陳艷麗 王媛媛 張 勇 李文潔

肺癌是一種發(fā)病率、病死率較高的惡性腫瘤，分為小細胞肺癌和非小細胞肺癌兩種類型。其中非小細胞肺癌占肺癌患者的80%以上［1-5］。2015 年統(tǒng)計數(shù)據(jù)顯示，我國每年約有61 萬人死于肺癌［6］。據(jù)WHO 預(yù)測，中國在2025 年后年肺癌新增病例將大于100 萬，屆時中國將成為肺癌人數(shù)最多的國家［7］。大部分肺癌患者被確診時，已經(jīng)是中晚期，喪失了根治性手術(shù)切除治療機會，目前針對于中晚期非小細胞肺癌治療更多是選擇化療。研究證實肺癌的發(fā)生發(fā)展過程與機體的免疫狀態(tài)具有密切關(guān)系［8-12］。T淋巴細胞亞群的表達狀態(tài)可以較好的反映機體的免疫狀態(tài)，在化療前后，機體的T 淋巴細胞亞群的表達狀態(tài)與化療療效的相關(guān)性，對于預(yù)測化療療效具有重要臨床價值［13］。本文通過探討中晚期非小細胞肺癌患者化療前后T 淋巴細胞亞群的表達水平差異，為肺癌的診療提供理論基礎(chǔ)。

資料與方法

一、臨床資料

選擇2014 年1 月至2018 年6 月在我院進行化療治療的中晚期非小細胞肺癌患者作為研究對象。納入標準：①患者年齡＜80 歲；②體力狀況ECOG 評分［14］在≤7 分；③病理診斷符合中晚期非小細胞肺癌診斷標準［15］；④患者肝腎功能夠耐受化療；⑤至少存在一個可測量評估的肺內(nèi)病灶，評估標準為recist1.1 標準［10］。排除標準：①妊娠期或哺乳期；②患者有3 級高血壓；③嚴重肺內(nèi)感染或者全身感染；④有血液系統(tǒng)疾病者；⑤對化療藥物過敏者；⑥中途退出治療者。符合納入標準和排除標準的患者122 例，其中男88 例，女34 例，年齡35～77 歲，平均年齡51.24 歲。同時選擇同期在我院進行健康體檢64 例作為對照，其中男48 例，女16 例，年齡42 ～65 歲，平均年齡49.57 歲。病例組和對照組基線資料，對比無差異（P＞0.05）。

二、研究方法

分別于化療治療前2 d 對病例組所有患者抽取外周血5 ml，及化療結(jié)束后抽出外周血5 ml，對照組也抽取外周血5 ml，所有樣本均在當日完成相關(guān)檢測，檢測采用流式細胞技術(shù)檢測CD3＋（%）、CD8＋（%）、CD4＋（%）、CD4＋／CD8＋細胞比值，檢測采用流式細胞檢測儀器（生產(chǎn)廠家：美國Becton Dickinson公司生產(chǎn)，型號：BD FACSCalibur），嚴格按照儀器相關(guān)說明書進行操作。

詳細記錄所有入組對象T 淋巴細胞亞群檢測結(jié)果CD3＋（%）、CD8＋（%）、CD4＋（%）、CD4＋／CD8＋細胞比值。及采用RECIST 標準評估病例組化療后患者的療效，評估時間為化療完成后3 個月，其中完全緩解（complete remission，CR），部分緩解（partial remission，PR），疾病穩(wěn)定（stable disease，SD），疾病進展（progressive disease，PD）。疾病控制（CR＋PR＋SD，DCR）。

三、統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 20.0 軟件進行數(shù)據(jù)分析。其中計數(shù)資料采用率（%）表示，采用χ2檢驗分析。計量資料以（）表示，采用t 檢驗分析，P＜0.05 表示差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。采用ROC 曲線分析T 淋巴細胞亞群預(yù)測非小細胞肺癌患者化療效果。其中P＜0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

結(jié) 果

一、病例組與對照組T 淋巴細胞亞群比較

病例組化療前及后的CD3＋（%）、CD4＋（%）、CD4＋／CD8＋細胞比值均顯著低于對照組（P＜0.05）；化療后CD3＋（%）、CD4＋（%）、CD4＋／CD8＋細胞比值均較同步化療前有顯著升高（P＜0.05）；化療前后病例組患者CD8＋（%）略高于對照組，但差異未發(fā)現(xiàn)統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），且化療前后CD8＋（%）對比，差異未發(fā)現(xiàn)統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），見表1。

二、DCR 及PD 期患者一般情況及T 淋巴細胞亞群表達

化療治療后，DCR 共90 例（73.77%），其中CR 0 例，PR 25 例（20.49%），SD 65 例（53.28%）。PD 32 例（26.23%）。DCR 期的年齡、性別與PD 期對比，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。

DCR 期與PD 期患者對比治療前CD3＋（%）、CD4＋（%）、CD8＋（%）、CD4＋／CD8＋，差異均無統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0.05），DCR 期患者治療后CD3＋（%）、CD4＋（%）、CD4＋／CD8＋顯著高于PD 期患者，差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。DCR 與PD 期患者治療后CD3＋（%）、CD4＋（%）、CD4＋／CD8＋細胞比值均顯著高于治療前。兩期患者治療后CD8＋（%）對比，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），見表2。

