張玉枝 韓正宇 耿建洪

慢性乙型肝炎是消化內(nèi)科及感染科的常見疾病，發(fā)病率較高[1]。乙型肝炎病毒(HBV)感染是導(dǎo)致慢性肝病、肝硬化、肝細(xì)胞癌等的重要原因之一，現(xiàn)已成為嚴(yán)重威脅人類健康的傳染性疾病[2]。慢性乙型肝炎的發(fā)病機(jī)制尚未完全闡明，目前研究表明，免疫細(xì)胞及相關(guān)炎性介質(zhì)與HBV清除及肝臟炎性損傷有關(guān)[3]。血管黏附蛋白-1(VAP-1)是一種內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子，主要由肝臟產(chǎn)生，其可通過蛋白酶水解為可溶性血管黏附蛋白-1(sVAP-1)，參與人體血液循環(huán)，具有促炎作用[4]。Weston等[5]的研究表明，VAP-1與細(xì)胞外基質(zhì)的重塑及肝纖維化密切相關(guān)，在肝臟疾病中具有多種功能。HBV是慢性乙型肝炎的致病原，HBV DNA水平可反映機(jī)體內(nèi)HBV復(fù)制的活躍程度。本研究探討sVAP-1水平與慢性乙型肝炎患者HBV DNA水平、肝功能指標(biāo)的相關(guān)性，以期為慢性乙型肝炎的治療提供一定參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料

本試驗(yàn)選擇2018年1月至2019年1月滄州市人民醫(yī)院收治的96例慢性乙型肝炎患者作為研究對(duì)象，將患者分為HBV DNA陽性組(HBV DNA>1.0×103拷貝/mL)60例和HBV DNA陰性組(HBV DNA≤1.0×103拷貝/mL)36例[6]。另選擇50名同期健康體檢者作為正常對(duì)照組。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)符合《病毒性肝炎防治診斷標(biāo)準(zhǔn)》[7]中乙型肝炎的診斷標(biāo)準(zhǔn)；(2)年齡為18～65歲；(3)患者均簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)其他病毒引起的肝炎；(2)患有酒精性肝炎、脂肪肝、自身免疫性肝炎等其他肝?。?3)合并其他感染性疾病或自身免疫性疾??；(4)患有腫瘤；(5)有嚴(yán)重的臟器功能損傷；(6)妊娠、哺乳期婦女。本研究經(jīng)本院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

HBV DNA陽性組60例患者中，男性38例，女性22例；年齡為20～65歲，平均年齡為(41.35±6.87)歲；體質(zhì)指數(shù)(BMI)為18.12～27.35 kg/m2，平均BMI為(21.92±2.83)kg/m2。HBV DNA陰性組中，男性20例，女性16例；年齡18～63歲，平均年齡為(41.95±6.46)歲；BMI為18.25～27.59 kg/m2，平均BMI為(22.10±2.76)kg/m2。正常對(duì)照組中，男性30例，女性20例；年齡21～65歲，平均年齡為(42.29±7.12)歲；BMI為18.11～27.73 kg/m2，平均BMI為(22.34±2.82)kg/m2。各組的一般資料的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 方法

(1)血液樣本的采集：于清晨空腹時(shí)，應(yīng)用肝素鈉抗凝真空采集管采集患者的肘靜脈血5 mL，以3 000 r/min離心10 min后，收集上清液分裝至凍存管，于-70 ℃冰箱保存待檢。同期采血檢測(cè)丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、白蛋白(Alb)、總膽紅素(TBil)及HBV DNA水平。(2)采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)sVAP-1的表達(dá)水平，試劑盒購自上海江萊生物科技有限公司。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 慢性乙型肝炎患者體內(nèi)血清sVAP-1水平分析

sVAP-1在慢性乙型肝炎組患者血清中的表達(dá)水平顯著高于正常對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 慢性乙型肝炎組與正常對(duì)照組的血清sVAP-1水平比較 ()/ng·mL-1

