郭平葉 郭 丹

（廣電計量檢測（沈陽）有限公司 遼寧沈陽 110010）

1 前言

糧谷是人們生活的基本食品，其安全性與人們的生活息息相關(guān)，許多發(fā)達(dá)國家及國際組織對大米中有機(jī)磷、有機(jī)氯、擬除蟲菊酯類、除草劑類等農(nóng)藥的殘留規(guī)定了嚴(yán)格限量。目前，國內(nèi)已有 GB/T 5009.20—2003《食品中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量的測定》[1]、GB/T 5009.145—2003《植物性食品中有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥多種殘留的測定》[2]、GB 23200.9—2016《糧谷中475 種農(nóng)藥及相關(guān)化學(xué)品殘留量的測定 氣相色譜-質(zhì)譜法》[3]等多殘留量檢驗(yàn)方法，但這些方法的前處理步驟較為煩瑣，凈化效果不太理想，且氮吹時間長，對儀器的進(jìn)樣口、襯管、色譜柱、檢測器等均會造成一定損害，一定程度上增加儀器的維護(hù)成本及備件成本。

本文依據(jù)目前國際上對糧谷中農(nóng)藥殘留的新要求，對現(xiàn)有的相關(guān)國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)及檢測方法進(jìn)行歸納、整合，優(yōu)化前處理條件[4-7]，采用氣相色譜-質(zhì)譜（GC-MS）法，以大米作為糧谷類的代表性品種測定滅線磷、抗蚜威、甲基毒死蜱、馬拉硫磷、艾氏劑、毒死蜱、二甲戊靈、丁草胺、丙溴磷、狄氏劑、聯(lián)苯菊酯11種常用農(nóng)藥殘留量，此方法快速、準(zhǔn)確，對其他糧谷類農(nóng)殘的檢測具有一定的參考意義。

2 材料與方法

2.1 材料與試劑

滅線磷、抗蚜威、甲基毒死蜱、馬拉硫磷、艾氏劑、毒死蜱、二甲戊靈、丁草胺、丙溴磷、狄氏劑、聯(lián)苯菊酯標(biāo)準(zhǔn)品；環(huán)氧七氯標(biāo)準(zhǔn)品（純度99.0%）；正己烷、丙酮（色譜純）；無水硫酸鈉（分析純）、無水硫酸鎂（分析純）；C18 吸附劑、乙二胺-N-丙基硅烷（PSA）。

2.2 儀器與設(shè)備

氣相色譜-質(zhì)譜儀（型號7890B+5977B）（美國安捷倫公司）；渦旋振蕩器（型號Multi Reax）（德國heidolph）；超聲儀（江蘇昆山超聲儀器有限公司）；高速冷凍離心機(jī)（SIGMA）；氮吹儀（安譜24 位氮吹儀）。

2.3 標(biāo)準(zhǔn)工作液的配制

標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制：分別準(zhǔn)確稱取（吸?。┻m量的農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品，用丙酮+正己烷（1∶1）稀釋成相應(yīng)濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。

2.4 色譜條件

色譜柱：HP-5MS（30.0 m×250 μm×0.25 μm）；離子源：EI；采集模式：選擇離子掃描模式（SIM）；流速：1.0 mL/min；離子源溫度：230℃；四極桿溫度：150℃；傳輸線溫度：280℃；溶劑延遲：5 min；程序升溫：120℃，10℃/min 升至 250℃，20℃/min 升至 300℃（3 min）；進(jìn)樣量：1 μL；電壓：1 625 eV。

2.5 樣品前處理

精密稱量5.00 g 試樣于50 mL 離心管中，加入5 mL 水、500 μL 亞鐵氰化鉀溶液、500 μL 乙酸鋅溶液混勻。準(zhǔn)確加入 1%冰乙酸丙酮+正己烷（1∶1）10 mL，加入5 g 氯化鈉，渦旋振蕩5 min，超聲提取10 min，8 000 r/min 離心5 min，將上清液轉(zhuǎn)移至50 mL具塞離心管中，再用10 mL 1%冰乙酸丙酮+正己烷（1∶1）重復(fù)提取殘渣一次，合并 2 次上清液。在合并的上清液中加入4 g 無水硫酸鈉，高速渦旋1 min，以8 000 r/min 離心5 min，取上清液氮吹至近干。準(zhǔn)確稱取無水硫酸鎂 120 mg、C18 40 mg、PSA 40 mg于吹至近干的離心管中，精確加入1.0 mL 丙酮+正己烷（1∶1）溶液、40 μL 35 mg/L 環(huán)氧七氯 A 內(nèi)標(biāo)溶液，渦旋混勻，4 000 r/min 離心 5 min，上清液過 0.45 μm濾膜，供氣相色譜-質(zhì)譜儀測定，內(nèi)標(biāo)法定量。

