祖韋軍 潘文杰 張金召 李雨 林葉春 郎勝勇

摘要：【目的】探究耕作深度和翻壓綠肥對(duì)植煙土壤微生物功能多樣性及酶活性的影響，為煙區(qū)培肥改土及保障優(yōu)質(zhì)生態(tài)煙葉生產(chǎn)提供理論依據(jù)。【方法】以旋耕深度（淺耕和深耕）和翻壓綠肥（油菜、光葉紫花苕和黑麥草）后的0～20 cm耕層土壤為研究對(duì)象，以無(wú)綠肥土壤為對(duì)照，采用Biolog-Eco技術(shù)及化學(xué)法研究不同時(shí)期土壤微生物功能多樣性及與土壤氮素循環(huán)相關(guān)的主要酶活性，分析微生物功能多樣性與酶活性的相關(guān)性?！窘Y(jié)果】不同耕作深度翻壓綠肥后植煙土壤微生物利用碳源的平均顏色變化率（AWCD）隨綠肥翻壓時(shí)間的延長(zhǎng)整體上呈降低→升高→降低的變化趨勢(shì)，且整體上表現(xiàn)為光葉紫花苕>黑麥草>油菜>無(wú)綠肥對(duì)照，綠肥翻壓后30～60 d為土壤微生物利用碳源基質(zhì)的頻繁時(shí)期。光葉紫花苕深耕處理對(duì)糖類(lèi)、羧酸類(lèi)和多聚物類(lèi)碳源基質(zhì)利用效率較高，AWCD均值分別為0.67、0.69和0.77，多樣性較高且種群相對(duì)豐富;無(wú)綠肥對(duì)照對(duì)所有碳源基質(zhì)利用效率都較低，AWCD均值為0.46，多樣性和種群豐富度較低。胺類(lèi)、多聚物類(lèi)和氨基酸類(lèi)碳源是不同耕作深度下翻壓綠肥的植煙土壤間差異的敏感碳源。耕作深度和翻壓綠肥提高了土壤中與氮素循環(huán)相關(guān)主要酶的活性，翻壓光葉紫花苕處理不同時(shí)期土壤谷胺酰胺合成酶、谷氨酸合成酶和谷氨酸脫氫酶活性均處于最高水平，且土壤酶活性與微生物多樣性間存在較好的相關(guān)性?！窘Y(jié)論】耕作深度和翻壓綠肥能有效提高貴州黃壤煙區(qū)植煙土壤的微生物多樣性及與氮素循環(huán)相關(guān)主要酶的活性，以深耕優(yōu)于淺耕，光葉紫花苕深耕處理在提高土壤微生物功能多樣性及酶活性方面表現(xiàn)較佳，可作為一種有效耕作與栽培模式在貴州煙區(qū)推廣利用。

關(guān)鍵詞： 綠肥;耕作深度;Biolog;多樣性指數(shù);平均顏色變化率（AWCD）;土壤酶活性

中圖分類(lèi)號(hào)： S142;S572.061? ? ? ? ? ? ? ? ? ?文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A 文章編號(hào)：2095-1191（2020）10-2383-11

Effects of different tillage depths and green manures ploughing on the microbial functional diversity and enzyme activities of tobacco soil

ZU Wei-jun1， PAN Wen-jie1，2， ZHANG Jin-zhao3， LI Yu3， LIN Ye-chun4*，

LANG Sheng-yong5

（1College of Agriculture， Guizhou University， Guiyang? 550025， China; 2Guizhou Branch of China National Tobacco Corporation， Guiyang? 550003， China; 3Jiangsu China Tobacco Industry Co.， Ltd.， Nanjing? 210019， China; 4Guizhou Academy of Tobacco Science/Upland Flue-cured Tobacco Quality & Ecology Key Laboratory of China Tobacco，

Guiyang? 550081， China; 5Guizhou Tobacco Company/Qianxinan Branch， Xingyi， Guizhou? 562400， China）

Abstract：【Objective】In this paper， the influences of tillage depths and green manures ploughing on soil enzyme and microbial functional diversity of the tobacco-planted soil was studied，providing a theoretical basis for improving soil fertility and ensuring high-quality ecological tobacco production in Guizhou tobacco areas. 【Method】The tobacco-planted 0-20 cm soil of ploughing three green manure varieties（rape， Vicia villosa and Lolium perenne）by two tillage depths（shallow tillage and deep tillage） was used as the research objects，and the non-green manure soil was used as the control.Biolog technology and chemical methods were used to study the functional diversity of soil microorganisms and the main enzyme activities related to soil nitrogen cycling in different periods， analyzed the correlation between microbial functional diversity and enzyme activities. 【Result】The trend of average well color development（AWCD） of tobacco-planted soil microbe using carbon green manures ploughed by different tillage depths was decreasing→increasing→decreasing， and V. villosa>L. perenne>rape>CK. The 30-60 d was the frequent period for soil microorganisms to use the carbon sources. V. villosa+deep ploughing had high utilization efficiency of saccharides，carboxylic acidand polymer carbon sources，the average values of AWCD were 0.67， 0.69 and 0.77， and the population was rich and diversities were high. The non-green manure control had low utilization efficiency on all carbon sources and population richness and diversities were low， the average value of AWCD was 0.46. The three carbon sources of amines，polymersand amino acids were sensitive carbon sources for the differences in the tobacco planting soil with green manure by different tillage depths. Green manure by different tillage depths increased the main nitrogen cycle related enzyme activities in the soil. The activities of glutamine synthetase， glutamate synthase and glutamate dehydrogenase in the soil were at the highest levels in different periods after V. villosawere ploughed， and there was a better correlation between soil enzyme activity and microbial diversity. 【Conclusion】Tillage depths and green manure ploughing can increasediversity of soil microbial communities， and enzyme activities related to carbon cycling， and the deep tillage mode is better than shallow tillage. The V. villosa+deep ploughinghas fine performance in improving soil? microbe diversity and enzyme activities， which could provide a cultivation and tillage mode for improving soil quality in Guizhou flue-cured tobacco growing regions.

