蘇開美，馬 林，自正權，柴紅梅，李云川，李樹紅**

（1.云南省農(nóng)業(yè)科學院生物技術與種質資源研究所，云南 昆明 650202；2.江蘇省農(nóng)業(yè)科學院蔬菜研究所，江蘇 南京 210014；3.云南省楚雄州南華縣林業(yè)與草原局，云南 南華 675200）

廣義的牛肝菌包括牛肝菌科（Boletaceae） 小牛肝菌科（Boletinellaceae） 和乳牛肝菌科（Suillaceae）等多個科的真菌，我國報道有400余種，其中云南約有牛肝菌300余種[1-5]，因此云南是世界牛肝菌種類最豐富的地區(qū)之一。在這些種類中，美味牛肝菌（Boletus edulis sensu lato）、松林小牛肝菌 [Suillus pinetorum(W.F.Chiu)H.Engel&Klofac]、紅黃肉牛肝菌[Butyriboletus regius(Krombh.)D.Arora&J.L.Frank]、玫黃黃肉牛肝菌 [Butyriboletus roseoflavus(Hai B.Li&Hai L.Wei)D.Arora&J.L.Frank]、絨蓋美柄牛肝菌 [Caloboletus panniformis(Taneyama&Har.Takah.)Vizzini]、蘭茂牛肝菌 [Lanmaoa asiatica G.Wu&Zhu L.Yang]、茶褐網(wǎng)柄牛肝菌 [Retiboletus griseus(Frost)Manfr.Binder&Bresinsky]、遠東皺蓋牛肝菌 [Rugiboletus extremiorientalis(Lj.N.Vassiljeva)G.Wu&Zhu L.Yang]、中華紅牛肝菌 [Rubroboletus sinicus(W.F.Chiu)Kuan Zhao&Zhu L.Yang]、紫蓋異色牛肝菌 [Sutorius eximius(Peck)Halling,Nuhn&Osmundson]、灰褐異色牛肝菌 [Sutorius brunneissimus(W.F.Chiu)G.Wu&Zhu L.Yang]、華麗異色牛肝菌[Sutorius magnificus(W.F.Chiu)G.Wu&Zhu L.Yang]等是云南省的主要貿(mào)易牛肝菌，其中美味牛肝菌主要出口歐洲[7]，創(chuàng)匯僅次于松茸。

牛肝菌菇體富含糖類和蛋白質，菌肉細膩，口感滑潤，是珍稀的美味食用菌。世界各國均投入了大量人力、物力和財力對其引種馴化和人工栽培技術進行研究，但僅有暗褐網(wǎng)柄牛肝菌獲得成熟子實體[6]。目前能夠交易的牛肝菌主要是采集的野生資源。但由于牛肝菌自身營養(yǎng)成分特殊，在野外生境和采摘后常溫儲運以及銷售過程中易受雙翅目蟲害影響。根據(jù)前期調(diào)查發(fā)現(xiàn)[8]，危害牛肝菌的害蟲種類較多，其中最主要類群是雙翅目昆蟲，以幼蟲鉆蛀危害菇體，造成組織內(nèi)部蟲道密布，使菇體松軟，造成菇體腐爛變質，品質下降，失去商品性。

目前，蟲害和幼菇采集（長度小于5 cm的子實體）是制約牛肝菌產(chǎn)業(yè)發(fā)展的主要因素，針對產(chǎn)業(yè)發(fā)展過程中出現(xiàn)的問題，開展牛肝菌保育及蟲害防治試驗，以期為產(chǎn)業(yè)提質增效提供技術支撐。

1 試驗背景

1.1 試驗地點

試驗基地位于云南省楚雄彝族自治州南華縣沙橋鎮(zhèn)山場村，海拔1 980 m，年平均氣溫18℃，年降雨量840 mm，坡向東南。主要生長云南松（Pinus yunnanensis Franch.）等喬木樹種，有少量灌木，草的蓋度約40%。保育區(qū)示范面積約20 hm2，于2019年選擇其中條件相對一致的樣地開展蟲害防治試驗。

1.2 試驗地生長的主要牛肝菌種類

試驗地主要生長的牛肝菌種類見圖1。

由圖1所示，試驗樣地內(nèi)主要的牛肝菌種類有白牛肝菌（Boletus bainiugan）、遠東皺蓋牛肝菌、茶褐網(wǎng)柄牛肝菌、蘭茂牛肝菌等。

1.3 害蟲種類

牛肝菌常見蟲害危害狀見圖2。

由圖2所示，牛肝菌的菌柄基部及菌蓋均遭受了不同程度的蟲害，危害牛肝菌的害蟲主要有菌蚊Sciophila sp.、癭蚊 Lycoriclla sp.、異遲眼蕈蚊（Bradysia difformis Frey）、麗蠅 Chrysomya sp.等雙翅目害蟲，其中眼蕈蚊科和蚤蠅科害蟲為優(yōu)勢種群。雙翅目成蟲在菌塘周圍產(chǎn)卵后，孵化的幼蟲從牛肝菌子實體菌柄基部鉆蛀進入蛀空菌柄，嚴重影響牛肝菌的品質，平均危害率達到40%以上，高溫高濕季節(jié)達到60%以上[8]，造成嚴重的經(jīng)濟損失。