3 結(jié)果與分析

3.1 提取方法的改進(jìn)

GB 23200.9—2016 中，萃取溶劑為乙腈，加速溶劑萃取儀為萃取池。乙腈作為提取溶劑時，提取效果明顯，但是在氮吹過程中耗時久，短時間內(nèi)很難達(dá)到近干的狀態(tài)；加速溶劑萃取儀萃取過程煩瑣，耗時過多，且萃取過程中需要吹氮?dú)猓杀靖?。本文將提取溶劑更換為1%冰乙酸丙酮+正己烷（1∶1），某些農(nóng)殘在酸性條件下更為穩(wěn)定，且丙酮+正己烷（1∶1）對于一些農(nóng)藥的溶解性較好，易于提取，縮短了氮吹時間。本實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性和回收率良好，可提高實(shí)驗(yàn)室的工作效率。

3.2 凈化方法的改進(jìn)

采用1%冰乙酸丙酮+正己烷（1∶1）提取農(nóng)藥時，同時也會提取出大量的碳水化合物、蛋白質(zhì)、酚類等雜質(zhì)。國標(biāo)方法中凈化步驟選擇Envi-18 柱、Envi-18柱、Sep-PakNH2 等，多次進(jìn)行小柱的活化、淋洗、洗脫，不僅操作過程煩瑣，還會有目標(biāo)物殘留在小柱上，造成回收率偏低等現(xiàn)象。本方法中凈化步驟改用無水硫酸鎂、C18、PSA 3 種混合物對氮吹后復(fù)溶的樣品進(jìn)行凈化，操作簡便，可以有效去除基質(zhì)中碳水化合物、有機(jī)酸和少量色素，凈化效果明顯，同時保證目標(biāo)物損失較小，回收率較好。

3.3 色譜條件的優(yōu)化

GB 23200.9—2016 中，程序升溫時間較長，優(yōu)化色譜條件可以節(jié)省做樣時間，提高工作效率，減小成本。

3.4 方法學(xué)驗(yàn)證

3.4.1 11種農(nóng)殘方法的線性范圍、檢出限

用不含農(nóng)藥的空白大米樣品基質(zhì)溶液稀釋農(nóng)藥儲備液，與等濃度的用純?nèi)軇┡渲频霓r(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液比較，峰面積未發(fā)現(xiàn)明顯的變化，證明基質(zhì)效應(yīng)基本消除。精密吸取 10.0 μg/mL 的 11種混合農(nóng)殘標(biāo)準(zhǔn)使用液適量，用丙酮溶液進(jìn)行稀釋，配制成濃度為0.05、0.10、0.20、0.50、1.0、2.0 μg/mL 的系列混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。該方法的11種農(nóng)殘的檢出限均為0.02 mg/kg。

3.4.2 樣品空白基質(zhì)實(shí)驗(yàn)與加標(biāo)實(shí)驗(yàn)

11種農(nóng)殘樣品的空白基質(zhì)色譜圖與加標(biāo)實(shí)驗(yàn)色譜圖詳見圖1～圖2。

圖1 11種農(nóng)殘樣品的空白基質(zhì)色譜圖

圖2 11種農(nóng)殘的樣品加標(biāo)實(shí)驗(yàn)色譜圖

3.4.3 回收率與精密度實(shí)驗(yàn)

11種農(nóng)殘的保留時間、添加濃度、回收率、精密度、線性方程及相關(guān)系數(shù)詳見表1。

表1 11種農(nóng)殘的保留時間、添加濃度、回收率、精密度、線性方程及相關(guān)系數(shù)

由以上結(jié)果可知，樣品的回收率和精密度良好，分析物在出峰時間附近無干擾峰，該法的提取方法、凈化方法、色譜條件都能夠滿足實(shí)驗(yàn)需求，即該方法可行有效。

4 結(jié)論

本文采用GC-MS 法檢測大米中11種農(nóng)藥殘留，提高了檢測的可重復(fù)性和工作效率，提取速度快，氮吹效率高。該方法操作簡單、分析時間短、靈敏、可靠，在加標(biāo)0.02～0.10 mg/kg 范圍內(nèi)，回收率為87%～112%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差≤10%，滿足GB/T 27404—2008《實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制規(guī)范 食品理化檢測》[8]中的規(guī)定，可作為大米中農(nóng)藥殘留檢測的定性和定量分析方法，其他糧谷可酌情參考。