田奎蓉，任莉娜，王 嫘，王梓琪，李春鳴，劉俊林

（西北民族大學(xué) 生命科學(xué)與工程學(xué)院，甘肅 蘭州 730030）

卷柏，屬卷柏屬（Selaginella）植物，蕨類植物門石松綱（Lycopsida）卷柏科（Selaginellaceae），為植物界少見的單科單屬植物[1]，主要生長于沙漠地區(qū)，因其草葉枯萎后遇水又能重新煥發(fā)生機(jī)，并在短時(shí)間內(nèi)恢復(fù)綠色，又被稱為“復(fù)活草”，這與其植株中所生物堿成分卷柏酸(selaginellic acid)有關(guān)[2]，復(fù)活草在中醫(yī)診療中被廣泛用于治療經(jīng)閉痛經(jīng)、跌撲損傷等病癥[3]，其碳化炮制后還具有化瘀止血的功效[4-5]。鄧祥堅(jiān)等[6]研究還發(fā)現(xiàn)江南卷柏提取劑能加強(qiáng) ADP 誘導(dǎo)的血小板聚集的能力，江南卷柏提取物還能降低高血脂小鼠血清中 TG和 TC 升高 HDL-C 水平[7]。卷柏藥用價(jià)值極高，具有良好的研究前景。近年來在江南卷柏中發(fā)現(xiàn)了多種具有生物活性的物質(zhì)，其作用研究開發(fā)廣泛[8]。

消化性潰瘍是一種常見的消化系統(tǒng)疾病，非甾體類消炎藥 (Non-steroidal anti-inflammatory drugs, NSAIDs) 是引發(fā)胃及十二指腸等消化性潰瘍的主要病因[9]。近年來，以阿司匹林為主的非甾體類藥物得到越來越廣泛的應(yīng)用。阿司匹林具有止痛、解熱、抗炎的功效，尤其是其抗血小板聚集的作用已成為心腦血管疾病治療和預(yù)防的常規(guī)藥物, 長期服用易引發(fā)消化不良，甚至消化道潰瘍、出血、穿孔等嚴(yán)重的并發(fā)癥[10]。研究采用中醫(yī)古法對(duì)卷柏進(jìn)行炭化炮制[4-5]得到卷柏粉末對(duì)阿司匹林致大鼠消化性潰瘍模型進(jìn)行干預(yù)治療，以探究卷柏炭化炮制品對(duì)消化性潰瘍模型的治療效果。

1 材料與方法

1.1 藥品、材料與儀器

無水乙醇、氯化鈉、甲醛、冰醋酸、二甲苯(均為分析純)，購自天津市富宇精細(xì)化工有限公司;醇溶性伊紅、蘇木精，購自上海伯奧生物科技有限公司；各熔點(diǎn)石蠟，上海標(biāo)本模型廠生產(chǎn)。常規(guī)試劑購自天津大茂化學(xué)試劑廠。

Nikoncoolpix 4500 數(shù)碼照相機(jī)(日本尼康公司)；LEICA Histo stat 820 石蠟切片機(jī)；LEICA-DM500 光學(xué)顯微鏡（德國萊卡公司生產(chǎn))；BX-UCB/BX61 圖像采集系統(tǒng)、Image-Pro Plus 6.0 圖像測量分析系統(tǒng)(日本奧林巴斯公司)。

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物

30 只Wister 大鼠（雌雄各半），體重200～300 g 由蘭州獸醫(yī)研究所提供。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 卷柏炭的制備 取潔凈的卷柏，置鍋內(nèi)用武火炒至外表焦黑色，內(nèi)呈焦黃色，噴淋清水，取出，低溫烘干，粉碎研磨，過60目篩[5]，保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3.2 灌胃藥液的煎制 取1.3.1中的卷柏碳化物5 g置于500 ml燒杯中加入200 ml蒸餾水文火煎制20 min，過濾取上清液，重復(fù)三次，合并上清液，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，冷凍干燥，4℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.4 阿司匹林所致大鼠消化性潰瘍模型模型建立

30 只Wister 大鼠（雌雄各半）給予阿司匹林溶液（2.5 mg/kg）灌胃造模為期 7 d，建立阿司匹林致消化性潰瘍模型小鼠模型（以大鼠出現(xiàn)便隱血陽性確定模型建立）[11]建模期間記錄體重、飲食、精神狀態(tài)等生理指標(biāo)。

1.5 消化性潰瘍模型的治療

將成模大鼠分成分成 5 個(gè)組，分別為炭化低、中、高劑量組(2.5、5.0、10 mg/kg）卷柏炭水煎液灌胃，陽性對(duì)照組給予葵花胃康靈（20 mg/kg），陰對(duì)照組給予等量蒸餾水進(jìn)行灌喂。治療7 d，快速采血，解剖分離胃腸，觀察記錄小鼠十二指腸潰瘍、十二指腸穿孔、出血點(diǎn)數(shù)量根據(jù)潰瘍?cè)u(píng)分標(biāo)準(zhǔn)記錄大鼠十二指腸潰瘍程度[12]。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用 SPSS 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)量結(jié)果以`x±s 表示，多組間比較采用單因素方差分析與 T 檢驗(yàn)判斷其顯著性。

1.7 組織切片制作

對(duì)治療后大鼠分組進(jìn)行解剖，取其十二指腸用10%甲醛進(jìn)行固定，然后制作HE染色病理組織切片。

2 結(jié)果與分析

如表1所示，陰性對(duì)照組十二指腸潰瘍指數(shù)遠(yuǎn)大于正常組和各試驗(yàn)組；陽性對(duì)照組、炭化高、中劑量組大鼠血清十二指腸潰瘍指數(shù)均極顯著降低；炭化低劑量組十二指腸潰瘍指數(shù)與陰性對(duì)照組相比有所降低；陰性對(duì)照組十二指腸潰瘍指數(shù)遠(yuǎn)高于正常組，其中以碳化高劑量組降低最為顯著。

表 1 各組潰瘍指數(shù)比較(`x±s)

圖1所示，十二指腸組織大量炎性細(xì)胞浸潤、淋巴組織增生、腸化生、黏膜淺層形成淋巴濾泡、腸腺增生壞死。炭化高劑量組較中低劑量組炎性細(xì)胞浸潤較輕微，無淋巴濾泡生成，陽性對(duì)照組的腸絨毛結(jié)構(gòu)依然存在。

圖1 大鼠十二指腸病理組織切片(HE×200)

3 結(jié)論

消化性潰瘍是較為常見的消化內(nèi)科疾病，酗酒、不良生活習(xí)慣、非甾體類消炎藥等因素均可引發(fā)消化性潰瘍[13]。選用阿司匹林溶液建立大鼠消化性潰瘍模型。對(duì)干預(yù)治療的大鼠組織制作病理組織切片結(jié)果顯示試驗(yàn)組大鼠十二指腸均有不同程度的病理變化。十二指腸潰瘍的病理特征主要表現(xiàn)為大量炎性細(xì)胞浸潤、淋巴組織增生、腸化生、黏膜淺層形成淋巴濾泡、腸腺增生。試驗(yàn)數(shù)據(jù)表明炭化高劑量組(10 mg/kg)對(duì)胃潰瘍治療效果較好。