2 試驗方法

2.1 藥劑選擇

1 200 ITU·mg-1蘇云金芽孢桿菌以色列變種（Bacillus thuringiensis sub sp.Isrealensis），簡稱 Bti，由武漢科諾生物科技股份有限公司生產(chǎn)；1%印楝素水分散粒劑，由成都綠金生物科技有限責任公司生產(chǎn)。

2.2 試驗分組

試驗組1：面積0.4 hm2，建設圍欄，對林地實施封閉式管理，適時采收，3 d～4 d采收1次。試驗組2：在試驗組1的基礎上，用生物制劑蘇云金芽孢桿菌以色列變種Bti粉劑3 kg與干燥的森林土45 kg混合均勻后撒在林地里防治雙翅目害蟲，共防治3次。第1次防治時間是2019年5月23日，后每次防治間隔約12 d，選擇未下雨時撒藥。試驗組3：在試驗組1的基礎上，用植物源殺蟲劑印楝素（1%水分散粒劑）250 g兌自來水225 kg，充分溶解后噴灑在林地內(nèi)防治雙翅目害蟲。防治3次，第1次防治時間是2019年5月23日，后每次防治間隔約12 d，選擇未下雨時噴灑。以0.4 hm2面積，每天采菇1次為對照。

2.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析

采收時認真記錄牛肝菌種類、數(shù)量、重量、經(jīng)濟價值，以及每種牛肝菌蟲害情況。

3 結果與分析

3.1 牛肝菌保育試驗

2019年7月12日采集第一批菇，10月29日采集最后一批菇，保育及蟲害防治試驗結果統(tǒng)計見表1、表2、表3。

表1 牛肝菌保育試驗觀測記錄表Tab.1 Observation record of boletes conservation test

由表1可知，適時采收（試驗組1～試驗組3）可以明顯增加牛肝菌子實體重量，試驗組1所得牛肝菌總重量（26.45 kg） 是對照（10.43 kg） 的2.5倍，經(jīng)濟價值是對照5.46倍。因此，開展牛肝菌保育，實施適時采收能顯著提高牛肝菌的產(chǎn)量和經(jīng)濟價值。但僅靠適時采收無法減少蟲害引起的經(jīng)濟損失，試驗組2經(jīng)濟價值最高為14 590元/hm2，為對照組的12.6倍，適時采收與生物藥劑相結合的方法可以明顯降低蟲害率（試驗組2、試驗組3），增加子實體重量，從而顯著提高經(jīng)濟價值。

3.2 牛肝菌雙翅目蟲害防治試驗結果

統(tǒng)計試驗組1、試驗組2、試驗組3牛肝菌子實體在2019年采收時的蟲害發(fā)生情況見表2。

表2 2019年牛肝菌保育及蟲害防治試驗觀測統(tǒng)計表Tab.2 Observation statistics of boletes conservation and pest control experiment in 2019

由表2可知，試驗組1共采集到291個子實體，其中無蟲子實體143個，有蟲子實體148個，有蟲子實體個數(shù)與無蟲子實體個數(shù)相近；試驗組2共采集到344個子實體，其中無蟲子實體313個，有蟲子實體31個；試驗組3共采集到336個子實體，其中無蟲子實體295個，有蟲子實體31個。統(tǒng)計結果顯示，采用生物制劑防治后有蟲子實體明顯減少。各試驗組保育及蟲害防治危害見表3。

表3 2019年牛肝菌保育及蟲害防治危害（以百分率統(tǒng)計）觀測記錄表Tab.3 Observation record of percentage of boletes conservation and pest control in 2019

由表3所示，試驗組1（對照） 危害百分率觀測統(tǒng)計結果可以看出7月、8月危害最嚴重，9月、10月蟲害逐漸下降，是因為7月、8月溫度較高，9月、10月氣溫逐漸下降。處理2（Bti），處理3（印楝素）在5月～6月期間使用，即使在溫度較高的7月、8月，蟲害也顯著很少，說明用Bti和印楝素防治野生牛肝菌害蟲起到顯著的效果。

3.3 牛肝菌雙翅目蟲害防治試驗結果分析

2019年牛肝菌雙翅目蟲害防治試驗結果統(tǒng)計分析，按照可數(shù)資料百分率的差異顯著性測驗。本試驗屬于大樣本資料，所以用u檢驗，3個試驗組差異顯著性檢測結果見表4。

