□ 高 波 周志軍 蘇 記 云南瑞寶生物科技股份有限公司
主要是對(duì)紅心蘿卜進(jìn)行提取,在實(shí)驗(yàn)的過程中,應(yīng)用到了鹽酸、鹽酸磷酸二氫鈉、檸檬酸以及磷酸二氫鈉等相關(guān)試劑,這些實(shí)驗(yàn)都需要是分析純級(jí)的試劑。
在儀器設(shè)備方面主要有臺(tái)式高速離心機(jī)、電子天平、pH計(jì)、磁力攪拌器以及紫外可見分光光度計(jì)。
1.3.1 原料處理
選擇較為新鮮的紅心蘿卜,將其清洗干凈,保存在4 ℃的冰箱中,以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用[1]。
1.3.2 蘿卜紅色素提取單因素試驗(yàn)
1.3.2.1 提取pH的選擇
提取pH值的過程中主要將碾碎的100 g紅心蘿卜放入到容積為1 L的燒杯當(dāng)中,加入一定量的蒸餾水,對(duì)其均勻攪拌,接著使用氫氧化鈉溶液和檸檬酸溶液,對(duì)pH值進(jìn)行調(diào)整,于40℃攪拌提取4 h,過濾后得色素粗提液,稱重并計(jì)算提取率,結(jié)果見圖1。
圖1 pH對(duì)蘿卜紅色素提取率的影響
1.3.2.2 提取溫度的選擇
將100 g已經(jīng)碾碎的紅心蘿卜放置在燒杯當(dāng)中,加入適當(dāng)?shù)恼麴s水,對(duì)其pH值進(jìn)行調(diào)整,使其pH值為3,并且分別在20~60 ℃下攪拌,提取4 h,對(duì)過濾后的色素粗提取液進(jìn)行稱重,對(duì)提取率進(jìn)行計(jì)算。結(jié)果如圖2,隨溫度的增加,提取率逐漸增加,在提取溫度達(dá)到40 ℃時(shí)提取率達(dá)到最大值59.72%,隨著溫度的繼續(xù)升高,提取率下降。
圖2 溫度對(duì)蘿卜紅色素提取率的影響
1.3.3 蘿卜紅色素提取率的測(cè)定
在對(duì)蘿卜紅色素提取率進(jìn)行分析和測(cè)定的過程中,首先取一定量的蘿卜紅色素提取液進(jìn)行離心分離,對(duì)稀釋之后的樣品溶液進(jìn)行測(cè)量,主要是檢測(cè)512 min下的吸光度。
1.3.4 溫度對(duì)蘿卜紅色素穩(wěn)定性的影響
使用270 mL的檸檬酸—磷酸鹽緩沖溶液和蘿卜紅色素進(jìn)行混合,攪拌均勻之后,分別將它們放到不同溫度下進(jìn)行水浴加熱,對(duì)吸光度值進(jìn)行測(cè)定。
1.3.5 光照對(duì)蘿卜紅色素穩(wěn)定性的影響
將蘿卜紅色素和檸檬酸—磷酸鹽緩沖溶液進(jìn)行混合,并且將它們放置于試管當(dāng)中,分別在自然光條件下、室內(nèi)散射光條件下以及避光條件下,對(duì)其吸光度值進(jìn)行測(cè)定。
1.3.6 酸堿性對(duì)蘿卜紅色素穩(wěn)定性的影響
利用磷酸氫二鈉以及檸檬酸溶液配制檸檬酸磷酸鹽緩沖溶液,控制pH值在3~8,分別使用90 mL不同pH的緩沖溶液和蘿卜紅色素提取液進(jìn)行混合,再攪拌均勻之后,對(duì)512 nm處的吸光度進(jìn)行測(cè)定。
結(jié)果如圖3,對(duì)相關(guān)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析,可以發(fā)現(xiàn)蘿卜紅色素的吸光度隨pH值的升高逐步升高,接著先降低后升高,在pH值為6時(shí)吸光值相對(duì)較低,當(dāng)pH值超過4時(shí),在pH值增大的條件下,溶液顏色逐步向藍(lán)色轉(zhuǎn)變,這就說明最大吸收波長(zhǎng)逐步向長(zhǎng)波長(zhǎng)方向轉(zhuǎn)變,蘿卜紅色素在酸性條件下相對(duì)較穩(wěn)定。
圖3 pH對(duì)蘿卜紅色素穩(wěn)定性的影響
蘿卜紅色素溶液在20~60 ℃的條件下,吸光度的變化相對(duì)較小,如果溫度超過60 ℃,蘿卜紅色素會(huì)逐步降低,在加熱2 h之后,吸光度值大幅度下降。這就說明在20~60 ℃的條件下,蘿卜紅色素具有較好的耐熱性,但是在高溫條件下并不穩(wěn)定。
具體分析光照條件下蘿卜紅色素的變化情況,在室外光照條件下,吸光度隨時(shí)間的延長(zhǎng)逐漸降低,在室內(nèi)條件下吸光度值隨著光照時(shí)間的進(jìn)一步延長(zhǎng),沒有出現(xiàn)較大的變化。在避光條件下,蘿卜紅色素的吸光度沒有發(fā)生較大改變,這就說明蘿卜紅色素在室內(nèi)、避光條件下可以得到有效保存,在強(qiáng)光條件下會(huì)出現(xiàn)分解等情況。
通過分析可以發(fā)現(xiàn)蘿卜紅色素在受熱條件下的變化較小,60 ℃不會(huì)對(duì)蘿卜紅色素產(chǎn)生較大損失,另外在光照不強(qiáng)的條件下,蘿卜紅色素的穩(wěn)定性相對(duì)較好,但是在室外自然光以及強(qiáng)光條件下易出現(xiàn)分解的情況。