Key words： green manures; tillage depths; Biolog; diversity index; average well color development（AWCD）; soil enzyme activity

Foundation item： Major Science and Technology Project of Guizhou（QKHZDZXZ〔2014〕6015-3）;Key Science and Technology Project of China National Tobacco Corporation（110201802006）; Science and Technology Project of Guizhou Branch of China National Tobacco Corporation（201706）;Science and Technology Project of Jiangsu China Tobacco Industry Co.， Ltd.（Y040201815）

0 引言

【研究意義】土壤微生物是土壤生態(tài)系統(tǒng)中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)流動(dòng)、轉(zhuǎn)化與循環(huán)最活躍的組成部分，是表征土壤質(zhì)量的重要指標(biāo)（Kowalchuk et al.，2007），也是根際土壤中的主要分解者和調(diào)控者（樊曉剛等，2010），其對(duì)碳源的代謝特征能反映土壤中參與調(diào)控能量和養(yǎng)分循環(huán)的微生物數(shù)量及其代謝情況的變化（王寧等，2015;曹永昌等，2016）。土壤微生物的分解活動(dòng)也是土壤酶的主要來(lái)源之一，土壤酶及微生物功能多樣性對(duì)土壤生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性與營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的轉(zhuǎn)化及代謝均具有重要作用。貴州煙區(qū)由于長(zhǎng)期連作，導(dǎo)致土質(zhì)貧瘠，耕層淺薄，土壤微生物多樣性降低，從而影響烤煙產(chǎn)質(zhì)量（賈志紅等，2010）。因此，研究耕作深度與翻壓綠肥對(duì)植煙土壤微生物功能多樣性與酶活性的影響，對(duì)煙區(qū)土壤培肥改土及提高烤煙產(chǎn)量和質(zhì)量具有積極意義?！厩叭搜芯窟M(jìn)展】綠肥作為一種重要的輪作接茬作物，翻壓后可提升土壤肥力及微生物活性（王先偉等，2001）。植物、根際土壤微生物及土壤酶活性三者間密切相關(guān)（周桔和雷霆，2007），不同施肥與耕作制度和土地利用方式可顯著影響土壤微生物群落功能多樣性（岳冰冰等，2013;Tosi et al.，2016;李佳等，2019;張明宇等，2020），土壤微生物功能多樣性及酶活性已廣泛應(yīng)用于指示土壤質(zhì)量變化和探究土壤特征的指標(biāo)（Mganga et al.，2016）。李正等（2011）通過(guò)田間試驗(yàn)，研究翻壓綠肥對(duì)植煙土壤微生物量碳、氮及土壤酶活性的影響，結(jié)果表明，翻壓綠肥可有效提高土壤酶活性，同時(shí)認(rèn)為土壤微生物量的峰值與土壤中微生物活性、綠肥腐解規(guī)律和土壤礦質(zhì)營(yíng)養(yǎng)供應(yīng)等密切相關(guān)。蔡進(jìn)軍等（2016）研究表明，土壤微生物功能多樣性隨耕作深度增加呈遞減趨勢(shì)。劉勇軍等（2018）研究發(fā)現(xiàn)，秸稈還田和油菜綠肥翻壓處理顯著提升了煙草根際脲酶活性，也提高了煙草生育后期根際微生物群落的代謝活性和功能多樣性指數(shù)，其中對(duì)糖類(lèi)碳源影響最大。張璐等（2019）通過(guò)盆栽試驗(yàn)研究認(rèn)為，有機(jī)物料的施用提高了土壤酶活性及微生物碳源利用能力和群落功能多樣性，其中，以添加玉米秸稈處理的土壤脲酶和蔗糖酶活性提高幅度最大，并有利于以碳水化合物類(lèi)、氨基酸類(lèi)、酚酸類(lèi)和胺類(lèi)物質(zhì)為碳源微生物的生長(zhǎng)。Muhammad等（2020）通過(guò)田間試驗(yàn)，研究了摻入大麥和光葉紫花苕殘留物的綠肥對(duì)土壤微生物種類(lèi)、生物量、酶活性、土壤養(yǎng)分利用率及作物產(chǎn)量的影響，結(jié)果表明，與無(wú)機(jī)肥料相比，在大麥處理中觀(guān)察到參與碳循環(huán)的水解酶活性較高，而在光葉紫花苕處理中參與氮和磷循環(huán)的土壤酶活性較高，同時(shí)2種綠肥處理土壤真菌和細(xì)菌的數(shù)量及種類(lèi)均增加。Rincon-Florez等（2020）研究表明，不同耕作深度影響土壤微生物群落結(jié)構(gòu)和多樣性，深耕較常規(guī)耕作更有利于土壤微生物群落的改善。【本研究切入點(diǎn)】目前，關(guān)于綠肥的試驗(yàn)研究通常僅在部分地區(qū)開(kāi)展，且耕作深度也較單一，篩選出的綠肥品種及種植模式由于土壤、氣候等的差異只適合特定地區(qū)投入使用，推廣范圍較窄。貴州黃壤煙區(qū)由于長(zhǎng)期連作導(dǎo)致土壤退化，而針對(duì)該煙區(qū)背景條件下耕作深度及翻壓綠肥對(duì)土壤微生物功能多樣性和酶活性影響的研究鮮見(jiàn)報(bào)道?！緮M解決的關(guān)鍵問(wèn)題】以旋耕深度（淺耕和深耕）和翻壓綠肥（油菜、光葉紫花苕和黑麥草）后的0～20 cm耕層土壤為研究對(duì)象，以無(wú)綠肥土壤為對(duì)照，采用Biolog-Eco技術(shù)及化學(xué)法研究不同時(shí)期土壤微生物功能多樣性、土壤氮素循環(huán)相關(guān)酶活性及兩者的相關(guān)性，分析并比較不同耕作深度結(jié)合不同綠肥品種的差異，以期篩選出適合貴州黃壤煙區(qū)的最佳綠肥品種及耕作模式，為煙區(qū)的培肥改土及保障優(yōu)質(zhì)生態(tài)煙葉生產(chǎn)提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1. 1 研究區(qū)概況

2018—2019年在貴州省煙草科學(xué)研究院福泉試驗(yàn)基地進(jìn)行田間試驗(yàn)。試驗(yàn)基地位于貴州省中部（東經(jīng)107°14′，北緯27°02′），屬亞熱帶季風(fēng)氣候，海拔1020 m、年均氣溫14 ℃、年均降水量1126.5 mm，土壤類(lèi)型為黃壤。供試土壤pH 4.85、全氮含量1.90 g/kg、全磷含量1.02 g/kg、全鉀含量15.33 g/kg、水解氮含量145.62 mg/kg、有效磷含量45.28 mg/kg、速效鉀含量316.79 mg/kg、有機(jī)質(zhì)含量32.85 g/kg。

