潘苑 任建敏 任茗睿

[摘要] 目的 探討初發(fā)急性白血病患者外周血中相關(guān)T淋巴細(xì)胞亞群表達(dá)情況。 方法 選取2017年2月～2019年3月于我院診治的34例初發(fā)急性白血病患者作為研究對象（試驗(yàn)組），選擇同期于我院體檢的34例健康體檢者作為對照組。檢測兩組外周血中相關(guān)T淋巴細(xì)胞亞群指標(biāo)，對兩組CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10進(jìn)行比較。 結(jié)果 試驗(yàn)組初發(fā)急性白血病患者CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平分別為（61.20±4.64）%、（30.53±3.70）%和（1.02±0.23），均明顯低于對照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;而試驗(yàn)組初發(fā)急性白血病患者CD8+水平為（44.14±3.50）%，明顯高于對照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;試驗(yàn)組初發(fā)急性白血病患者IL-2為（11.60±1.13）pg/mL、IFN-γ為（23.25±2.50）pg/mL，均明顯低于對照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。試驗(yàn)組初發(fā)急性白血病患者IL-4、IL-10分別為（41.36±3.50）pg/mL和（34.50±2.75）pg/mL，均明顯高于照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。 結(jié)論 初發(fā)急性白血病患者外周血中CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、IL-2、IFN-γ表達(dá)下降，CD8+、IL-4、IL-10表達(dá)提升。

[關(guān)鍵詞] 初發(fā)急性白血病;外周血;T淋巴細(xì)胞亞群

[中圖分類號] R733.71 ? ? ? ? ?[文獻(xiàn)標(biāo)識碼] B ? ? ? ? ?[文章編號] 1673-9701（2019）31-0116-03

Expression of T lymphocyte subsets in peripheral blood of patients with initial acute leukemia

PAN Yuan ? REN Jianmin ? REN Mingrui

Department of Clinical Laboratory， Lishui Central Hospital in Zhejiang Province， Lishui ? 323000， China

[Abstract] Objective To evaluate the expression of related T lymphocyte subsets in the peripheral blood of patients with newly diagnosed acute leukemia. Methods Thirty-four patients with initial acute leukemia treated in our hospital from February 2017 to March 2019 were selected as the experiment group and 34 healthy subjects admitted to our hospital during the same period were selected as the control group. Relevant T lymphocyte subsets in the peripheral blood of the two groups were detected. The CD3+， CD4+， CD8+， CD4+/CD8+， IL-2， IFN-γ， IL-4 and IL-10 levels were compared between the two groups. Results The CD3+， CD4+ and CD4+/CD8+ levels of the experiment group were （61.20±4.64）%， （30.53±3.70）% and （1.02±0.23）， respectively， which were all significantly lower than those of the control group， with statistically significant differences （P<0.05）. The CD8+ level of the experiment group was （44.14±3.50）%， which was significantly higher than that of the control group， with statistically significant difference （P<0.05）. The IL-2 and IFN-γ levels of the experiment group were （11.60±1.13） pg/mL and （23.25±2.50） pg/mL， which were all significantly lower than those of the control group， with statistically significant differences（P<0.05）. The IL-4 and IL-10 levels of the experiment group were （41.36±3.50） pg/mL and （34.50±2.75） pg/mL， respectively， which were all significantly higher than those of the control group， with statistically significant differences （P<0.05）. Conclusion The expression of CD3+， CD4+， CD4+/CD8+， IL-2 and IFN-γ decreases and the expression of CD8+， IL-4 and IL-10 increases in the peripheral blood of patients with initial acute leukemia.

