趙麗娜，趙麗姍，王 偉

（1.河北師范大學(xué)體育學(xué)院，河北 石家莊 050000；2.河北經(jīng)貿(mào)大學(xué)體育部，河北 石家莊 050000；3.韓國又石大學(xué)體育學(xué)院，韓國 565-701；4.邯鄲學(xué)院體育學(xué)院，河北 邯鄲 056005）

鮑魚菇（Pleurotus abalonus） 屬于擔(dān)子菌亞門（Basidiomycotina） 層菌綱（Hymenomycetes） 傘菌目（Agaricales） 口蘑科 （Tricholomataceae） 側(cè)耳屬（Pleurotus）[1]，因外形像鮑魚而得名。鮑魚菇肉質(zhì)肥厚，口感脆爽，具有較高的食用價值和營養(yǎng)價值。鮑魚菇還含有多種蛋白質(zhì)、8種人體必需氨基酸和維生素等營養(yǎng)物質(zhì)，多糖、粗纖維和平菇素[2]。經(jīng)常食用可以強(qiáng)化體質(zhì)，降低血壓，并減少血液中的膽固醇，防止血管硬化。中醫(yī)認(rèn)為鮑魚菇性微溫，味甘，具有滋養(yǎng)、補(bǔ)脾胃、除溫邪、驅(qū)風(fēng)、散寒、舒筋活絡(luò)的功效，可治腰腿疼痛、筋絡(luò)不通、手足麻木等癥[3]?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究證明[4]，鮑魚菇中的多糖等活性物質(zhì)具有抗腫瘤、抗癌癥，能提高機(jī)體的免疫力，還可以有效控制血壓，有效擴(kuò)張血管，降低血液粘稠度。

物理上的遠(yuǎn)離圓心的運(yùn)動稱為離心運(yùn)動，離心運(yùn)動是一種人體常見的運(yùn)動方式，如跑步、跳躍等為其它運(yùn)動動作提供了初始姿態(tài)與力量，是每個動作的初始動力[5]。在離心運(yùn)動時會帶來肌肉延時性酸痛等問題。肌肉延時性酸痛主要是由于乳酸堆積和肌肉細(xì)胞受損[6]，緩解酸痛的方法一般是采用按摩、冷敷、熱敷和拉伸等物理方法促進(jìn)血液循環(huán)，疏通經(jīng)絡(luò)；其次是補(bǔ)充碳水化合物和抗氧化營養(yǎng)物質(zhì)，如維C等以促進(jìn)結(jié)締組織中膠原合成、修復(fù)受損細(xì)胞以緩解酸痛[7]。

近年來，以亮氨酸、纈氨酸和異亮氨酸這三種氨基酸組成的支鏈氨基酸，其作用和功效越來越得到了廣泛的認(rèn)可[8]。支鏈氨基酸是骨骼肌代謝的主要來源，對人體運(yùn)動肌肉的代謝生長具有重要的作用。鮑魚菇中含有的支鏈氨基酸十分豐富[9]，可以作為人體所需的支鏈氨基酸來源，用于緩解運(yùn)動后的肌肉酸痛。通過就鮑魚菇支鏈氨基酸對大強(qiáng)度離心運(yùn)動后延遲性肌肉酸痛的影響進(jìn)行研究，探討鮑魚菇支鏈氨基酸的功效和應(yīng)用價值。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

鮑魚菇干品，采購昆明市官渡區(qū)吳金峰干菜經(jīng)營部的“盛詳”牌。

無水乙醇（化學(xué)純） 山東檉碩化工有限公司；丙酮（化學(xué)純）山東旭晨化工科技有限公司；乙醚（化學(xué)純）寶雞天地奧化學(xué)試劑有限公司；活性干酵母由河南萬躍生物科技有限公司提供。

1.2 儀器設(shè)備

BSA224S電子分析天平，北京中西遠(yuǎn)大科技有限公司；YQ50氣流粉碎機(jī)，河南精邁儀器儀表有限公司；DGG-9030GD鼓風(fēng)循環(huán)干燥箱，上海錦玟儀器設(shè)備有限公司；JK21592雙功能水浴恒溫振蕩器，北京精凱達(dá)儀器有限公司；GB-SS-2000T超聲波提取機(jī)，杭州谷邦超聲波科技有限公司；3H24RI型號臺式智能高速冷凍離心機(jī)，上海高赫進(jìn)出口有限公司；卡爾文KW-PT6動物實(shí)驗(yàn)跑臺，南京卡爾文生物科技有限公司；ZH-DX型多通道小動物代謝監(jiān)控系統(tǒng)，安徽正華生物儀器設(shè)備有限公司；大鼠采血針，上海玉研科學(xué)儀器有限公司；BS-300全自動生化分析儀，深圳邁瑞公司。