1. 2 試驗(yàn)材料

供試綠肥品種為黑麥草（禾本科，撒播量30 kg/ha）、光葉紫花苕（豆科，撒播量45 kg/ha）和油菜（十字花科，撒播量15 kg/ha），種子均為市售。供試烤煙品種為云煙87，種子由貴州省煙草科學(xué)研究院良種繁育中心提供。

1. 3 試驗(yàn)方法

試驗(yàn)采取雙因素多水平隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)，具體方案見(jiàn)表1。

試驗(yàn)設(shè)8個(gè)大區(qū)，大區(qū)面積55.0 m×4.5 m，大區(qū)間留1.5 m寬過(guò)道，四周設(shè)保護(hù)行。綠肥于2018年11月1日撒播，2019年4月1日翻壓，翻壓量22500 kg/ha;烤煙于2019年5月1日移栽，純N施肥量105 kg/ha，N∶P2O5∶K2O =1∶1∶2.5，移栽密度16500株/ha。

分別于翻壓綠肥后第7、14、30、60和120 d，每處理選取代表性樣點(diǎn)輕輕用取樣鏟刮去1～2 cm表層土后按S形法采集0～20 cm耕層土壤，并混合成一個(gè)土樣。土樣裝入自封袋保存帶回實(shí)驗(yàn)室后立即分揀出可見(jiàn)動(dòng)植物殘?bào)w及石塊等，其中第60和120 d的土樣分為2份：一份自然風(fēng)干后過(guò)0.25 mm孔篩，用于土壤酶活性測(cè)定;另一份將各時(shí)期土樣充分混勻后于4 ℃保存，用于土壤微生物功能多樣性分析。

1. 4 測(cè)定項(xiàng)目及方法

采用Biolog-Eco技術(shù)進(jìn)行土壤微生物功能多樣性分析（彭艷等，2014）;采用蘇州科銘生物技術(shù)有限公司酶活試劑盒（微量法）測(cè)定土壤酶活性。

1. 5 統(tǒng)計(jì)分析

平均顏色變化率（AWCD）、豐富度指數(shù)、Shannon-Wiener指數(shù)、McIntosh多樣性指數(shù)、Simpson優(yōu)勢(shì)度指數(shù)和McIntosh均勻度指數(shù)計(jì)算參考張金屯（2004）的方法。利用SPSS 23.0對(duì)不同處理數(shù)據(jù)進(jìn)行LSD差異顯著性分析和主成分分析，采用Excel 2017制圖。

2 結(jié)果與分析

2. 1 土壤微生物利用碳源的特征

2. 1. 1 AWCD 由圖1可知，不同處理間AWCD變幅為0.06～0.81，隨著綠肥翻壓時(shí)間的延長(zhǎng)，AWCD整體上表現(xiàn)為降低→升高→降低的變化趨勢(shì)，翻壓綠肥后第30和60 d為土壤微生物利用碳源的頻繁時(shí)期，此時(shí)各處理間對(duì)碳源的利用能力最強(qiáng)，AWCD均值分別為0.71和0.72。與無(wú)綠肥對(duì)照（AWCD均值為0.48）相比，HQ、HS和GS處理各時(shí)期對(duì)碳源的利用能力均處于較高水平，AWCD均值分別為0.68、0.67和0.66，整體上表現(xiàn)為光葉紫花苕>黑麥草>油菜>無(wú)綠肥對(duì)照。

2. 1. 2 土壤微生物利用不同種類(lèi)碳源的特征 由圖2可知，不同處理對(duì)六大類(lèi)碳源利用能力存在一定差異。與無(wú)綠肥對(duì)照相比，翻壓綠肥后的AWCD均有所增大，表現(xiàn)為光葉紫花苕>黑麥草>油菜>無(wú)綠肥對(duì)照，無(wú)綠肥對(duì)照與翻壓油菜處理不同時(shí)期內(nèi)的AWCD變化幅度較大，后期對(duì)土壤微生物碳源利用能力較弱，而翻壓光葉紫花苕與黑麥草各時(shí)期的AWCD均處于較高水平，土壤微生物對(duì)碳源利用能力較強(qiáng)。HQ處理對(duì)氨基酸類(lèi)、羧酸類(lèi)和酚酸類(lèi)基質(zhì)的利用效率較高;HS處理對(duì)糖類(lèi)、羧酸類(lèi)和胺類(lèi)碳源基質(zhì)利用效率較高;GS處理對(duì)糖類(lèi)、羧酸類(lèi)和多聚物類(lèi)碳源基質(zhì)的利用效率明顯較高，AWCD均值分別為0.67、0.69和0.77，種群相對(duì)豐富;GQ處理對(duì)糖類(lèi)和氨基酸類(lèi)碳源基質(zhì)利用效率略高;YQ和YS處理對(duì)糖類(lèi)、氨基酸類(lèi)和羧酸類(lèi)的碳源基質(zhì)利用效率較低;CKQ和CKS處理對(duì)所有碳源基質(zhì)的利用效率均最低，AWCD均值為0.46，種群豐富度低?？傮w來(lái)看，不同處理對(duì)碳源的利用能力呈現(xiàn)出深耕略大于淺耕，以翻壓光葉紫花苕和黑麥草處理效果較佳。

