◆作者：黃志毅 李志華 龔紅 孫鳳剛 鄒勝龍

◆單位：廣東蔚萊生物科技有限公司

為了行業(yè)的健康發(fā)展和食品安全，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部發(fā)布了第194 號(hào)公告，這標(biāo)志著促生長(zhǎng)抗生素在2020 年7 月1 日后全部退出市場(chǎng)。植物甾醇作為天然活性物質(zhì)，生物學(xué)功能十分廣泛和強(qiáng)大，因其具有消炎殺菌的作用在禁抗的大環(huán)境下備受關(guān)注。在2008 年進(jìn)入飼料添加劑目錄，至今應(yīng)用已有11 年了，在AA 肉雞上已有研究報(bào)道，但是對(duì)清遠(yuǎn)麻雞的試驗(yàn)研究卻鮮有報(bào)道。本試驗(yàn)旨在研究在飼糧中添加植物甾醇對(duì)清遠(yuǎn)麻雞生長(zhǎng)性能和血清生化指標(biāo)的影響，以探討植物甾醇在清遠(yuǎn)麻雞飼糧中的合理利用，豐富植物甾醇在不同品種肉雞應(yīng)用的試驗(yàn)素材。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物及分組

試驗(yàn)選用1200 只優(yōu)質(zhì)清遠(yuǎn)麻雞隨機(jī)分為4 組，每組3 個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)100 只雞。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)飼料，其余三個(gè)試驗(yàn)組分別在基礎(chǔ)飼料中添加100、200、300g/t 植物甾醇(5%含量)，飼養(yǎng)周期120 天。

試驗(yàn)分三個(gè)階段，每個(gè)階段的基礎(chǔ)飼料組成與營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。

1.2 試驗(yàn)時(shí)間

2019 年4 月30 日-2019 年8 月27 日，為期120 天。

1.3 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)期間雞舍保持通風(fēng)、清潔，定期做好清洗和消毒，免疫程序按雞場(chǎng)常規(guī)程序進(jìn)行。試驗(yàn)過(guò)程中采取分欄飼養(yǎng)，自由采食，保證水源充足，每天定時(shí)巡視，觀察麻雞采食情況，試驗(yàn)過(guò)程中若發(fā)現(xiàn)死雞或病雞淘汰時(shí)，稱取淘汰雞重量，并結(jié)算飼料消耗量。觀察肉雞健康狀況和糞便情況，做好詳細(xì)記錄。

1.4 樣品采集

試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，每個(gè)重復(fù)取2只雞，頸動(dòng)脈采血。取1mL 放入加有抗凝劑的試管中，用于血常規(guī)指標(biāo)的測(cè)定。另外再取5mL 放入離心管，靜置30min 后，3000 r/min 離心10 min 分離血清, 液氮速凍,-20 ℃冰箱保存，用于血清生化指標(biāo)和抗氧化指標(biāo)的測(cè)定。

1.5 測(cè)定指標(biāo)及方法

1.5.1 生長(zhǎng)性能的測(cè)定

以重復(fù)為單位，在試驗(yàn)開(kāi)始前和結(jié)束時(shí)，對(duì)各重復(fù)組麻雞進(jìn)行空腹稱重，記錄各欄的投料量和剩料量，計(jì)算平均日增重、平均日采食量和料肉比。同時(shí)統(tǒng)計(jì)死淘雞只數(shù)，計(jì)算成活率。

平均日增重（ADG）=（平均末重-平均初重）/試驗(yàn)天數(shù)

平均日采食量（ADFI）=（總耗料量-死淘雞耗料量）/（試驗(yàn)天數(shù)×雞只數(shù)）

料肉比=100%×平均日采食量/平均日增重

出欄率=100%×出欄雞數(shù)量/雞只總數(shù)

1.5.2 血常規(guī)的測(cè)定

測(cè)定全血中白細(xì)胞數(shù)目、紅細(xì)胞數(shù)目和血紅蛋白含量，采用邁瑞獸用全自動(dòng)血液細(xì)胞分析儀進(jìn)行測(cè)定。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及部分營(yíng)養(yǎng)水平（%）

1.5.3 血脂含量的測(cè)定

采用試劑盒測(cè)定甘油三酯（TG）、總膽固醇（TC）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）和高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）。測(cè)定方法按照北京北化康泰臨床試劑有限公司試劑盒使用說(shuō)明。

1.5.4 血清抗氧化指標(biāo)的測(cè)定

試劑盒法測(cè)定超氧化物歧化酶活性（SOD）、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GSH-Px）活性和丙二醛（MDA）含量。測(cè)定方法按照南京建成生物工程研究所試劑盒使用說(shuō)明。