[Key words] Initial acute leukemia; Peripheral blood; T lymphocyte subsets

急性白血病為造血干細(xì)胞出現(xiàn)惡性克隆而引發(fā)的一種疾病，屬于造血組織的惡性腫瘤，又稱為“血癌”，目前臨床尚無有效的治療方法，且在診斷、治療以及預(yù)后過程中缺乏有效的且檢測方便的指標(biāo)，因此尋找有效診治急性白血病的指標(biāo)成為臨床醫(yī)學(xué)工作者不斷探尋的課題。文獻(xiàn)報(bào)道[1-3]急性白血病患者的發(fā)病和疾病進(jìn)展與身體免疫紊亂存在嚴(yán)密相關(guān)性。于抵抗腫瘤的機(jī)體免疫反應(yīng)過程中，與體液免疫對比，細(xì)胞免疫存在更加重要的影響效果。急性白血病患者體內(nèi)外周血T淋巴細(xì)胞及NK細(xì)胞主要發(fā)揮機(jī)體細(xì)胞免疫作用，在抵抗腫瘤過程中存在重要價(jià)值[4-6]。本文將2017年2月～2019年3月我院診治的34例初發(fā)急性白血病患者納入實(shí)驗(yàn)調(diào)查研究資料，對初發(fā)急性白血病患者外周血中相關(guān)T淋巴細(xì)胞亞群指標(biāo)檢測結(jié)果進(jìn)行分析，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2017年2月～2019年3月于我院診治的34例初發(fā)急性白血病患者作為研究對象（試驗(yàn)組），選擇同期到我院體檢的34例健康體檢者作為對照組。對照組：年齡20～71歲，平均（39.62±4.63）歲;男14例，女20例。試驗(yàn)組：年齡21～70歲，平均（39.55±4.45）歲;男15例，女19例。兩組性別、年齡等一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。見表1。

表1 ? 兩組患者一般資料比較

1.2 方法

1.2.1 ELISA檢測IL-2、IL-4、IL-10以及IFN-γ水平 ?檢測外周血中白細(xì)胞介素-2（IL-2）指標(biāo)、白細(xì)胞介素-4（IL-4）指標(biāo)、白細(xì)胞介素-10（IL-10）指標(biāo)、干擾素（IFN-γ），方法：患者早晨空腹取靜脈血，離心后收集血清，-80℃保存待測。血清因子水平使用酶聯(lián)免疫吸附試劑盒（ELISA試劑盒）（Thermo，上海）進(jìn)行測定，操作方法依據(jù)說明書進(jìn)行。

1.2.2 流式細(xì)胞術(shù)檢測CD3+、CD4+、CD8+水平 ?試驗(yàn)組初發(fā)急性白血病患者和對照組健康體檢者早上維持空腹采集5 mL肘靜脈血，將2 mL肘靜脈血放進(jìn)EP管中，在4℃放置30 min，以800 rpm離心處理10 min，得到上清液，用于指標(biāo)檢測，將其余3 mL血液放進(jìn)EDTA抗凝管內(nèi)實(shí)施混合[7-8]。于2 h內(nèi)采用PBS緩沖溶液開展稀釋處理，分離得到單個(gè)核細(xì)胞，采用DMEM細(xì)胞培養(yǎng)液對細(xì)胞濃度調(diào)節(jié)至2×106個(gè)/mL。將100 μL細(xì)胞懸液添加CD3相關(guān)抗體、CD4相關(guān)抗體、CD8相關(guān)抗體，放在4℃遮光半小時(shí)，以800 rpm離心處理10 min，采用PBS緩沖液開展2次洗滌操作，將上清液吸出，添加染色緩沖液，采用流式細(xì)胞儀予以檢測[9]。

1.3 觀察指標(biāo)

統(tǒng)計(jì)對照組健康體檢者及試驗(yàn)組初發(fā)急性白血病患者CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10水平。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

數(shù)據(jù)分析采用軟件SPSS 23.0。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，組間比較采用獨(dú)立t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平比較

試驗(yàn)組初發(fā)急性白血病患者CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平分別為（61.20±4.64）%、（30.53±3.70）%和（1.02±0.23），均明顯低于對照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;而試驗(yàn)組初發(fā)急性白血病患者CD8+水平為（44.14±3.50）%，明顯高于對照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表2。

2.2兩組IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10水平比較

試驗(yàn)組初發(fā)急性白血病患者IL-2為（11.60±1.13）pg/mL、IFN-γ為（23.25±2.50）pg/mL，均明顯低于對照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。試驗(yàn)組初發(fā)急性白血病患者IL-4、IL-10分別為（41.36±3.50）pg/mL和（34.50±2.75）pg/mL，均明顯高于照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表3。

