàn)組、陽(yáng)性對(duì)照組和樣品對(duì)照組各30份。在實(shí)驗(yàn)組的菌液制備的過(guò)程中，在瓊脂培養(yǎng)基上培養(yǎng)金黃色葡萄球菌，取新鮮培養(yǎng)物，與3ml營(yíng)養(yǎng)肉湯混合，制成肉湯菌懸液，并在4℃的環(huán)境下保存。在實(shí)驗(yàn)前進(jìn)行稀釋?zhuān)?jīng)過(guò)預(yù)試驗(yàn)檢測(cè)后，選取所需的菌液濃度（10-5稀釋濃度）。在樣品制備的過(guò)程中，在無(wú)菌均質(zhì)袋加入食品25g（液體樣品25ml）、生理鹽水225ml以及1ml金黃色葡萄球菌菌液（10-5濃度），獲得實(shí)驗(yàn)樣品。

在陽(yáng)性對(duì)照組的樣品制備中，將250ml生理鹽水與1ml金黃色葡萄球菌菌液（10-5濃度）混合。而在樣品對(duì)照組的樣品制備中，則是在無(wú)菌均質(zhì)袋加入食品25g（液體樣品25ml）、生理鹽水225ml，均勻混合。

1.2.2定量檢測(cè)

取實(shí)驗(yàn)組、陽(yáng)性對(duì)照組和樣品對(duì)照組的樣品勻液1ml，接種于Baird-Parker平板之上，在37℃ 的條件下進(jìn)行培養(yǎng)，48h后對(duì)菌落進(jìn)行觀察，行革蘭氏染色。完成血漿凝固酶驗(yàn)證后，對(duì)金黃色葡萄球菌進(jìn)行計(jì)數(shù)，獲得計(jì)算結(jié)果。另外取樣液1ml，分別接種在3個(gè)氯化鈉胰酪胨大豆肉湯管（10%），在37℃ 的條件下進(jìn)行培養(yǎng)，48h后各取一環(huán)培養(yǎng)物， 在Baird-Parker平板上培養(yǎng) （37℃，48h），對(duì)菌落進(jìn)行觀察，行革蘭氏染色。完成血漿凝固酶驗(yàn)證后，采用MPN計(jì)數(shù)方法，對(duì)金黃色葡萄球菌進(jìn)行計(jì)數(shù)，計(jì)算各組實(shí)驗(yàn)樣品中金黃色葡萄球菌的陽(yáng)性檢出結(jié)果。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

以SPSS19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)的處理和分析，應(yīng)用（ ±s）和（%）進(jìn)行計(jì)量和計(jì)數(shù)，由t值和χ2檢驗(yàn)，P<0.05代表對(duì)比具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

根據(jù)Baird-Parker計(jì)數(shù)，在90份樣品中，檢出金黃色葡萄球菌陽(yáng)性11份，陽(yáng)性率為12.22%。而根據(jù)MPN計(jì)數(shù)，在90份樣品中，檢出金黃色葡萄球菌陽(yáng)性32份，陽(yáng)性率為35.56%，具體見(jiàn)于表1：

3討論

金黃色葡萄球菌屬于革蘭氏陽(yáng)性菌，是一種常見(jiàn)的致病菌種。人體受到金黃色葡萄球菌的侵襲，容易引起呼吸道和肺部感染、胃腸道疾病以及全身感染性疾病，對(duì)患者的身體健康造成損害。金黃色葡萄球菌廣泛存在于自然界，而飲食是該病菌侵襲人體的主要途徑。在人們的日常飲食中，由于食品中存在金黃色葡萄球菌，容易引發(fā)食物中毒，同時(shí)還會(huì)引起多種病癥。為了預(yù)防“ 病從口入”，需要加強(qiáng)對(duì)食品質(zhì)量安全的檢查， 對(duì)于食品中存在的金黃色葡萄球菌有著嚴(yán)格的限量要求。在食品的生產(chǎn)加工環(huán)節(jié)，需要嚴(yán)格把控，并需要進(jìn)行微生物檢驗(yàn)，實(shí)施定量檢測(cè)方法，根據(jù)金黃色葡萄球菌的檢出結(jié)果，評(píng)價(jià)食品質(zhì)量安全[2]。

在金黃色葡萄球菌的實(shí)驗(yàn)檢測(cè)中，一般采用Baird-Parker平板計(jì)數(shù)法和MPN計(jì)數(shù)法。本組實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，在90份食品中金黃色葡萄球菌的定量檢測(cè)中，MPN計(jì)數(shù)法對(duì)于金黃色葡萄球菌的陽(yáng)性檢出率為35.56%，顯著高于Baird-Parker平板計(jì)數(shù)法的12.22%，充分說(shuō)明MPN計(jì)數(shù)法是比Baird-Parker平板計(jì)數(shù)法更好的實(shí)驗(yàn)檢測(cè)方法。

在實(shí)驗(yàn)檢測(cè)中應(yīng)用Baird-Parker平板計(jì)數(shù)法，在Baird-Parker平板上接種培養(yǎng)，統(tǒng)計(jì)金黃色葡萄球菌數(shù)量。但是該實(shí)驗(yàn)過(guò)程易受到其他菌種的干擾，導(dǎo)致檢出率的降低。在食品的微生物檢測(cè)中，金黃色葡萄球菌只是致病菌的一種，還大量存在著其他菌種，金黃色葡萄球菌在其中的含量不高，這在一定程度上影響到了Baird-Parker平板計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性。而MPN計(jì)數(shù)法在實(shí)驗(yàn)檢測(cè)中的應(yīng)用，則是利用氯化鈉胰酪胨大豆肉湯進(jìn)行增菌處理，然后在Baird-Parker平板上接種培養(yǎng)，能夠減少其他菌種的干擾，獲得準(zhǔn)確的檢測(cè)結(jié)果，其對(duì)于金黃色葡萄球菌的陽(yáng)性檢出率更高。另外，受到實(shí)驗(yàn)樣品理化性質(zhì)、細(xì)菌依附等因素的影響，MPN計(jì)數(shù)法的檢測(cè)結(jié)果也會(huì)受到一定的干擾和影響。為了提高食品中金黃色葡萄球菌檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性，可聯(lián)合應(yīng)用Baird-Parker平板計(jì)數(shù)法和MPN計(jì)數(shù)法，充分發(fā)揮兩種實(shí)驗(yàn)方法的優(yōu)勢(shì)，滿(mǎn)足不同條件的下金黃色葡萄球菌定量檢測(cè)[3]。

綜上所述，Baird-Parker平板計(jì)數(shù)法、MPN計(jì)數(shù)法等不同實(shí)驗(yàn)方法均可應(yīng)用于食品中金黃色葡萄球菌的檢測(cè)，其中MPN計(jì)數(shù)法的應(yīng)用效果更高，能夠準(zhǔn)確檢出金黃色葡萄球菌的分布情況，便于采取有效的控制措施，為食品質(zhì)量安全管理提供了重要支持。

參考文獻(xiàn)：

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