2. 2 土壤微生物多樣性分析結(jié)果

由表2可知，在微生物豐富度指數(shù)方面，不同處理在翻壓綠肥后第7 d時(shí)，各翻壓綠肥處理均高于無(wú)綠肥對(duì)照;第14 d時(shí)，除YQ與無(wú)綠肥對(duì)照無(wú)顯著差異外（P>0.05，下同），其他翻壓綠肥處理均顯著高于CKS（P<0.05，下同）;第30 d時(shí)，各處理間無(wú)顯著差異;第60 d時(shí)，HS處理的豐富度指數(shù)較低，為30.00，其次是GS和CKQ處理，均為30.67，其余各處理間無(wú)顯著差異，均為31.00;第120 d時(shí)，CKQ處理的豐富度指數(shù)最低，為13.00，其次是GQ處理，為17.67，其余各處理間無(wú)顯著差異。在Shannon-Wiener指數(shù)方面，不同處理在翻壓綠肥后第7和120 d時(shí)，翻壓綠肥處理均高于無(wú)綠肥對(duì)照，且YQ、YS 和GS處理較高;第14 d時(shí)，GQ、GS和HS處理相對(duì)較高;第30和60 d時(shí)，CKQ處理高于其余處理。在McIntosh多樣性指數(shù)方面，不同處理在翻壓綠肥后第7 d時(shí)，除YS處理外，其他翻壓綠肥處理均高于無(wú)綠肥對(duì)照;第14和120 d時(shí)，GS處理明顯高于其他處理;第30和60 d時(shí)，分別是YS和GQ處理相對(duì)較高。在土壤微生物Simpson優(yōu)勢(shì)度指數(shù)方面，翻壓綠肥后第7和14 d不同處理無(wú)顯著差異，均為0.93;第30 d時(shí)HS處理較高，為0.94;第60和120 d時(shí)，分別以CKS和CKQ處理的優(yōu)勢(shì)度指數(shù)最高，對(duì)應(yīng)為0.94和0.95。在McIntosh均勻度指數(shù)方面，翻壓綠肥后第7 d時(shí)表現(xiàn)為翻壓綠肥處理均高于無(wú)綠肥對(duì)照，且GS、HQ和HS處理較高;第14 d時(shí)，除CKQ和YQ處理較低外，其余處理無(wú)顯著差異;第30和60 d時(shí)，各處理間的均勻度指數(shù)無(wú)顯著差異;第120 d時(shí)，除CKQ和GQ處理較低外，其余處理間也無(wú)顯著差異。

2. 3 土壤微生物利用的主要碳源基質(zhì)分析結(jié)果

根據(jù)不同時(shí)期各處理土壤96 h不同碳源吸光值進(jìn)行主成分分析。從31個(gè)碳源基質(zhì)變量中提取2個(gè)主成分因子，從圖3-A可知，綠肥翻壓后第7 d，第一和第二主成分（PC1和PC2）的方差貢獻(xiàn)率分別為68.25%和12.26%，累計(jì)可解釋所有變量的80.51%，可認(rèn)為前2個(gè)主成分能表征原來(lái)31個(gè)變量的特征，CKQ、CKS、YQ和HS位于第1象限，綜合得分較高;YS、GS、HQ和GQ位于第2象限，綜合得分次之。從圖3-B可知，綠肥翻壓后第14 d，PC1和PC2方差貢獻(xiàn)率分別為70.32%和10.01%，累計(jì)可解釋所有變量的80.33%，YQ、CKQ、YS和GQ位于第1象限，綜合得分較高;HS、CKS、HQ和GS位于第2象限，綜合得分次之。從圖3-C可知，綠肥翻壓后第30 d，PC1和PC2方差貢獻(xiàn)率分別為79.05%和6.78%，累計(jì)可解釋所有變量的85.83%，CKS、YS和HQ位于第1象限，綜合得分較高;GS、CKQ、YQ、HS和GQ位于第2象限，綜合得分次之。從圖3-D可知，綠肥翻壓后第60 d，PC1和PC2方差貢獻(xiàn)率分別為73.36%和8.95%，累計(jì)可解釋所有變量的82.31%，GS、GQ和YQ位于第1象限，綜合得分較高;CKS、CKQ、HQ、HS和YS位于第2象限，綜合得分次之。從圖3-E可知，綠肥翻壓后第120 d，PC1和PC2方差貢獻(xiàn)率分別為69.50%和11.46%，累計(jì)可解釋所有變量的80.96%，CKQ、CKS和HQ位于第1象限，綜合得分較高;YS、HS、GQ、YQ和GS位于第2象限，綜合得分次之。綜上所述，不同耕作深度翻壓綠肥的土壤樣品在PC空間軸坐標(biāo)的差異與聚集在該P(yáng)C軸上碳源的利用能力相關(guān)聯(lián)，明顯影響植煙土壤的微生物群落組成，綠肥翻壓后60 d為微生物利用碳源的頻繁時(shí)期，此時(shí)以翻壓豆科綠肥光葉紫花苕綜合得分最高。

糖類(lèi)、多聚物類(lèi)、羧酸類(lèi)、氨基酸類(lèi)等六大碳源類(lèi)型已被認(rèn)為是土壤微生物代謝的敏感碳源（石賢輝，2012;范瑞英等，2013;吳則焰等，2013）。從表3中可看出，各類(lèi)碳源不同時(shí)期內(nèi)均有較高載荷。綠肥翻壓后第7 d，酚酸類(lèi)和胺類(lèi)碳源在PC1上載荷高的多于PC2，糖類(lèi)、氨基酸類(lèi)和多聚物類(lèi)碳源則相反，表明此時(shí)酚酸類(lèi)和胺類(lèi)碳源是不同處理間差異的敏感碳源;綠肥翻壓后第14 d，胺類(lèi)碳源在PC1上載荷高的多于PC2，糖類(lèi)、羧酸類(lèi)、多聚物類(lèi)和酚酸類(lèi)碳源則相反，表明此時(shí)胺類(lèi)碳源是不同處理間差異的敏感碳源;綠肥翻壓后第30 d，糖類(lèi)和多聚物類(lèi)碳源在PC1上載荷高的多于PC2，氨基酸類(lèi)碳源則相反，表明此時(shí)糖類(lèi)和多聚物類(lèi)碳源是不同處理間差異的敏感碳源;綠肥翻壓后第60 d，羧酸類(lèi)碳源在PC1上載荷高的多于PC2，多聚物類(lèi)碳源則相反，表明此時(shí)羧酸類(lèi)碳源是不同處理間差異的敏感碳源;綠肥翻壓后第120 d，氨基酸類(lèi)、多聚物類(lèi)和胺類(lèi)碳源在PC1上載荷高的多于PC2，糖類(lèi)和酚酸類(lèi)碳源則相反，表明此時(shí)氨基酸類(lèi)、多聚物類(lèi)和胺類(lèi)碳源是不同處理間差異的敏感碳源。綜合來(lái)看，胺類(lèi)、多聚物類(lèi)和氨基酸類(lèi)3種碳源是不同耕作深度下翻壓綠肥植煙土壤間差異的敏感碳源。

