姚 強,宮志遠,黃春燕,韓建東,趙升遠,張元祺,李 瑾,謝紅艷,楊 鵬
(山東省農(nóng)業(yè)科學院農(nóng)業(yè)資源與環(huán)境研究所,農(nóng)業(yè)部廢棄物基質(zhì)化利用重點實驗室,山東 濟南 250100)
真姬菇(Hypsizygus marmoreus) 屬擔子菌亞門(Basidiomycotina) 層菌綱 (Hymenomycetes) 傘菌目(Agaricales) 白蘑科(Tricholomataceae) 玉蕈屬(Hypsizygus)[1-3]。真姬菇口感獨特,擁有典型的蟹香味,食用味道鮮美,營養(yǎng)價值豐富[4],且具有多種保健功能[5-6]。倍受消費者青睞。作為大宗消費產(chǎn)品,真姬菇內(nèi)含多種蛋白質(zhì)、氨基酸和維生素[7],具有防便秘、抗氧化、抗衰老、提高免疫力等效果[8-10]。且其貨架期較其他菇種長、耐存儲,還具有高蛋白、低熱量、低脂肪的特點[11]。真姬菇市場化分類包括純白色和淺灰色兩種品系,其中,純白色品系又稱白色真姬菇、白色蟹味菇、白玉蕈、白玉菇、玉龍菇等[12-13],淺灰色品系稱為蟹味菇、灰蟹菇、斑玉蕈、荷葉離褶傘等,是我國規(guī)模化、工廠化栽培程度較高的食用菌主栽品種之一,現(xiàn)國內(nèi)主要產(chǎn)地為上海、福建、山西、山東、河南、河北等地[14-15]。
山東地區(qū)依托區(qū)域資源稟賦,白玉菇生產(chǎn)規(guī)模大,工廠化程度高,但適宜區(qū)域工廠化栽培的白玉菇品種較少,且在實際栽培過程中存在生長周期過長、抗逆性差,抗雜菌能力弱,易受限于栽培產(chǎn)地和環(huán)境,從而提高了成本,對企業(yè)的生產(chǎn)效益有所影響[16-17]。本研究通過對13株市場主栽白玉菇品種進行品種比較試驗進行評價,旨在為山東地區(qū)白玉菇工廠化生產(chǎn)優(yōu)質(zhì)菌種的篩選提供技術(shù)參考。
參與試驗所用白玉菇品種均從國內(nèi)公司、科研院所等渠道收集。菌種編號及來源如表1所示。
表1 白玉菇供試菌種編號及來源Tab.1 Number and source of white Hypsizygus marmoreus tested
母種培養(yǎng)基:普通市售PDA培養(yǎng)基。
液體菌種培養(yǎng)基:白砂糖0.3%、玉米粉0.3%,磷酸二氫鉀0.05%、硫酸鎂0.05%,水1 L。
栽培培養(yǎng)基:玉米芯30%、棉籽殼20%、豆秸10%、麩皮16%、啤酒糟5%、米糠5%、甜菜渣10%、豆粕2%、貝殼粉2%。
1.3.1 母種制備及活化
將保存菌株接入PDA平板培養(yǎng)基中進行活化培養(yǎng),25℃恒溫生化培養(yǎng)箱中培養(yǎng),待菌絲滿管接入液體菌種培養(yǎng)基中。
1.3.2 液體菌種制備
按比例稱取原料,200 mL置于500 mL規(guī)格三角瓶中,121℃、101 kPa條件下高壓滅菌40 min,每個菌株各做3次重復,于22℃、190 r·min-1搖床培養(yǎng)8 d。觀察菌絲體形態(tài)大小及測定菌絲濕重、菌絲均一性、菌液pH等[18-19]。
1.3.3 栽培試驗
將栽培培養(yǎng)基按比例配制好后裝瓶,中間打5孔,于121℃、0.13 MPa條件下滅菌4 h,出鍋將菌瓶移入預冷室,待培養(yǎng)料溫度降至室溫在環(huán)境下機械化接種,每瓶接種量為20 mL。接種后在培菌室里于溫度18℃、相對濕度70%條件下養(yǎng)菌,待菌絲長滿瓶后繼續(xù)進行菌絲后熟培養(yǎng),共計85 d~90 d后進行搔菌,并移入出菇房進行出菇培養(yǎng)。
1.3.4 出菇階段培養(yǎng)及采收
前期將出菇房溫度調(diào)整至10℃進行低溫刺激菇蕾形成,待菇柄長至瓶口1 cm時,將出菇房室溫度調(diào)至15℃,每日補光,200 lx、強光光照3 h,菇房相對濕度保持90%~95%,適量通風。等菇柄長至6 cm~8 cm、菇蓋直徑長至2 cm~4 cm且未開傘時即可采收。觀察并記錄不同菌株菌絲生長情況,接種后記錄第10天、第20天、第30天和第40天開始連續(xù)3 d記錄的菌絲平均生長速度值進行計算,并記錄滿瓶時間、搔菌至原基形成時間、菌蓋分化時間等等,以便于計算不同品種的生長周期[20]。
1.3.5 子實體農(nóng)藝性狀測定
試驗設(shè)置3個重復,觀察并記錄子實體菌蓋顏色、大小、厚度,菌柄長度、直徑以及單株鮮重、生物學效率等[21],進行綜合分析。生物學效率(P,%) 公式為:
P=m1/m2×100
式中:m1表示平均單產(chǎn)(g);m2表示培養(yǎng)料干重 (g)。
白玉菇菌絲生長特性情況見表2。
表2 白玉菇菌絲生長特性Tab.2 Mycelium growth characteristics of white Hypsizygus marmoreus