1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

試驗(yàn)數(shù)據(jù)經(jīng)Excel 初步統(tǒng)計(jì)，采用SPSS17.0 軟件進(jìn)行方差分析，用Duncan 法進(jìn)行多重比較。以P＜0.05 作為差異顯著性判斷標(biāo)準(zhǔn)，結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 植物甾醇對(duì)清遠(yuǎn)麻雞生長(zhǎng)性能的影響

植物甾醇對(duì)清遠(yuǎn)麻雞生長(zhǎng)性能的影響見(jiàn)表2。由表2 所示，在清遠(yuǎn)麻雞基礎(chǔ)飼料中添加100、200 和300 g/t 植物甾醇增加了清遠(yuǎn)麻雞的末重和平均日增重，其中添加200 g/t 植物甾醇組的末重和平均日增重顯著高于對(duì)照組（P＜0.05），添加100、200 和300 g/t 植物甾醇組清遠(yuǎn)麻雞的平均日采食量和出欄率均高于對(duì)照組，其料肉比也低于對(duì)照組，但差異不顯著（P＞0.05），其中添加200 g/t 植物甾醇組的平均日采食量和出欄率最高，且料肉比最低。

2.2 植物甾醇對(duì)清遠(yuǎn)麻雞血常規(guī)指標(biāo)的影響

植物甾醇對(duì)清遠(yuǎn)麻雞血常規(guī)指標(biāo)的影響見(jiàn)表3。由表3 所示，在清遠(yuǎn)麻雞基礎(chǔ)飼料中添加100、200 和300 g/t 植物甾醇對(duì)血液中白細(xì)胞和紅細(xì)胞數(shù)目以及血紅蛋白含量無(wú)顯著性影響（P＞0.05）。

2.3 植物甾醇對(duì)清遠(yuǎn)麻雞血脂含量的影響

植物甾醇對(duì)清遠(yuǎn)麻雞血脂含量的影響見(jiàn)表4。由表4 所示，在清遠(yuǎn)麻雞基礎(chǔ)飼料中添加100、200 和300 g/t 植物甾醇降低了清遠(yuǎn)麻雞血清中甘油三酯（TG）含量、總膽固醇（TC）含量以及低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）含量，提高了血清中高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）含量，其中添加200 g/t 植物甾醇組的甘油三酯（TG）含量顯著低于對(duì)照組（P＜0.05），且高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）含量顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）；添加200 和300 g/t 植物甾醇組的清遠(yuǎn)麻雞血清中低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）含量均顯著低于對(duì)照組（P＜0.05）。

2.4 植物甾醇對(duì)清遠(yuǎn)麻雞血清抗氧化指標(biāo)的影響

植物甾醇對(duì)清遠(yuǎn)麻雞血清抗氧化指標(biāo)的影響見(jiàn)表5。由表5 所示，在清遠(yuǎn)麻雞基礎(chǔ)飼料中添加100、200 和300 g/t 植物甾醇，提高了清遠(yuǎn)麻雞血清中超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽過(guò)氧化物酶GSH-Px 的活性，且丙二醛（MDA）含量均低于對(duì)照組，差異不顯著（P＞0.05）。

表2 植物甾醇對(duì)清遠(yuǎn)麻雞生長(zhǎng)性能的影響

表3 植物甾醇對(duì)清遠(yuǎn)麻雞血常規(guī)指標(biāo)的影響

表4 植物甾醇對(duì)清遠(yuǎn)麻雞血脂含量的影響（單位：mmol/L）

表5 植物甾醇對(duì)清遠(yuǎn)麻雞血清抗氧化指標(biāo)的影響

3 討論

3.1 植物甾醇對(duì)清遠(yuǎn)麻雞生長(zhǎng)性能的影響

研究表明，植物甾醇在水溶的狀態(tài)下，能與生長(zhǎng)激素、核糖核蛋白體三者形成復(fù)合體，這種復(fù)合體的結(jié)構(gòu)相對(duì)于單獨(dú)存在的生長(zhǎng)激素更穩(wěn)定，從而延長(zhǎng)生長(zhǎng)激素作用的時(shí)間，從而促進(jìn)動(dòng)物的生長(zhǎng)。朱麗娜等（2016）在優(yōu)質(zhì)黃雞飼料中添加30mg/kg 和60mg/kg 植物甾醇均表現(xiàn)出提高生長(zhǎng)性能的趨勢(shì)，試驗(yàn)組平均末重較對(duì)照組提高40～50g，但差異不顯著。姬紅波等（2017）研究表明，在AA 肉雞基礎(chǔ)飼料中添加10、20、40mg/kg 植物甾醇，AA 肉雞的平均日增重均有改善，其中20mg/kg 處理組平均日增重較對(duì)照組提高5.92%，死淘率也均有所改善。本試驗(yàn)研究結(jié)果顯示，在清遠(yuǎn)麻雞基礎(chǔ)飼料中添加100、200 和300 g/t 植 物 甾 醇（5%含量）均增加了清遠(yuǎn)麻雞的末重和平均日增重，200 g/t 添加組顯著高于對(duì)照組。與前人研究結(jié)果基本一致。