2. 4 土壤酶活性分析結(jié)果

由表4可知，在翻壓綠肥后第60和120 d，不同處理土壤酶活性有一定差異。谷氨酸脫氫酶、谷氨酸合成酶和硝酸還原酶活性整體上表現(xiàn)為第60 d高于第120 d，其中谷氨酸脫氫酶和谷氨酸合成酶活性以翻壓光葉紫花苕處理相對(duì)較高;硝酸還原酶活性在第60 d時(shí)表現(xiàn)為黑麥草>油菜>光葉紫花苕>無(wú)綠肥對(duì)照，第120 d時(shí)表現(xiàn)為光葉紫花苕>油菜>黑麥草>無(wú)綠肥對(duì)照;脲酶活性無(wú)綠肥對(duì)照表現(xiàn)為第120 d高于60 d，翻壓綠肥處理均表現(xiàn)為第60 d高于第120 d，第60 d時(shí)表現(xiàn)為黑麥草>油菜>光葉紫花苕>無(wú)綠肥對(duì)照，第120 d時(shí)表現(xiàn)為黑麥草>光葉紫花苕>油菜>無(wú)綠肥對(duì)照;其余3種酶活性總體上表現(xiàn)為第120 d略高于第60 d。不同酶活性總體上表現(xiàn)為翻壓綠肥處理高于無(wú)綠肥對(duì)照。

2. 5 土壤酶活性與微生物功能多樣性的相關(guān)性

將不同耕作深度下翻壓綠肥后第60和120 d的植煙土壤酶活性與微生物多樣性進(jìn)行相關(guān)分析。由表5可知，綠肥翻壓后第60 d，各土壤酶活性間均呈現(xiàn)正相關(guān)，除谷氨酰胺合成酶與谷氨酸脫氫酶，蔗糖酶與谷氨酰胺合成酶、谷氨酸脫氫酶、谷氨酸合成酶、硝酸還原酶、酸性磷酸酶的相關(guān)性未達(dá)顯著水平外，其余各酶活性間均呈顯著或極顯著（P<0.01，下同）相關(guān);土壤酶活性與微生物功能多樣性間除谷氨酸脫氫酶與Simpson優(yōu)勢(shì)度指數(shù)呈顯著負(fù)相關(guān)外，其余酶活性與微生物功能多樣性指標(biāo)間的相關(guān)性均未達(dá)顯著水平;AWCD、豐富度指數(shù)和McIntosh多樣性指數(shù)三者間呈顯著或極顯著正相關(guān)，Shannon-Wiener指數(shù)與Simpson優(yōu)勢(shì)度指數(shù)呈極顯著負(fù)相關(guān)。由表6可知，綠肥翻壓后第120 d，除酸性磷酸酶與谷氨酸合成酶、硝酸還原酶、蔗糖酶呈負(fù)相關(guān)外，其余各酶活性間均呈正相關(guān);谷氨酰胺合成酶與谷氨酸脫氫酶、脲酶、蔗糖酶、AWCD、豐富度指數(shù)、McIntosh多樣性指數(shù)、McIntosh均勻度指數(shù)間均表現(xiàn)出顯著正相關(guān);谷氨酸脫氫酶與谷氨酸合成酶、硝酸還原酶和脲酶活性呈極顯著正相關(guān);谷氨酸合成酶與硝酸還原酶呈極顯著正相關(guān);硝酸還原酶與AWCD呈顯著正相關(guān);酸性磷酸酶與Shannon-Wiener指數(shù)呈顯著正相關(guān)，與Simpson優(yōu)勢(shì)度指數(shù)呈極顯著負(fù)相關(guān);脲酶活性除與Simpson優(yōu)勢(shì)度指數(shù)的正相關(guān)不顯著外，與其余各指標(biāo)間均呈顯著或極顯著正相關(guān);AWCD與豐富度指數(shù)、McIntosh多樣性指數(shù)、McIntosh均勻度指數(shù)呈極顯著正相關(guān);豐富度指數(shù)、Shannon-Wiener指數(shù)與McIntosh多樣性指數(shù)、McIntosh均勻度指數(shù)呈極顯著正相關(guān);McIntosh多樣性指數(shù)與McIntosh均勻度指數(shù)呈極顯著正相關(guān)。由此可見(jiàn)，土壤酶活性與微生物多樣性間存在一定的相互作用和影響。

3 討論

3. 1 不同耕作深度翻壓綠肥對(duì)土壤微生物功能多樣性的影響

不同耕作及栽培措施對(duì)土壤微生物利用碳源基質(zhì)的能力影響顯著（曹慧芳等，2018）。本研究結(jié)果表明，隨綠肥翻壓時(shí)間的延長(zhǎng)，不同處理的AWCD總體上呈降低→升高→降低的變化趨勢(shì)，且以翻壓光葉紫花苕和黑麥草的效果較好，翻壓綠肥后第30～60 d為土壤微生物利用碳源基質(zhì)的頻繁時(shí)期，說(shuō)明此時(shí)綠肥腐解較完全，釋放養(yǎng)分較多，微生物活動(dòng)頻繁，在此期間內(nèi)，微生物主要對(duì)胺類(lèi)、多聚物類(lèi)和氨基酸類(lèi)碳源基質(zhì)的利用較明顯，土壤微生物對(duì)碳源的偏好利用可能與不同煙株根系與微生物之間的協(xié)同作用有關(guān)。此外，微生物McIntosh多樣性指數(shù)、豐富度指數(shù)、Simpson優(yōu)勢(shì)度指數(shù)和McIntosh均勻度在不同時(shí)期均存在一定差異，Simpson優(yōu)勢(shì)度指數(shù)與McIntosh均勻度指數(shù)呈負(fù)相關(guān)，光葉紫花苕深耕對(duì)糖類(lèi)、羧酸類(lèi)、多聚物類(lèi)碳源基質(zhì)利用效率較高，種群相對(duì)豐富，無(wú)綠肥對(duì)照對(duì)所有碳源基質(zhì)的利用效率均較低，種群豐富度低，與向凱旋等（2019）的研究結(jié)果一致，可能是因?yàn)楦魃疃扰c不同綠肥品種間的供肥特性、土壤水分特征等差異影響了土壤微生物生物量的變化，改變了土壤微生物的多樣性及酶活性（羅希茜等，2009;張璐等，2019）。