由表2可以看出,不同品種間菌絲培養(yǎng)存在較大差異,其中H3、H4、H9、H12這四個菌種表現(xiàn)優(yōu)于其他菌種,其中H3菌絲日均生長速度為6.12 mm·d-1,菌絲生長快,菌絲密集且粗壯,液體培養(yǎng)形態(tài)表現(xiàn)為菌球大小均勻,菌液澄清,菌絲體濕重為19.56 g·mL-1,菌絲長勢優(yōu)于其他菌種。H4、H9、H12次之,菌絲生長速度分別為5.91 mm·d-1、6.05 mm·d-1、5.96 mm·d-1,菌絲生長較快,菌絲較為粗壯,長勢良好,菌絲濕重分別為17.21 g·100-1mL-1、19.11 g·100-1mL-1、18.87 g·100-1mL-1。H10 和 H11 兩個菌種表現(xiàn)最劣勢,菌絲生長緩慢,稀疏且長勢一般,菌絲生長速度分別為5.13 mm·d-1、4.97 mm·d-1,菌絲球大小不均勻,菌液較澄清,其中H10菌球呈碎片化,H11菌球表面光滑。試驗可以看出,H3、H9菌種穩(wěn)定性較好,H10和H11兩個菌種菌絲具有易老化的特點,不利于傳代培養(yǎng)。
白玉菇菌絲生長速度統(tǒng)計見表3。
表3 白玉菇菌絲生長速度Tab.3 Growth rate of mycelium of white Hypsizygus marmoreus
各白玉菇品種栽培瓶菌絲長勢表現(xiàn)略有差異。由表3可知,H3、H9、H12菌絲體呈白色,菌瓶內(nèi)無黃斑出現(xiàn),吃料及菌絲爬壁效果良好,生產(chǎn)周期較其他品種縮短5 d~7 d,性狀表現(xiàn)俱佳,可進一步優(yōu)化,作為長期的生產(chǎn)菌種備選。H4、H8、H13三個品種表現(xiàn)相對較好,生產(chǎn)周期較其余品種縮短3 d~5 d。除此之外,其余菌種多數(shù)菌瓶出現(xiàn)黃斑,且吃料速度中等或較慢,其中H10品種表現(xiàn)較差,生產(chǎn)周期最長為124 d,菌瓶內(nèi)部出現(xiàn)少量黃斑,且吃料爬壁速度緩慢,菌種表現(xiàn)不穩(wěn)定,不宜長期作為生產(chǎn)菌種。
白玉菇農(nóng)藝性狀特點情況見表4。
表4 白玉菇農(nóng)藝性狀特點Tab.4 Agronomic characteristics of white Hypsizygus marmoreus
由表4可知,通過測定白玉菇子實體的菌柄長度、直徑、菌蓋厚度等指標分析可得,各品種子實體外觀性狀差異不大,其中菌株H9的平均單產(chǎn)量及生物學效率最高,分別為324.3 g/瓶、92.77%。H3、H1平均單產(chǎn)量分別為304.7 g/瓶,生物學效率分別為87.1%、86.7%。其余品種生物學效率均在75%~85%,差異表現(xiàn)不明顯,H10品種單產(chǎn)量最低,僅262.5 g/瓶,生物學轉(zhuǎn)化效率不高,疑似有退化表現(xiàn),具體還需進一步試驗進行檢測證明。
白玉菇商品性狀統(tǒng)計情況見表5。
表5 白玉菇商品性狀Tab.5 Commercial properties of white Hypsizygus marmoreus
不同品種白玉菇商品性狀有所差異。由表5可知,H3、H9、H12品種商品性狀表現(xiàn)優(yōu)異,采收期不易開傘、菇型好、生長整齊、菌叢濃密、易采收,遺傳性狀穩(wěn)定,可作為工廠化生產(chǎn)主栽品種。此外,H13、H4品種表現(xiàn)較好,采收期不易開傘,菌柄脆嫩,子實體生長整齊,菌叢較濃密,可作為生產(chǎn)備用菌種和進一步篩選優(yōu)化試驗品種。H5、H10、H11品種采收期均有少量開傘、菇型稍有不齊、菌叢較稀疏、長勢不佳,遺傳性狀相對不穩(wěn)定。疑似保藏時間過長或管理不當?shù)仍驅(qū)е戮N退化問題,還需進一步驗證,作為試驗預備菌種。
白玉菇作為我國可以工廠化生產(chǎn)的食藥兼用珍稀食用菌品種之一,對其不同地區(qū)的品種進行對比篩選試驗具有重要意義。研究表明,H3、H9、H12三個菌株可作為山東區(qū)域食用菌栽培的主要品種,適宜山東區(qū)域工廠化生產(chǎn),且遺傳性狀相對穩(wěn)定,商品性狀表現(xiàn)優(yōu)異,較其他品種可縮短生產(chǎn)周期3 d~7 d,可極大的提高企業(yè)的生產(chǎn)效率和產(chǎn)品競爭力,其中H9產(chǎn)量最高,平均單產(chǎn)為324.3 g/瓶,生物學轉(zhuǎn)化率為92.7%。在下一步的試驗中對品種的生理生化等數(shù)據(jù)進行測定,以期完善區(qū)域白玉菇工廠化生產(chǎn)技術(shù)規(guī)范。目前我國對白玉菇的研究還處于前期階段,隨著不斷深入的研究和挖掘,會使白玉菇展現(xiàn)更多的食用、藥用等價值,更好的促進食用菌產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展。