3 討論

急性白血病作為起源于造血干細(xì)胞的惡性克隆性疾病，主要表現(xiàn)為骨髓中原始細(xì)胞大量異常增殖，且出現(xiàn)骨髓外浸潤，正常造血受到抑制。眾所周知，免疫系統(tǒng)受累在白血病發(fā)生發(fā)展以及后續(xù)轉(zhuǎn)歸過程中起重要作用，而CD8+T細(xì)胞、CD4+T細(xì)胞以及NK細(xì)胞于急性白血病患者機(jī)體抵抗腫瘤免疫過程中存在一定效果[10]。本研究通過觀察急性白血病患者外周血中相關(guān)T淋巴細(xì)胞亞群指標(biāo)變化，以期為急性白血病臨床診斷治療以及預(yù)后提供有效指標(biāo)。

CD4+細(xì)胞可以促使T細(xì)胞及B細(xì)胞得以激活，促使T細(xì)胞以及B細(xì)胞產(chǎn)生細(xì)胞因子，促使CD8+T細(xì)胞及吞噬細(xì)胞激活情況加快，對B細(xì)胞抗體的合成過程帶來一定影響，促使機(jī)體抵抗腫瘤相關(guān)反應(yīng)加強(qiáng)[11-13]。CD8+細(xì)胞于免疫應(yīng)答過程的后期出現(xiàn)增加，予以靶細(xì)胞發(fā)揮細(xì)胞毒效果，對可溶的相關(guān)抗原予以辨別，合成抑制因子位置，對免疫應(yīng)答實(shí)行抵抗，抑制CD4+細(xì)胞[14]。CD4+/CD8+有助于保證機(jī)體免疫內(nèi)環(huán)境相對穩(wěn)定性，在免疫調(diào)節(jié)過程中存在重要作用，能夠?qū)w內(nèi)免疫反應(yīng)調(diào)整作用予以反映。本文相關(guān)數(shù)據(jù)值指標(biāo)體現(xiàn)，初發(fā)急性白血病患者CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平低于健康體檢者，而初發(fā)急性白血病患者CD8+高于健康體檢者[15-17]。急性白血病患者因自身疾病所致其體內(nèi)輔助性T細(xì)胞含量減少，或輔助性T細(xì)胞功能下降，對白血病細(xì)胞辨認(rèn)能力降低，對白血病細(xì)胞殺傷作用減少，輔助性T細(xì)胞和急性白血病發(fā)病及進(jìn)展均具有相關(guān)性。

細(xì)胞因子能夠?qū)⒛[瘤細(xì)胞殺死，或?qū)⒖鼓[瘤效應(yīng)細(xì)胞予以激發(fā)獲得抵抗腫瘤效果，在抵抗腫瘤過程中存在重要作用[18]。輔助性T細(xì)胞包含Th1細(xì)胞及Th2細(xì)胞，而Th1細(xì)胞因子涵蓋白細(xì)胞介素-2（IL-2）、γ-干擾素（IFN-γ）指標(biāo)等，參加機(jī)體細(xì)胞免疫過程;Th2細(xì)胞因子涵蓋白細(xì)胞介素-4（IL-4）、白細(xì)胞介素-10（IL-10）指標(biāo)等，參加機(jī)體體液免疫過程。Th1相關(guān)細(xì)胞因子/Th2相關(guān)細(xì)胞因子出現(xiàn)不正常表達(dá)為引發(fā)腫瘤細(xì)胞不被機(jī)體免疫檢測的原因之一[19-20]。本研究結(jié)果顯示，初發(fā)急性白血病患者IL-2、IFN-γ水平低于健康體檢者，而初發(fā)急性白血病患者IL-4、IL-10水平高于健康體檢者。提示：急性白血病患者體內(nèi)免疫平衡往Th2發(fā)生轉(zhuǎn)移，為引發(fā)抑制體內(nèi)抵抗腫瘤效果的因素之一，建議予以Th1相關(guān)細(xì)胞因子/Th2相關(guān)細(xì)胞因子平衡調(diào)節(jié)，促使Th1細(xì)胞引發(fā)的細(xì)胞免疫加強(qiáng)，有效抵抗腫瘤。

綜上所述，初發(fā)急性白血病患者外周血中CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、IL-2、IFN-γ指標(biāo)表達(dá)減少，CD8+、IL-4、IL-10指標(biāo)表達(dá)增加，檢測以上指標(biāo)有助于對初發(fā)急性白血病患者病情狀況予以評定。

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（收稿日期：2019-06-26）