通過(guò)主成分分析發(fā)現(xiàn)，與無(wú)綠肥對(duì)照相比，翻壓光葉紫花苕與黑麥草綠肥相對(duì)來(lái)說(shuō)均表現(xiàn)出較好的效果。不同土地利用方式利用碳源多少不同，在特征碳源選擇方面可根據(jù)不同測(cè)試要求進(jìn)行選擇（蔡進(jìn)軍等，2016）。翻壓綠肥能提高土壤微生物群落碳代謝強(qiáng)度、豐富度及多樣性，耕作深度與綠肥品種的不同明顯影響了植煙土壤微生物群落特征。本研究在進(jìn)行主成分分析時(shí)，提取的2個(gè)主成分因子中，PC1的方差累計(jì)貢獻(xiàn)率均大于PC2，然而不同處理間在PC2上的分布差異大于PC1，可能與綠肥翻壓后植煙土壤中微生物豐富度較好，養(yǎng)分含量較高，導(dǎo)致微生物對(duì)各碳源的利用效率皆處于較高水平而未表現(xiàn)出明顯差異有關(guān)。在PC2上，載荷<0.18或> -0.18的碳源明顯多于PC1，植煙土壤微生物對(duì)各大類(lèi)碳源的偏好利用效率也不同，從而導(dǎo)致各處理間在PC2軸上的分布差異較明顯。分析結(jié)果表明，綠肥翻壓后不同時(shí)期各處理均處于PC1正端，且無(wú)綠肥對(duì)照與各翻壓綠肥處理差異明顯，尤以深耕模式下翻壓光葉紫花苕處理與其余各處理間的差異最明顯。此外，本研究發(fā)現(xiàn)綠肥翻壓后第30～60 d是土壤微生物利用碳源的敏感時(shí)期，該時(shí)期內(nèi)各處理土壤對(duì)碳源利用效率均較高，翻壓后第60 d，光葉紫花苕淺耕處理AWCD明顯高于其他處理，其原因可能與豆科綠肥腐解較完全和根瘤具有固氮作用，導(dǎo)致土壤養(yǎng)分含量較高和微生物群落結(jié)構(gòu)發(fā)生變化有關(guān)。

3. 2 不同耕作深度翻壓綠肥對(duì)土壤酶活性的影響

土壤酶主要來(lái)源于植物和微生物的分泌與釋放活動(dòng)，土壤酶活性是微生物活性和土壤質(zhì)量的重要指標(biāo)（史冬燕和王宜磊，2013）。本研究結(jié)果表明，土壤脲酶于翻壓綠肥后第60 d時(shí)總體上表現(xiàn)為黑麥草>油菜>光葉紫花苕>無(wú)綠肥對(duì)照，第120 d時(shí)黑麥草>光葉紫花苕>油菜>無(wú)綠肥對(duì)照，但脲酶活性與土壤中氮的供給與利用情況相關(guān)（謝莉，2010;陳浩等，2019），煙葉成熟期脲酶代謝旺盛，持續(xù)為煙葉提供氮素營(yíng)養(yǎng)，容易造成煙葉貪青晚熟，不利于煙葉成熟落黃（李姣，2013）。硝酸還原酶、酸性磷酸酶和蔗糖酶活性與無(wú)綠肥對(duì)照相比均有所提高，磷酸酶對(duì)土壤酸堿度的適應(yīng)性較強(qiáng)，在pH 4～9的范圍內(nèi)均能測(cè)得酸性、中性、堿性3種磷酸酶的活性，本研究中供試土壤pH為4.60～5.09，土壤偏酸性，酸性磷酸酶在土壤中占據(jù)主要地位，說(shuō)明翻壓綠肥后能有效催化有機(jī)磷化合物水解，供給烤煙可直接吸收利用的有效磷，降低氮素的損失和提高微生物活性，從而達(dá)到提高肥效、增強(qiáng)土壤肥力、改良土壤和改善烤煙營(yíng)養(yǎng)環(huán)境的目的。谷氨酸合成酶、谷氨酰胺合成酶和谷氨酸合成酶是土壤中參與氨同化、調(diào)控與氮素轉(zhuǎn)化的關(guān)鍵酶，翻壓光葉紫花苕處理不同時(shí)期的谷氨酸類(lèi)酶的活性均處于最高水平，且表現(xiàn)出深耕>淺耕的趨勢(shì)，說(shuō)明光葉紫花苕深耕后能顯著提升土壤的氨同化作用及有機(jī)氮化合物的形成。不同耕作方式翻壓綠肥對(duì)土壤酶活性影響明顯，可能與翻壓綠肥后土壤養(yǎng)分含量高，尤其是豆科綠肥根瘤具有固氮作用有關(guān)。

3. 3 不同耕作深度翻壓綠肥對(duì)土壤酶活性與微生物功能多樣性間相關(guān)性的影響

本研究表明，綠肥翻壓后第60和120 d時(shí)土壤酶活性與微生物功能多樣性間均存在一定相關(guān)性，各酶活性間正相關(guān)性較顯著，表現(xiàn)為第60 d>第120 d，微生物功能多樣性表現(xiàn)為第120 d>第60 d;說(shuō)明綠肥翻壓前期對(duì)土壤酶活性影響較大，后期則對(duì)土壤微生物影響較大，可能是翻壓前期由于綠肥的逐漸腐解，土壤酶活性受到影響，而當(dāng)綠肥腐解完全后，其腐解的一些產(chǎn)物為微生物提供了良好的生長(zhǎng)環(huán)境，從而使微生物的活動(dòng)更加頻繁，微生物的功能多樣性也呈現(xiàn)明顯差異?？傊?，耕作深度與綠肥翻壓對(duì)土壤酶和微生物活動(dòng)影響較顯著，但其相關(guān)性還需進(jìn)一步探究。

4 結(jié)論

耕作深度和翻壓綠肥能有效提高貴州黃壤煙區(qū)植煙土壤的微生物多樣性及與氮素循環(huán)相關(guān)的主要酶活性，土壤微生物碳源利用能力表現(xiàn)為深耕>淺耕，光葉紫花苕>黑麥草>油菜>無(wú)綠肥對(duì)照。胺類(lèi)、多聚物類(lèi)、氨基酸類(lèi)碳源是微生物利用率最高的碳源，也是不同耕作深度下翻壓綠肥植煙土壤間差異的敏感碳源。翻壓后30～60 d為微生物利用碳源的頻繁時(shí)期，其中光葉紫花苕深耕處理提高土壤微生物功能多樣性及酶活性方面表現(xiàn)較佳，可作為一種有效耕作與栽培模式在貴州煙區(qū)推廣利用。

參考文獻(xiàn)：

蔡進(jìn)軍，董立國(guó)，李生寶，潘占兵，許浩，張?jiān)礉?rùn). 2016. 黃土丘陵區(qū)不同土地利用方式土壤微生物功能多樣性特征[J]. 生態(tài)環(huán)境學(xué)報(bào)，25（4）：555-562. [Cai J J，Dong L G，Li S B，Pan Z B，Xu H，Zhang Y R. 2016. The characteristics of soil microbe function diversity in semi-arid loess hilly region[J]. Ecology and Environmental Sciences，25（4）：555-562.]