三、非小細胞肺癌患者化療效果預(yù)測

治療后CD3＋（%）、CD4＋（%）、CD4＋／CD8＋水平在預(yù)測非小細胞肺癌患者化療效果的AUC 面積分別為：0.789、0.823、0.758，見圖1。通過最大約登指數(shù)計算得出CD3＋（%）、CD4＋（%）、CD4＋／CD8＋指標的最大AUC 面積相應(yīng)參數(shù)截止值，其中CD3＋（%）截止值為65.95（%）（敏感度＝83.30%，特異性＝78.60%），CD4＋（%）截止值為39.81（%）（敏感度＝87.30%，特異性＝85.20%），CD4＋／CD8＋截止值為1.250（敏感度＝81.20%，特異性＝76.70%）。

圖1 ROC 曲線圖

表1 肺癌組與對照組T 淋巴細胞亞群比較

表1 肺癌組與對照組T 淋巴細胞亞群比較

組 別 例數(shù) CD3＋（%） CD4＋（%） CD8＋（%） CD4＋／CD8＋對照組 64 69.12±5.92 37.98±6.11 24.22±4.84 1.69±0.42病例組 化療前 122 57.37±5.16 27.48±6.12 25.01±5.26 1.23±0.52化療后 122 61.28±6.14 36.18±6.13 25.82±5.19 1.51±0.48

表2 疾病控制組及疾病進展組治療前及治療后的T 淋巴細胞亞群表達情況對比

討 論

近年來，我國肺癌發(fā)病率及病死率都呈明顯上升趨勢。研究證實肺癌的發(fā)生發(fā)展呈現(xiàn)受多因素影響，且其發(fā)展具有呈階段性［16-19］。隨著腫瘤免疫學(xué)方面的研究逐漸深入，越來越多的研究證實機體的免疫系統(tǒng)及免疫功能在非小細胞肺癌的發(fā)生發(fā)展過程扮演著重要作用，尤其是T 淋巴細胞亞群的表達狀態(tài)，當機體的T 淋巴細胞亞群的表達水平失衡時往往會預(yù)示著機體免疫功能處于紊亂狀態(tài)［20-22］。

T 淋巴細胞包含殺傷性T 細胞、抑制性T 細胞、誘導(dǎo)輔助性T 細胞、遲發(fā)性超敏反應(yīng)性T 細胞4 種類型［23］，成熟的T 淋巴細胞表面均可表達CD3 分子，CD3＋的T 淋巴細胞正常情況下是代表著機體總T 淋巴細胞的水平，若CD3＋（%）降低則可能提示機體免疫功能下降，數(shù)值越低，表示免疫功能越低下。成熟的T 淋巴細胞是不能同時表達CD4 分子、CD8分子，因此CD3＋細胞接近于CD4＋細胞與CD8＋細胞兩者之和［24］，其中CD4＋更多是通過分泌細胞因子、激活趨化因子、募集靶細胞等方式來調(diào)控細胞內(nèi)免疫反應(yīng)［25］，從而發(fā)揮免疫作用。生理狀態(tài)下CD4＋／CD8＋細胞比值是呈動態(tài)平衡狀態(tài)，這對穩(wěn)定維持機體細胞免疫功能有著十分重要的意義，當CD4＋／CD8＋細胞比值下降可能預(yù)示著機體T 淋巴細胞亞群處于失衡狀態(tài)，這對疾病診斷與治療，預(yù)后均有著十分重要參考價［26］。目前化療是治療中晚期非小細胞肺癌的主要手段，在殺傷腫瘤細胞的同時也會損害正常組織細胞，當然也包括機體T 淋巴細胞［27-31］。本文分析化療前后患者外周血T 淋巴細胞亞群表達水平，旨在探討胞中晚期非小細胞肺癌患者的細胞免疫功能狀況及其對預(yù)后的預(yù)測價值，從而為肺癌的治療提供一定的參考依據(jù)。

本文發(fā)現(xiàn)病例組化療前后患者的CD3＋（%）、CD4＋（%）、CD4＋／CD8＋細胞比值均顯著低于對照組（P＜0.05），提示病例組患者的免疫功能較健康人群是有所下降，這與胡靜等［26］研究報道結(jié)果具有一致性?；熀驝D3＋（%）、CD4＋（%）、CD4＋／CD8＋細胞比值均較化療前有顯著升高（P＜0.05），提示當腫瘤得到較好控制時，機體免疫功能也處于相對正常的狀態(tài)；化療前后病例組患者CD8＋（%）略高于對照組，但差異未發(fā)現(xiàn)統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），且化療前后CD8＋（%）對比，差異未發(fā)現(xiàn)統(tǒng)計學(xué)意義（P ＞0.05）?；熤委熀螅珼CR 患者共90 例（73.77%），其中CR 0 例，PR 25 例（20.49%），SD 65 例（53.28%）。PD 患者32 例（26.23%）。DCR 患者治療后的CD3＋（%）、CD4＋（%）、CD4＋／CD8＋細胞比值均顯著高于PD 患者（P＜0.05），且與對照組對比，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P ＞0.05）。治療后CD3＋（%）、CD4＋（%）、CD4＋／CD8＋水平在預(yù)測非小細胞肺癌患者化療效果的AUC 面積分別為：0.789、0.823、0.758，且具有較好的特異度和靈敏度。說明了化療后患者的外周血T 淋巴細胞亞群表達狀態(tài)有可能成為預(yù)測化療臨床效果的一種標記物。

綜上所述，中晚期非小細胞肺癌患者的T 淋巴細胞呈現(xiàn)低表達狀態(tài)，細胞免疫功能呈現(xiàn)一種紊亂狀態(tài)?；熤委煹男Ч赡芘c機體外周血T 淋巴細胞表達狀態(tài)有關(guān)，提示肺癌患者的外周血T 淋巴細胞亞群表達狀態(tài)有可能成為預(yù)測化療臨床效果的一種標記物。