畢 珊 楊紹群 吳文毅 吳玉田 劉文政

(貴州省疾病預(yù)防控制中心，貴州 貴陽 550004)

血鉛濃度反應(yīng)人體近期鉛的攝入量，常作為體內(nèi)暴露水平的重要指標(biāo)[1]。石墨爐原子吸收光譜法是目前檢測(cè)血鉛的常用方法，但由于鉛的熔點(diǎn)低、血液黏度高、基體成分復(fù)雜，所以諸多學(xué)者在樣品的前處理、基體改進(jìn)劑的選擇、石墨爐升溫程序的優(yōu)化等方面進(jìn)行了深入研究。目前基體改進(jìn)劑種類繁多：氯化鈀、曲通、磷酸二氫銨、硝酸鎂、抗壞血酸等都是常用的的基體改進(jìn)劑，本文在查閱相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道[2-4]基礎(chǔ)上，通過設(shè)計(jì)正交實(shí)驗(yàn)，比較5種較為常用的基體改進(jìn)劑的作用效果，以求尋找到一種能使鉛的熱穩(wěn)定性增強(qiáng)、減少基體干擾的試劑作為石墨爐原子吸收光譜法測(cè)定血鉛的基體改進(jìn)劑。

1 材料與方法

1.1 儀器

ZEEnit700型原子吸收光譜儀(德國耶拿)；配MPE60型石墨爐自動(dòng)進(jìn)樣器；鉛空心陰極燈；熱解涂層石墨管；GL-88B型旋渦混合器；微量移液器。

1.2 試劑

鉛標(biāo)準(zhǔn)溶液1000μg /mL(GBW08619 中國計(jì)量科學(xué)研究院)；氯化鈀(分析純，天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司)；硝酸(優(yōu)級(jí)純，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)；磷酸二氫銨(優(yōu)級(jí)純，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)；硝酸銨(分析純，重慶茂業(yè)化學(xué)試劑有限公司)；硝酸鎂(分析純，天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司)；抗壞血酸(分析純，上海試四赫維化工有限公司)；

實(shí)驗(yàn)用水均為超純水(18.25兆歐)；所用器皿均用硝酸(1+3)浸泡過夜，去離子水沖凈晾干備用。

鉛標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液制備：將1000μg/mL的鉛標(biāo)準(zhǔn)溶液用1%硝酸逐級(jí)稀釋為40μg/L的鉛標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液。

0.1%基體改進(jìn)劑：稱取0.1g基體改進(jìn)劑，用1%硝酸溶解后定容至100mL，混勻備用。

1.3 儀器工作條件

波長283.3nm；燈電流4.0mA；狹縫0.8nm；載氣：氬氣；塞曼背景校正；樣品進(jìn)樣量20μL。

1.4樣品制備

吸取1.6mL 0.1%基改劑于2mL去鉛處理過的EP管中，加入0.2mL新生牛血和0.2mL 40ug/L鉛標(biāo)應(yīng)用液，在旋渦混合器上混勻成稀釋血樣，待測(cè)。

1.5樣品檢測(cè)

使用儀器配置的石墨爐自動(dòng)進(jìn)樣器，將樣品溶液放在樣品盤上，通過設(shè)置儀器條件測(cè)定吸光度值。

2 結(jié)果與討論

2.1 正交實(shí)驗(yàn)篩選基改劑

除了基改劑的影響外，石墨爐原子吸收光譜法測(cè)定血鉛分析中升溫程序的控制也非常重要，其中石墨爐的灰化溫度、灰化時(shí)間、原子化溫度和原子化時(shí)間4個(gè)因素對(duì)測(cè)定靈敏度影響很大。本文各選擇了5個(gè)水平，選用L25(55)正交表安排實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)方案、測(cè)定結(jié)果及基本計(jì)算見表1。

表1 L25(55)正交表實(shí)驗(yàn)方案、測(cè)定結(jié)果及基本計(jì)算

由表1可見，最佳條件為：磷酸二氫銨為基改劑首選，灰化溫度：600℃或700℃，原子化溫度：1800℃，灰化時(shí)間：7S，原子化時(shí)間：5s，但該方案不一定是實(shí)際最佳方案。從極差分析結(jié)果看出：灰化溫度對(duì)稀釋血樣的吸光度影響最大；以硝酸銨、硝酸鎂、抗壞血酸作為基改劑時(shí)，當(dāng)灰化溫度到800℃后，吸光度值急劇下降，但在此灰化溫度下，血液中的大部分干擾成分難以清除，基體干擾很大，顯然不能用這三種試劑作為石墨爐原子吸收測(cè)定血鉛的基改劑；另外，抗壞血酸穩(wěn)定性差、會(huì)縮短石墨管的使用壽命。

2.2 兩種基改劑結(jié)果響應(yīng)情況比較

在正交實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，為了去除更多的基體干擾和延長石墨管的壽命，以900℃作為灰化溫度，1700℃作為原子化溫度，灰化時(shí)間：7S，原子化時(shí)間：5s，考察以氯化鈀和磷酸二氫銨作為基改劑時(shí)的的結(jié)果響應(yīng)情況。結(jié)果見表2、表3。

表2 不同濃度的氯化鈀作為基體改進(jìn)劑時(shí)結(jié)果響應(yīng)情況

表3 不同濃度的磷酸二氫銨作為基體改進(jìn)劑時(shí)結(jié)果響應(yīng)情況

對(duì)表2、表3檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行對(duì)比，結(jié)果顯示：磷酸二氫胺作為基改劑時(shí)，隨著濃度的降低，吸光度值明顯降低；而采用氯化鈀作為基改劑時(shí)濃度變化對(duì)吸光度值影響不大，且RSD值明顯小于磷酸二氫胺。表明氯化鈀作為基改劑較磷酸二氫銨有明顯的優(yōu)勢(shì)。此外，氯化鈀加入后，當(dāng)灰化溫度為900℃時(shí)也未見鉛損失，增加了鉛信號(hào)的穩(wěn)定性。

3 小結(jié)

本文通過正交實(shí)驗(yàn)的設(shè)計(jì)，對(duì)磷酸二氫銨、氯化鈀、硝酸鎂、硝酸銨、抗壞血酸作為基改劑測(cè)定血鉛的響應(yīng)情況進(jìn)行考察，結(jié)果顯示：當(dāng)灰化溫度到800℃后，硝酸銨、硝酸鎂、抗壞血酸作為基改劑時(shí)的吸光度值急劇下降，顯然這三種試劑不適合作為石墨爐原子吸收測(cè)定血鉛的基改劑；對(duì)氯化鈀、磷酸二氫銨作為基改劑時(shí)的結(jié)果響應(yīng)情況進(jìn)行了對(duì)比，結(jié)果顯示，氯化鈀作為基體改進(jìn)劑效果更佳，能滿足血鉛檢測(cè)的需求。