曹慧芳，陳景震，蔣麗娟，陳梅，李力，李培旺. 2018. 油料植物不同栽培模式對(duì)土壤微生物及酶活性的影響[J]. 湖南林業(yè)科技，45（6）：25-27. [Cao H F，Chen J Z，Jiang L J，Chen M，Li L，Li P W. 2018. Effects of different cultivation patterns of oilseed plant on soil microorganism and enzyme activity[J]. Hunan Forestry Science & Technology，45（6）：25-27.]

曹永昌，譚向平，和文祥，耿增超，劉帥，佘雕，侯林. 2016. 秦嶺地區(qū)不同林分土壤微生物群落代謝特征[J]. 生態(tài)學(xué)報(bào)，36（10）：2978-2986. [Cao Y C，Tan X P，He W X，Geng Z C，Liu S，She D，Hou L. 2016. The metabolism characteristics of microbial community in different forest soil in Qinling Mountains Area[J]. Acta Ecologica Sinica，36（10）：2978-2986.]

陳浩，魏立本，王亞麒，黃建國(guó)，趙建，張長(zhǎng)華. 2019. 烤煙不同種植施肥模式對(duì)土壤養(yǎng)分、酶活性及細(xì)菌多樣性的影響[J]. 南方農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，50（5）：982-989. [Chen H，Wei L B，Wang Y Q，Huang J G，Zhao J，Zhang C H. 2019. Effects of different planting and fertilizing modes on soil nutrient，enzyme activity and bacterial diversity of tobacco[J]. Journal of Southern Agriculture，50（5）：982-989.]

樊曉剛，金軻，李兆君，榮向農(nóng). 2010. 不同施肥和耕作制度下土壤微生物多樣性研究進(jìn)展[J]. 植物營(yíng)養(yǎng)與肥料學(xué)報(bào)，16（3）：744-751. [Fan X G，Jin K，Li Z J，Rong X N. 2010. Soil microbial diversity under different fertilization and tillage practices：A review[J]. Plant Nutrition and Ferti-lizer Science，16（3）：744-751.]

范瑞英，楊小燕，王恩姮，鄒莉，陳祥偉. 2013. 黑土區(qū)不同林齡落葉松人工林土壤微生物群落功能多樣性的對(duì)比研究[J]. 北京林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，35（2）：63-68. [Fan R Y，Yang X Y，Wang E H，Zou L，Chen X W. 2013. Compara-tive studies on functional diversity of soil microbial community of larch plantations with different ages in black soil region[J]. Journal of Beijing Forestry University，35（2）：63-68.]

賈志紅，易建華，蘇以榮，曾軍英. 2010. 煙區(qū)輪作與連作土壤細(xì)菌群落多樣性比較[J]. 生態(tài)環(huán)境學(xué)報(bào)，19（7）：1578-1585. [Jia Z H，Yi J H，Su Y R，Zeng J Y. 2010. Diversity comparison of soil bacteria communities in rotation andcontinuous flue-cured tobacco cropping[J]. Ecology and Environmental Sciences，19（7）：1578-1585.]

李佳，李璐，楊勝男，何朋朋，張繼帥. 2019. 生物有機(jī)肥對(duì)植煙土壤微生物及烤后煙葉質(zhì)量的影響[J]. 江西農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，31（6）：63-67. [Li J，Li L，Yang S N，He P P，Zhang J S. 2019. Effects of bio-organic fertilizer on soil microorganism and quality of roasted tobacco[J]. Acta Agriculturae Jiangxi，31（6）：63-67.]

李姣. 2013. 不同有機(jī)肥對(duì)烤煙根際土生物活性及煙葉品質(zhì)的影響[D]. 鄭州：河南農(nóng)業(yè)大學(xué). [Li J. 2013. The impact on rhizosphere soil biological activity and the quality of flue-cured tobacco which fertilize with different organic fertilizer[D]. Zhengzhou：Henan Agricultural University.]

李正，劉國(guó)順，敬海霞，解昌盛，向永光，楊超，鄭文冉，葉協(xié)鋒. 2011. 翻壓綠肥對(duì)植煙土壤微生物量及酶活性的影響[J]. 草業(yè)學(xué)報(bào)，20（3）：225-232. [Li Z，Liu G S，Jing H X，Xie C S，Xiang Y G，Yang C，Zheng W R，Ye X F. 2011. Effects of green manure application on the microbial biomass C and N contents and of the enzyme activity of tobacco-planting soil[J]. Acta Prataculturae Sinica，20（3）：225-232.]

劉勇軍，周羽，靳志麗，彭曙光，周志高，陳長(zhǎng)青，王興祥，李孝剛. 2018. 有機(jī)物料類(lèi)型對(duì)煙草根際微生物及煙葉產(chǎn)質(zhì)量的影響[J]. 土壤，50（2）：312-318. [Liu Y J，Zhou Y，Jin Z L，Peng S G，Zhou Z G，Chen C Q，Wang X X，Li X G. 2018. Effects of different organic materials on rhizosphere microbes，yield and quality of tobacco leaves[J]. Soil，50（2）：312-318.]

羅希茜，郝曉暉，陳濤，鄧嬋娟，吳金水，胡榮桂. 2009. 長(zhǎng)期不同施肥對(duì)稻田土壤微生物群落功能多樣性的影響[J]. 生態(tài)學(xué)報(bào)，29（2）：740-748. [Luo X Q，Hao X H，Chen T，Deng C J，Wu J S，Hu R G. 2009. Effects of long-term different fertilization on microbial community functional diversity in paddy soil[J]. Acta Ecologica Sinica，29（2）：740-748.]

彭艷，劉艷霞，朱健，楊成，徐佳. 2014. 馬尾松混交林土壤微生物功能多樣性的影響[J]. 環(huán)境科學(xué)與技術(shù)，37（11）：42-46. [Peng Y，Liu Y X，Zhu J，Yang C，Xu J. 2014. Influences of various ratio of conifer to broad-leaved trees in mixed forests on soil microbial functional diversity[J]. Environmental Science & Technology，37（11）：42-46.]

石賢輝. 2012. 桉樹(shù)人工林土壤微生物活性與群落功能多樣性[D]. 南寧：廣西大學(xué). [Shi X H. 2012. Soil microbial activity and community functional diversity in eucalyptus plantation[D]. Nanning：Guangxi University.]