2.2 慢性乙型肝炎HBV DNA陽性/陰性患者血清sVAP-1水平比較

血清sVAP-1在慢性乙型肝炎HBV DNA陽性組中的表達(dá)水平高于HBV DNA陰性組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

表2 各組患者的血清sVAP-1水平比較()/ng·mL-1

注：與正常對(duì)照組比較，aP<0.05；與HBV DNA陰性組比較，bP<0.05

2.3 慢性乙型肝炎HBV DNA陽性/陰性患者的肝功能指標(biāo)比較

慢性乙型肝炎HBV DNA陽性/陰性患者的ALT、AST、TBil水平顯著高于正常對(duì)照組，Alb水平顯著低于正常對(duì)照組(P<0.05)。HBV DNA陽性組ALT、AST、TBil水平顯著高于HBV DNA陰性組，Alb水平顯著低于HBV DNA陰性組(P<0.05)。見表3。

表3 各組患者的肝功能指標(biāo)比較 ()

注：與正常對(duì)照組比較，aP<0.05；與HBV DNA陰性組比較，bP<0.05

2.4 慢性乙型肝炎患者sVAP-1與HBV DNA及肝功能指標(biāo)的相關(guān)性分析

sVAP-1與HBV DNA、ALT、AST、TBil呈正相關(guān)(P<0.05)，與Alb呈負(fù)相關(guān)(P<0.05)。見表4。

表4 慢性乙型肝炎患者sVAP-1與HBV DNA及肝功能指標(biāo)的相關(guān)性分析

3 討論

慢性乙型肝炎是常見的消化系統(tǒng)疾病，可導(dǎo)致HBV在患者體內(nèi)持續(xù)復(fù)制，造成免疫病理損傷，現(xiàn)已成為全球性公共衛(wèi)生問題[8]。目前，臨床上治療慢性乙型肝炎仍以抗病毒治療為主，但相關(guān)藥物只能起到抑制HBV復(fù)制的作用，而不能徹底殺滅病毒，導(dǎo)致療效欠佳[9]。因此，使機(jī)體產(chǎn)生有效的免疫應(yīng)答是抑制HBV復(fù)制的關(guān)鍵，也是臨床研究的重要方向。VAP-1是一種膜結(jié)合的胺氧化酶，具有雙重功能，可通過細(xì)胞黏附作用顯示促炎效應(yīng)，還可通過酶反應(yīng)產(chǎn)物上調(diào)多種促炎介質(zhì)的表達(dá)水平，引發(fā)炎性反應(yīng)[10-12]。國外研究顯示，肝硬化患者中VAP-1的表達(dá)水平升高，纖維化肝病患者循環(huán)中sVAP-1的水平也明顯升高，該研究進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)，VAP-1不僅支持淋巴細(xì)胞和肝星狀細(xì)胞的募集，而且可調(diào)節(jié)細(xì)胞外基質(zhì)的重塑及肝纖維化形成，提示VAP-1在肝臟疾病中具有多種功能[13]。Kraemer等[14]研究發(fā)現(xiàn)，慢性丙型肝炎感染者血漿VAP-1水平隨著纖維化的嚴(yán)重程度增高而升高，并且在肝硬化患者中顯著升高，該研究還推測(cè)血漿VAP-1水平可能是監(jiān)測(cè)慢性肝病患者隨訪過程中纖維生成的一項(xiàng)指標(biāo)。VAP-1具有致炎效應(yīng)，在炎性疾病患者中的表達(dá)水平較高，而且常以水解形式(即sVAP-1)參與炎性反應(yīng)的發(fā)生機(jī)制，肝臟是產(chǎn)生VAP-1的重要器官，但目前關(guān)于sVAP-1在肝臟疾病中作用的報(bào)道較少。