1.3 鮑魚菇支鏈氨基酸提取液的制備

鮑魚菇支鏈氨基酸的提取采用乙醇輔助超聲波法[10]。將鮑魚菇干品清洗干凈后切段、烘干、粉碎研磨制成粉末，取鮑魚菇粉末過80目篩后，按料液比1∶30的比例加入80%的乙醇，75℃恒溫水浴提取48 h，去除小分子糖和雜質(zhì)，過濾后取濾渣烘干。將烘干后的濾渣加水浸提2次，合并兩次的浸提液濃縮至50%，然后加80%的乙醇混勻，靜置沉淀24 h后，3 000 r·min-1離心15 min取沉淀物，依次加無水乙醇、丙酮、乙醚各洗滌2次，最后蒸干乙醚。加入活性干酵母進(jìn)行發(fā)酵處理，將發(fā)酵液置入35℃振蕩器保溫浸泡48 h后，放入超聲波提取振蕩反應(yīng)器，按操作說明進(jìn)行支鏈氨基酸提取，過濾提取液即得鮑魚菇支鏈氨基酸提取液（以下簡稱“提取液”）。

1.4 試驗(yàn)分組

試驗(yàn)采用SPF級大鼠，適應(yīng)性飼養(yǎng)一周，期間同時進(jìn)行跑臺適應(yīng)性訓(xùn)練，剔除不能正常進(jìn)行跑步訓(xùn)練的大鼠，按體重隨機(jī)分成4組進(jìn)行試驗(yàn)，每組10只。按灌胃劑量分成高劑量組、中劑量組、低劑量試驗(yàn)組和對照組，每天上午分別灌胃劑量為30 mL·kg-1、20 mL·kg-1和 10 mL·kg-1的提取液，下午進(jìn)行大強(qiáng)度跑臺力竭運(yùn)動，連續(xù)一周。對照組采用相同的運(yùn)動，但不灌胃。

1.5 試驗(yàn)方法

能量代謝試驗(yàn)：各組大鼠在試驗(yàn)開始前1天使用動物代謝監(jiān)測系統(tǒng)進(jìn)行呼吸代謝熱量測量各組大鼠的耗氧量和產(chǎn)熱量；末次訓(xùn)練后再進(jìn)行一次測定，比較2次測定的耗氧量和二氧化碳交換量來計(jì)算大鼠代謝的熱量和能量代謝率。能量代謝率用體表面積（kJ·h-1m-2）來計(jì)算。

血液生化指標(biāo)測定：采用頜下靜脈采血法，在試驗(yàn)前后分別采集大鼠血液，3 000 r·min-1離心10 min分離血清后，采用BS-300全自動生化分析儀，對試驗(yàn)前后2次采集的大鼠血樣進(jìn)行血乳酸、肌酸激酶、血尿素氮等血液生化指標(biāo)的測定，對比試驗(yàn)結(jié)果。

以上試驗(yàn)期間大鼠均正常進(jìn)食飲水。

2 試驗(yàn)結(jié)果與分析

2.1 對大鼠能量代謝率的影響

大鼠試驗(yàn)前后的能量代謝率的變化情況見表1。

表1 大鼠能量代謝率變化情況Tab.1 Changes of energy metabolism rate in rats

如表1所示，試驗(yàn)前各組大鼠的能量代謝率差別不大。與試驗(yàn)前數(shù)據(jù)相比，對照組和各試驗(yàn)組大鼠的能量代謝率均有明顯上升（P＜0.01）。與對照組相比，高劑量組、中劑量組、低劑量組在試驗(yàn)后的能量代謝率沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義上的差異性（P＞0.01）。試驗(yàn)結(jié)果表明，強(qiáng)度離心運(yùn)動可以提高大鼠的能量代謝率，但灌胃提取液的作用不明顯。分析其原因可能是在大強(qiáng)度離心運(yùn)動時基礎(chǔ)代謝率會迅速提高，支鏈氨基酸雖然可以提供細(xì)胞修復(fù)和營養(yǎng)的作用，對運(yùn)動時的能量代謝率沒有直接的影響，大鼠還是維持了較高的能量代謝率以適應(yīng)大強(qiáng)度的運(yùn)動需求。

2.2 血液生化指標(biāo)測定試驗(yàn)