史冬燕，王宜磊. 2013. 牡丹根際微生物區(qū)系及土壤酶活的研究[J]. 黑龍江農(nóng)業(yè)科學(xué)，（6）：15-17. [Shi D Y，Wang Y L. 2013. Study on microflora and enzyme activity in rhizospheric soil of Paeonia suffruticosa[J]. Heilongjiang Agricultural Sciences，（6）：15-17.]

王寧，王美菊，李世蘭，王楠楠，馮富娟，韓士杰. 2015. 降水變化對(duì)紅松闊葉林土壤微生物生物量生長(zhǎng)季動(dòng)態(tài)的影響[J]. 應(yīng)用生態(tài)學(xué)報(bào)，26（5）：1297-1305. [Wang N，Wang M J，Li S L，Wang N N，F(xiàn)eng F J，Han S J. 2015. Effects of precipitation variation on growing seasonal dynamics of soil microbial biomass in broadleaved Korean pine mixed forest[J]. Chinese Journal of Applied Ecology，26（5）：1297-1305.]

王先偉，孟慶宏，王術(shù)科，管恩森，徐秀英，詹金元. 2001. 綠肥在烤煙生產(chǎn)中的利用[J]. 中國(guó)煙草科學(xué)，（4）：44-46. [Wang X W，Meng Q H，Wang S K，Guan E S，Xu X Y，Zhan J Y. 2001. Utilization of green manure in the production of flue-cured tobacco[J]. Chinese Tobacco Scien-ce，（4）：44-46.]

吳則焰，林文雄，陳志芳，方長(zhǎng)旬，張志興，吳林坤，周明明，陳婷. 2013. 中亞熱帶森林土壤微生物群落多樣性隨海拔梯度的變化[J]. 植物生態(tài)學(xué)報(bào)，37（5）：397-406. [Wu Z Y，Lin W X，Chen Z F，F(xiàn)ang C X，Zhang Z X，Wu L K，Zhou M M，Chen T. 2013. Variations of soil microbial community diversity along an elevational gradient in mid-subtropical forest[J]. Chinese Journal of Plant Ecology，37（5）：397-406.]

向凱旋，張喜，劉濟(jì)明，薛建輝，崔迎春，吳永波. 2019. 石漠區(qū)柏木林植物多樣性指數(shù)與土壤理化指標(biāo)的相關(guān)性[J]. 南方農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，50（8）：1771-1778. [Xiang K X，Zhang X，Liu J M，Xue J H，Cui Y C，Wu Y B. 2019. The correlation between plant diversity indexes and soil physical and chemical indicators of Cupressus funebris Endl forest of desertification area[J]. Journal of Southern Agriculture，50（8）：1771-1778.]

謝莉. 2010. 有機(jī)肥對(duì)植煙土壤微生物活性及烤煙產(chǎn)量品質(zhì)的影響[D]. 重慶：西南大學(xué). [Xie L. 2010. Effect of organic manure on activity of soil microoganism，yield and quality of flue-cured tobacco[D]. Chongqing：Southwest University.]

岳冰冰，李鑫，張會(huì)慧，金微微，許楠，朱文旭，孫廣玉. 2013. 連作對(duì)黑龍江烤煙土壤微生物功能多樣性的影響[J]. 土壤，45（1）：116-119. [Yue B B，Li X，Zhang H H，Jin W W，Xu N，Zhu W X，Sun G Y. 2013. Soil microbial diversity and community structure under continuous tobacco cropping[J]. Soils，45（1）：116-119.]

張金屯. 2004. 數(shù)量生態(tài)學(xué)[M]. 北京：科學(xué)出版社. [Zhang J T. 2004. Quantitation ecology[M]. Beijing：Science Press.]

張璐，閻海濤，任天寶，李帥，楊永鋒，彭桂新，于建春，劉國(guó)順. 2019. 有機(jī)物料對(duì)植煙土壤養(yǎng)分、酶活性和微生物群落功能多樣性的影響[J]. 中國(guó)煙草學(xué)報(bào)，25（2）：55-60. [Zhang L，Yan H T，Ren T B，Li S，Yang Y F，Peng G X，Yu J C，Liu G S. 2019. Effects of organic matter on nutrient，enzyme activity and functional diversity of microbial community in tobacco planting soil[J]. Acta Tabacaria Sinica，25（2）：55-60.]

張明宇，劉高峰，李小龍，舒勤靜，田艷華，石德興，王巖. 2020. 施用生物有機(jī)肥對(duì)煙草根際土壤微生物區(qū)系的影響[J]. 河南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，54（2）：317-325. [Zhang M Y，Liu G F，Li X L，Shu Q J，Tian Y H，Shi D X，Wang Y. 2020. Effects of bio-organic fertilizer on the microflora in plant rhizosphere soil and bacterial wilt control of toba-cco[J]. Journal of Henan Agricultural University，54（2）：317-325.]

周桔，雷霆. 2007. 土壤微生物多樣性影響因素及研究方法的現(xiàn)狀與展望[J]. 生物多樣性，15（3）：306-311. [Zhou J，Lei T. 2007. Review and prospects on methodology and affecting factors of soil microbial diversity[J]. Biodiversity Science，15（3）：306-311.]

Kowalchuk G A，Heidelbery J F，Bailey M J. 2007. Multidisciplinary journal of microbial ecology[J]. The ISME Journal，1（1）：1-3.

Tosi M，Correa O S，Soria M A，Vogrig J A，Sydorenko O，Montecchia M S. 2016. Land-use change affects the functionality of soil microbial communities：A chronosequence approach in the Argentinian Yungas[J]. Applied Soil Ecology，108：118-127.

Mganga K Z，Razavi B S，Kuzyakov Y. 2016. Land use affects soil biochemical properties in Mt. Kilimanjaro region[J]. Catena，141：22-29.

Muhammad I K，Hyo S G，Muhammad A A，Hyeon J S，Suvendu D，Pil J K. 2020. Short term effects of different green manure amendments on the composition of main microbial groups and microbial activity of a submerged rice cropping system[J]. Applied Soil Ecology，147.doi：10.1016/j.apsoil.2019.103400.

Rincon-Florez V A，Carvalhais L C，Dang Y P，Crawford M H，Schenk P M，Dennis P G. 2020. Significant effects on soil microbial communities were not detected after strategic tillage following 44 years of conventional or no-tillage management[J]. Pedobiologia，80. doi：10.1016/j.pedobi.2020.150640.

（責(zé)任編輯 王 暉）