3.2 植物甾醇對(duì)清遠(yuǎn)麻雞血清生化指標(biāo)的影響

紅細(xì)胞和白細(xì)胞是機(jī)體重要的血細(xì)胞，血紅細(xì)胞存在于血液的紅細(xì)胞中，能轉(zhuǎn)運(yùn)氧氣，也能與二氧化碳結(jié)合，維持血液的酸堿平衡。王黎文等（2014）研究結(jié)果表明，在AA 肉雞飼糧中添加植物甾醇不影響血液中血紅蛋白含量和紅細(xì)胞壓積。本研究表明，在清遠(yuǎn)麻雞基礎(chǔ)飼料中添加植物甾醇對(duì)血液中白細(xì)胞和紅細(xì)胞數(shù)目以及血紅蛋白含量無(wú)顯著性影響，與王黎文等研究結(jié)果一致。

大量研究表明，植物甾醇能降低血液中的總膽固醇和低密度脂蛋白的含量。植物甾醇通過(guò)干擾腸道膽固醇的吸收，影響膽固醇在上皮細(xì)胞中的酯化速度，從而降低機(jī)體膽固醇和低密度脂蛋白水平。姬紅波等（2017）研究表明，在AA 肉雞中添加植物甾醇克降低血清中 TC 和LDL-C 的水平，但對(duì)HDL-C 和TG 的含量沒(méi)有影響。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，在清遠(yuǎn)麻雞飼料中添加200 和300 g/t 植物甾醇顯著降低了清遠(yuǎn)麻雞血清中LDL-C 含量，200g/t 添加組血清中TG 含量顯著降低，HDL-C 顯著升高，總膽固醇TC 含量沒(méi)有顯著性差異。賈代漢等（2007）在AA 肉雞中添加20mg/kg 植物甾醇，總膽固醇TC 含量顯著低于對(duì)照組，LDL-C 極顯著低于對(duì)照組，高密度脂蛋白HDL-C 有提高的趨勢(shì)，甘油三酯水平隨著添加量先降低后升高，與本試驗(yàn)結(jié)果類似。這可能與植物甾醇在細(xì)胞內(nèi)ACAT 酶（膽固醇酰基轉(zhuǎn)移酶）的作用下被酯化，然后再M(fèi)TP（甘油三酯轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白）的作用下與甘油三酯、載脂蛋白形成乳糜，分泌進(jìn)入血液循環(huán)系統(tǒng)，促進(jìn)脂質(zhì)代謝有關(guān)（黃志毅等，2018）。

機(jī)體在正常代謝過(guò)程中不斷產(chǎn)生活性氧自由基，常常會(huì)導(dǎo)致動(dòng)物生產(chǎn)性能下降和畜產(chǎn)品品質(zhì)下降，甚至產(chǎn)生疾病，但細(xì)胞內(nèi)同時(shí)存在著抗氧化的防御體系。超氧化物歧化酶SOD 和谷胱甘肽過(guò)氧化物酶GSH-Px是機(jī)體內(nèi)重要的抗氧化酶，能清除機(jī)體內(nèi)的氧自由基，丙二醛MDA 是脂質(zhì)過(guò)氧化物的最終產(chǎn)物，因此SOD、GSH-Px 活性及丙二醛含量能間接反映機(jī)體的抗氧化能力。賈代漢等（2007）研究證實(shí)，在日糧中添加80mg/kg 植物甾醇能顯著提高前期和后期肉雞血清T-SOD 活性，GSH-Px活性亦有提高趨勢(shì)。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，在清遠(yuǎn)麻雞基礎(chǔ)飼料中添加100、200 和300 g/t 植物甾醇，提高了清遠(yuǎn)麻雞血清中超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽過(guò)氧化物酶GSH-PX 的活性，且丙二醛（MDA）含量均低于對(duì)照組，與有關(guān)報(bào)道一致，SOD 催化超氧陰離子自由基歧化為過(guò)氧化氫和氧，從而達(dá)到消除超氧陰離子自由基的目的，GSH-Px 特異的催化還原型GSH 對(duì)H202的還原反應(yīng)，減輕有機(jī)過(guò)氧化物對(duì)機(jī)體的損傷，因此，植物甾醇能提高肉雞的抗氧化酶的活性，提高肉雞的抗氧化能力。

4 結(jié)論

在清遠(yuǎn)麻雞基礎(chǔ)飼糧中添加植物甾醇能促進(jìn)清遠(yuǎn)麻雞的生長(zhǎng)，提高雞的采食量，降低料肉比，并提高出欄率，能促進(jìn)麻雞的脂質(zhì)代謝，降低甘油三酯和膽固醇含量，提高麻雞的抗氧化能力。在本試驗(yàn)條件下，添加200 g/t 植物甾醇效果最好。

參考文獻(xiàn)：(略）