使用全自動生化分析儀測定2次采集的大鼠血液生化指標(biāo)見表2。

表2 大鼠血液生化指標(biāo)變化情況Tab.2 Changes of blood biochemical indexes in rats

如表2所示，與試驗(yàn)前數(shù)據(jù)相比，試驗(yàn)組大鼠的血乳酸含量沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義上的差異性（P＞0.01），而對照組的大鼠的血乳酸含量有顯著差異（P＜0.01）。說明灌胃提取液能夠有效控制大鼠體內(nèi)的血乳酸水平。血乳酸的堆積是產(chǎn)生肌肉酸痛的主要原因，乳酸含量的增加會嚴(yán)重影響肌肉的運(yùn)動能力，但最新研究表明，乳酸一般會在大強(qiáng)度運(yùn)動后1 h內(nèi)被清除，肌肉的延遲性酸痛一般是在運(yùn)動后的幾天內(nèi)發(fā)生，主要原因并非乳酸，而是由于肌肉細(xì)胞的損傷，離心運(yùn)動更容易造成肌肉組織的損傷[11]。而鮑魚菇支鏈氨基酸對肌肉細(xì)胞的修復(fù)功效可以幫助肌肉受損恢復(fù)，豐富的蛋白質(zhì)也可以給細(xì)胞提供營養(yǎng)。

與試驗(yàn)前數(shù)據(jù)相比，試驗(yàn)組大鼠的肌酸激酶含量均有顯著增加（P＜0.01），而對照組沒有差異性（P＞0.01）。而且灌胃劑量大小與試驗(yàn)后的大鼠體內(nèi)肌酸激酶含量呈正比例關(guān)系。試驗(yàn)結(jié)果表明，灌胃提取液能夠有效控制大鼠體內(nèi)的肌酸激酶升高。肌酸激酶同樣是因?yàn)榇髲?qiáng)度的離心運(yùn)動增加了無氧運(yùn)動量，從而導(dǎo)致肌肉合成ATP（三磷酸腺苷）速度下降，而ATP是人體運(yùn)動的重要能量來源，大強(qiáng)度的離心運(yùn)動因?yàn)閺?qiáng)度過大，會使組織細(xì)胞壁破裂導(dǎo)致肌酸激酶大量注入血液，造成血液肌酸激酶升高[12]。而鮑魚菇支鏈氨基酸的營養(yǎng)的修復(fù)作用可以減少肌肉細(xì)胞破裂引起的肌酸激酶滲出。

與試驗(yàn)前數(shù)據(jù)相比，高劑量組、中劑量組和對照組大鼠的血尿素氮含量均有顯著增加（P＜0.01），而低劑量組沒有差異性（P＞0.01）。對照組的試驗(yàn)前后數(shù)據(jù)顯著差異表明，大強(qiáng)度的離心運(yùn)動會增加大鼠體內(nèi)血尿素氮的含量；而低劑量組試驗(yàn)前后數(shù)據(jù)無差異性也表明，灌胃低劑量提取液可以有效控制大鼠的血尿素氮含量。但灌胃高劑量組、中劑量提取液對血尿素氮含量的控制作用并不明顯，說明灌胃高劑量組、中劑量的提取液并不能夠有效降低血尿素氮含量。血尿素氮含量增加主要是因?yàn)榇髲?qiáng)度離心運(yùn)動時肌肉中的酶過度分解，導(dǎo)致最終的分解代謝產(chǎn)物尿素含量增加。但試驗(yàn)中灌胃高劑量組、中劑量的大鼠血尿素氮含量還是比較高，分析其原因可能是提取液中的蛋白質(zhì)含量較高，過多的蛋白質(zhì)代謝也會引起尿素類代謝物的增加，從而引起尿素氮的異常增高。

3 結(jié)論

大強(qiáng)度的離心運(yùn)動通過肌肉組織上的高負(fù)荷與肌肉收縮的小能量需求相結(jié)合的模式，在運(yùn)動損傷、不能進(jìn)行傳統(tǒng)抗阻力量訓(xùn)練的人群中發(fā)揮著重要作用。但這種運(yùn)動方式也很容易引起肌肉的延遲性酸痛。通過灌胃大鼠提取液的試驗(yàn)表明，鮑魚菇支鏈氨基酸對緩解延遲性肌肉酸痛有一定的功效。其作用機(jī)理主要是對組織細(xì)胞的營養(yǎng)和修復(fù)作用，后期還應(yīng)對延遲性肌肉酸痛產(chǎn)生的神經(jīng)傳遞進(jìn)行研究，深入研究支鏈氨基酸的作用機(jī)理。