本研究結(jié)果顯示，慢性乙型肝炎組中血清sVAP-1水平顯著高于正常對(duì)照組。Weston等[15]研究顯示，在炎性肝病患者的肝臟組織和血清中VAP-1表達(dá)上調(diào)，與本研究結(jié)果相符。該研究還發(fā)現(xiàn)，小鼠肝損傷模型中VAP-1的缺失或VAP-1酶功能的抑制可減少炎性細(xì)胞向肝臟募集，并減輕纖維化。因此，靶向VAP-1在抑制肝臟炎性反應(yīng)和纖維化方面具有潛在的治療作用。

本研究結(jié)果顯示，HBV DNA陽性組的血清sVAP-1水平高于HBV DNA陰性組，經(jīng)相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)，sVAP-1水平與HBV DNA水平呈正相關(guān)。目前已有研究證實(shí)，慢性乙型肝炎患者的血清HBV DNA水平與肝實(shí)質(zhì)損傷、肝臟儲(chǔ)備能力及肝組織纖維化密切相關(guān)，可在一定程度上反映慢性乙型肝炎患者病情的嚴(yán)重程度[16]。sVAP-1可介導(dǎo)炎性反應(yīng)，反映肝臟炎性損傷及肝纖維化，推測(cè)其也可能參與了慢性肝病的進(jìn)展。另外，HBV感染、治療與患者免疫應(yīng)答有關(guān)，但慢性乙型肝炎患者常不能產(chǎn)生有效的免疫應(yīng)答，因此對(duì)HBV的清除一直是臨床治療的難題。HBV DNA疫苗可有效引起機(jī)體對(duì)HBV的免疫反應(yīng)，但其在體內(nèi)長期存在是否會(huì)引起嚴(yán)重不良反應(yīng)目前尚未可知，其安全性問題也一直是HBV DNA疫苗不能應(yīng)用于臨床的重要阻礙[17]。本次研究結(jié)果指出，sVAP-1水平與HBV DNA呈正相關(guān)，可能參與了慢性乙型肝炎的進(jìn)展過程，而且其還可直接介導(dǎo)機(jī)體內(nèi)炎性反應(yīng)，參與免疫調(diào)節(jié)，或許對(duì)慢性乙型肝炎的治療具有重要的潛在意義。目前已有研究表明，sVAP-1與炎性疾病、糖代謝相關(guān)疾病、慢性阻塞性肺病等有關(guān)，相關(guān)免疫抑制劑也在動(dòng)物模型中顯示出顯著的療效及良好的安全性[18-19]。因此，sVAP-1可能對(duì)慢性乙型肝炎的治療有重要意義，具有很好的應(yīng)用前景。

ALT、AST、TBil水平是反映肝臟炎性損傷的重要指標(biāo)，Alb是反映肝臟代謝功能的重要指標(biāo)，有文獻(xiàn)報(bào)道，肝臟的炎性活動(dòng)度較高時(shí)機(jī)體合成Alb的能力減弱[20]。本研究結(jié)果顯示，HBV DNA陽性組ALT、AST、TBil水平顯著高于HBV DNA陰性組，Alb水平顯著低于HBV DNA陰性組，提示HBV DNA陽性組的肝損傷程度比HBV DNA陰性組更嚴(yán)重，提示HBV復(fù)制的活躍程度越高，肝臟損傷越嚴(yán)重，與既往研究的結(jié)果相符[21]。本研究結(jié)果指出，sVAP-1水平與ALT、AST、TBil水平呈正相關(guān)，與Alb水平呈負(fù)相關(guān)，提示sVAP-1與肝臟炎性損傷有關(guān)，推測(cè)sVAP-1可能顯示致炎特征，參與慢性乙型肝炎患者的肝臟炎性損傷過程。

綜上所述，慢性乙型肝炎患者的血清sVAP-1表達(dá)水平升高，且其表達(dá)水平與HBV DNA水平、肝臟炎性損傷程度有關(guān)，有望成為監(jiān)測(cè)慢性乙型肝炎患者病情的有效指標(biāo)，為臨床治療提供新思路。