表4 試驗組差異顯著性檢測分析結果Tab.4 Significant test results of experimental groups

由表4可知，∣u2∣為16.54＞2.58，故p2與p1間有極顯著差異。∣u3∣=14.92＞2.58，故p3與p1間有極顯著差異。∣u2∣＞∣u3∣，說明處理 2比處理3效果好。測驗結果說明Bti及印楝素均可以用于防治牛肝菌雙翅目害蟲，而且Bti比印楝素防治效果好。

4 討論與結論

從牛肝菌保育試驗結果可知，由于對照組采收的大部分是2 cm左右的小幼菇，單個子實體平均重量僅35 g，市場價約30元/kg，每公頃的經(jīng)濟收益只有1 158元。試驗組1采收的牛肝菌子實體高約6 cm以上，平均單個子實體的重量為92 g，每公頃經(jīng)濟收益為6 326元。開展牛肝菌保育工作，實現(xiàn)適時采收，可使經(jīng)濟效益顯著提高，每公頃可增加經(jīng)濟收入5 168元。在保育的基礎上用Bti或印楝素防治牛肝菌雙翅目害蟲，牛肝菌品質顯著提高，除掉材料及勞動力成本1 000元/hm2，每公頃分別可以增收13 590元和10 701元，說明在適時標準化采收的基礎上，使用Bti和印楝素防治牛肝菌為主的野生菌雙翅目害蟲能顯著提高牛肝菌的品質從而顯著提高以牛肝菌為主的野生菌的經(jīng)濟收益，而且未對牛肝菌的生長產(chǎn)生不良影響。在2019年3月～2019年6月期間試驗地幾乎沒有下雨，是歷史上少有的干旱年份，總產(chǎn)量比正常年份減少50%以上。若按照正常年份產(chǎn)量估算，該試驗地產(chǎn)量、產(chǎn)值均能增加1倍。

牛肝菌雙翅目蟲害防治試驗結果按照可數(shù)資料百分率的差異顯著性測驗，使用生物藥劑防治后與對照有極顯著差異。從防治效果來看，Bti防治效果較好，整個出菇期比對照蟲害減少41.85%。而且Bti在7月的防治效果最好，蟲害僅5.43%，比同期對照減少62.43%。印楝素防治效果略低于Bti，整個出菇期印楝素比同期對照平均減少蟲害38.66%，在7月的防治效果也較好，蟲害僅16.09%，比同期對照減少51.77%。牛肝菌蟲害在7月、8月大量爆發(fā)，9月、10月數(shù)量逐漸減少，與當?shù)貧鉁赜泻艽箨P系，試驗結果也說明對于雙翅目蟲害的防治應在出菇季到來前開展。

蘇云金桿菌（Bacillus thuringiensis，Bt），是當今應用最廣且最有效的一種微生物農(nóng)藥，在芽孢形成的同時產(chǎn)生具有殺蟲活性伴孢晶體，可作用于昆蟲中腸使其致死。此外，Bt還含有營養(yǎng)期殺蟲蛋白、幾丁質酶、自身誘導物抑制蛋白等許多能夠增強自身殺蟲活性的生物活性成分[9]。Bt殺蟲范圍極廣，包含節(jié)肢動物門中的雙翅目、鱗翅目、鞘翅目等9個目的昆蟲以及線形動物門、原生動物門和扁形動物門中的某些有害種類[10]。Bt對目標性害蟲具有特異性的毒殺作用，但對非目標性生物安全，因其高效、專一和對人畜無害的優(yōu)點，倍受研究者的青睞。Bti是Bt眾多亞種、變種中對雙翅目蟲害有明顯殺蟲活性且應用較廣的菌株[11]，對雙孢蘑菇（Agaricus bisporus）、秀珍菇（Pleurotus ostreatus）、平菇（Pleurotus spp.）等多種食用菌栽培中出現(xiàn)的菇蚊、菇蠅幼蟲防治效果顯著[12]。印楝素是目前世界上最優(yōu)秀的植物源農(nóng)藥，具有拒食、抑制生長發(fā)育、誘導細胞凋亡和自噬的作用，對昆蟲幼蟲和成蟲均有效果[13]。

Bti作為微生物殺蟲劑，印楝素是植物源殺蟲劑，按照使用說明使用對人畜安全[11，13]。推廣牛肝菌保育及蟲害防治技術效果好，具有較好的經(jīng)濟效益。云南92%以上都是山區(qū)，管理好這些得天獨厚的資源，是脫貧致富、實現(xiàn)鄉(xiāng)村振興的重要措施。實施牛肝菌保育及蟲害防治技術，可有效改善林份質量，減少水土流失，改善生態(tài)環(huán)境；實施牛肝菌保育及蟲害防治技術，只要管好，適時采收，勞動強度小，可提高山區(qū)群眾的生活質量。在交通便利，且易生長牛肝菌及各類野生食用菌的地方，實施牛肝菌等野生菌保育技術，同時開展鄉(xiāng)村旅游，讓游客體驗采蘑菇、品蘑菇的樂趣，可提高牛肝菌及其它野生食用菌的經(jīng)濟價值，增加農(nóng)民收入。