趙玉琳 陳陸琴 張謹(jǐn)華
摘要:以磯根‘葡萄蘇打帶有腋芽的莖段為外植體,研究了不同處理?xiàng)l件下的植株再生,試驗(yàn)結(jié)果表明,不定芽誘導(dǎo)的最佳培養(yǎng)基為MS+6-BA 0.4mg/L+NAA0.05mg/L,最佳生根培養(yǎng)基為1/2MS+NAA 0.3mg/L,生根率達(dá)98%。生根苗經(jīng)過適應(yīng)性鍛煉移栽,可在太原市園林綠化中推廣應(yīng)用。
關(guān)鍵詞:磯根;‘葡萄蘇打;組織培養(yǎng);快繁
礬根(Heuchera micrantha)為虎耳草科磯根屬植物,原產(chǎn)美洲中部,為多年生耐寒性草本,葉基生,品種繁多,各品種葉色不同,喜溫涼,厭炎熱,是少有的彩葉陰生地被植物[1]。在冬季溫暖地區(qū),葉子四季不凋,覆蓋力強(qiáng),花葉兼美,適合做花鏡、花壇、地被材料或庭院綠化材料[2]。彩葉植物因其色彩富于變化,彩葉期長,觀賞價(jià)值較高,能夠豐富景觀色彩,烘托園林氣氛,彌補(bǔ)園林綠化中淡花期色彩單調(diào)的問題,所以彩葉植物在城市綠化建設(shè)中發(fā)揮著越來越重要的作用,并日益受到園林工作者的喜愛[3]。礬根因品種不同,有種子繁殖的,但種子發(fā)芽慢且不整齊;有分株繁殖的,但無法獲得大量礬根苗滿足市場需求[4]。通過植物組織培養(yǎng)技術(shù)對礬根‘葡萄蘇打進(jìn)行了快速繁殖,為規(guī)?;a(chǎn)提供依據(jù)。
1 材料與方法
1.1 試驗(yàn)材料
試驗(yàn)于2017~1018年在太原植物園進(jìn)行,供試材料為礬根‘葡萄蘇打。4月初取帶腋芽的幼嫩莖段作為外植體。
1.2 試驗(yàn)方法
1.2.1 無菌外植體的獲得。在盆栽的礬根‘葡萄蘇打上剪取帶腋芽的莖段,用洗衣粉浸泡10min,并在流水下沖洗1h,在超凈工作臺上用濾紙吸干莖段上的水分,75%酒精消毒20s,0.1%的氯化汞溶液洗滌1-3min,無菌水沖洗5-6次,無菌濾紙吸干莖段表面水分,接種到初代培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)。
1.2.2 培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件?;九囵B(yǎng)基:MS培養(yǎng)基,均加蔗糖30g/L,瓊脂6g/L,pH值5.8~6.2。培養(yǎng)條件:溫度控制在25±2℃,光照時(shí)間為12h/d,光照強(qiáng)度為2000Lx。
1.2.3 誘導(dǎo)培養(yǎng)基的篩選。以MS為基本培養(yǎng)基,添加不同濃度的6-BA 0.1~1mq/L和NAA 0.01~0.05mq/L的芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基上,觀察生長和誘導(dǎo)情況,確定最適合礬根‘葡萄蘇打的初始培養(yǎng)基。
1.2.4 增殖培養(yǎng)基的篩選。在誘導(dǎo)芽的初代培養(yǎng)基上,通過調(diào)節(jié)植物激素6-BA與NAA的濃度,篩選最佳增殖培養(yǎng)基,25d為1個(gè)繼代周期。
1.2.5 生根培養(yǎng)基的篩選。基本培養(yǎng)基為1/2MS,瓊脂6g/L,蔗糖15g/L,添加不同濃度的NAA,觀察磯根‘葡萄蘇打試管苗生根的情況,30d后統(tǒng)計(jì)生根率。
1.2.6 煉苗移栽。生根的試管苗具有5條以上的正常根即可進(jìn)行移栽。先在煉苗室放置3d,然后在溫室打開瓶蓋煉苗2d,以培養(yǎng)基不染菌為宜。用鑷子取出組培苗,將其基部的培養(yǎng)基洗干凈,移入珍珠巖:泥炭土=1:1的穴盤中,放入小拱棚,移栽7d內(nèi)進(jìn)行50%~70%遮蔭,保證溫度在25℃左右,濕度在85%左右。
2 結(jié)果與分析
2.1 無菌苗的獲得
礬根作為一種多年生草本植物莖段比較嫩,不同消毒時(shí)間對磯根試管苗培養(yǎng)有一定的影響。在試驗(yàn)過程中發(fā)現(xiàn)氯化汞消毒時(shí)間為1min時(shí),外植體不會受到損傷,但污染嚴(yán)重,污染率達(dá)90%。當(dāng)消毒時(shí)間為3min時(shí),外植體的污染率較低,但外植體受損嚴(yán)重,在培養(yǎng)過程中出現(xiàn)褐化等現(xiàn)象,大多數(shù)外植體死亡,導(dǎo)致試管苗的獲得率降低。試驗(yàn)表明礬根‘葡萄蘇打用75%9精20s,0.1%的氯化汞消毒2min效果最佳,污染率達(dá)30%。
2.2 外源激素對礬根‘葡萄蘇打初期誘導(dǎo)的影響
礬根‘葡萄蘇打腋芽在MS+6-BA 1.0mg/L+NAA0.1mg/L培養(yǎng)基上20d左右均可產(chǎn)生愈傷組織,30d誘導(dǎo)出大量不定芽,芽嫩,芽高整齊,叢狀,誘導(dǎo)率可達(dá)100%。
2.3 增殖培養(yǎng)基的篩選
選取粗壯且長勢相同的磯根‘葡萄蘇打誘導(dǎo)苗接種到增殖培養(yǎng)基中繼代培養(yǎng)。隨著繼代次數(shù)的增加,叢生芽會出現(xiàn)玻璃化現(xiàn)象,降低激素使用濃度,減少玻璃化程度,在MS+6-BA 0.4mg/L+NAA 0.05mg/L培養(yǎng)基中,芽玻璃化現(xiàn)象較低,芽增殖率最高,可達(dá)82%,有效芽較多,且生長周期短。
2.4 生根及試管苗移栽成活情況
選取高度2cm的壯苗接種于1/2MS+NAA0.3mg/L的生根培養(yǎng)基上,30d后苗生根率為98%,根長2~3cm,生根5~8條,苗高4~6cm。經(jīng)煉苗移栽,成活率可達(dá)100%,經(jīng)過大田栽植能夠安全越冬。
3 小結(jié)
該研究發(fā)現(xiàn)礬根‘葡萄蘇打在MS+6-BA0.4mg/L+NAA 0.05mg/L培養(yǎng)基中增殖率能夠達(dá)到最高,分化出的苗可直接轉(zhuǎn)人1/2MS+NAA 0.3mg/L生根培養(yǎng)基中進(jìn)行生根,且生根效果較好,每個(gè)外植體能夠生根5條以上,這樣可以縮短培養(yǎng)周期,降低生產(chǎn)成本,滿足工廠化生產(chǎn)的需求。生根苗經(jīng)鍛煉5d后移栽到珍珠巖:泥炭土=1:1的基質(zhì)中,成活率可達(dá)98%以上。(收稿:2019-07-30)
參考文獻(xiàn):
[1]高燕,宋垚,等.礬根歐布西迪昂組培快繁技術(shù)[J].浙江農(nóng)業(yè)科學(xué),2015,56(06):895-898.
[2]張德祥,張君艷.新優(yōu)觀葉花卉礬根的栽培管理技術(shù)[J].林業(yè)實(shí)用技術(shù),2014(04):62-63.
[3]袁麗麗,王瑞.新優(yōu)彩葉植物引種栽培及其園林應(yīng)用[J].黑龍江農(nóng)業(yè)科學(xué),2016(10):95-97.
[4]陳宏,唐瑩,等.礬根的組織培養(yǎng)與快速繁殖[J].上海農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2011,27(04):80-82.
作者簡介:趙玉琳(1989-),女,山西靈石人,助理工程師,主要從事園林綠化研究。