張美娜，張 斌

錦州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院口腔科（錦州121000）

牙周炎（Periodontitis）是臨床上常見(jiàn)的口腔疾病，主要表現(xiàn)為口臭、牙齦出血、溢膿等，在我國(guó)成人中發(fā)病率高達(dá)50%，常威脅牙齒健康，甚至還會(huì)威脅到人體心臟、腎、肝臟等的健康［1］。慢性牙周炎（Chronic periodontitis，CP）是導(dǎo)致成年人失牙的主要原因，多種因素如感染、免疫力降低等都可引起慢性牙周炎的發(fā)生［2］。研究發(fā)現(xiàn)，牙周炎患者罹患冠心?。–oronary heart disease，CHD）的概率大大增加［3］，然而其發(fā)病機(jī)制尚不清楚。內(nèi)臟脂肪特異性絲氨酸蛋白酶抑制劑

（Visceral adipose tissue-derived serine protease inhibitor，Vaspin）是一種新型的炎癥因子，研究發(fā)現(xiàn)其可能通過(guò)影響血管內(nèi)皮細(xì)胞參與動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生發(fā)展過(guò)程［4］。脂肪因子（Apelin）是人類孤獨(dú)G 蛋白耦聯(lián)受體的內(nèi)源性配體，研究表明，Apelin 可參與調(diào)節(jié)血壓和血液流量［5］。研究報(bào)道，脂肪因子趨化素（Adipokine chemokine，Chemerin）在冠心病發(fā)生發(fā)展中起到重要作用。張國(guó)明等［6］在冠心病患者的動(dòng)脈粥樣硬化斑塊組織中發(fā)現(xiàn)牙周致病微生物。然而三者在慢性牙周炎合并冠心病中的作用尚不清楚，本研究擬通過(guò)檢測(cè)慢性牙周炎合并冠心病患者血清中的Vaspin、Apelin、Chemerin水平，探討其在慢性牙周炎合并冠心病病情發(fā)展中的作用。

對(duì)象與方法

1 研究對(duì)象 選取2017年9月至2019年10月在本院收治的CP患者160例為研究對(duì)象，其中CP合并CHD 患者80例為試驗(yàn)組，男性37例，女性43例，年齡28～60歲，平均年齡（45.62±8.16）歲。病例納入標(biāo)準(zhǔn):①符合CP、CHD 臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)，CP診斷標(biāo)準(zhǔn)參照Ramachandra等推薦的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)［7］，CHD 診斷標(biāo)準(zhǔn)參照《臨床冠心病診斷與治療指南》［8］；②全口余牙總數(shù)≥20個(gè)；③至少2個(gè)磨牙有一個(gè)PD≥4 mm，PAL≥1 mm；④探針出血結(jié)果為陽(yáng)性者；⑤未接受牙種植術(shù)或者其他牙周治療；⑥冠狀動(dòng)脈血管至少有一支出現(xiàn)狹窄者；⑦無(wú)嚴(yán)重心肝腎等器質(zhì)性病變；⑧3個(gè)月之內(nèi)未服用抗生素者。排除標(biāo)準(zhǔn):①其他炎癥、感染合并冠心病患者；②肝功能指標(biāo)異常、各種慢性、急性病患者；③孕婦、腫瘤患者、長(zhǎng)期酗酒者。另選單純慢性牙周炎患者80例為對(duì)照組（NC 組），男性38例，女性42例，年齡27～61歲，平均年齡（44.98±9.15）歲。兩組患者性別、年齡比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。本研究經(jīng)錦州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)通過(guò)，所有樣品采集均取得患者及家屬知情同意并簽字。

2 主要試劑與儀器 Vaspin ELISA 試劑盒（貨號(hào):69-80016）、Apelin ELISA 試 劑 盒（貨 號(hào):69-99460）、Chemerin ELISA 試劑盒（貨號(hào):69-98960）購(gòu)自武漢默沙克生物科技有限公司；ELX800 型全自動(dòng)酶標(biāo)儀購(gòu)自美國(guó)Bio-Tek公司。

3 樣品采集與保存 所有患者使用真空采血管采集清晨空腹靜脈血5 ml，分別置于促凝管中，標(biāo)記后于4℃靜置30 min，3000 r／min離心10 min，取血清分裝于1.5 ml無(wú)菌EP管中，-80℃冷凍保存?zhèn)溆谩?/p>

4 血清中Vaspin、Apelin、Chemerin含量測(cè)定

采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）測(cè)定血清中Vaspin、Apelin、Chemerin水平，檢測(cè)操作嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行。本次研究所有樣品的檢測(cè)均由檢驗(yàn)科同一批人員在同臺(tái)儀器上操作，每個(gè)樣本均設(shè)三次重復(fù)。

5 牙周臨床指數(shù)檢測(cè) ①牙周探診深度（PD）檢測(cè):PD 是指齦緣至袋底或齦溝底的距離，每個(gè)受試牙記錄6個(gè)位點(diǎn)（頰／舌側(cè)近中、中央、遠(yuǎn)中）；健康牙齦PD≤2～3 mm。②牙周附著水平（PAL）檢測(cè):無(wú)牙齦退縮時(shí)，PAL 為PD 與釉牙骨質(zhì)界到齦緣的距離之差；牙齦退縮時(shí)，PAL 為PD 與釉牙骨質(zhì)界到齦緣的距離之和。③菌斑指數(shù)（PI）:PI記錄標(biāo)準(zhǔn)，0 為無(wú)菌斑，1為表面有菌斑。④探診出血指數(shù)（BI）:用鈍頭探針輕輕探入齦溝或牙周袋內(nèi)，取出探針30 s后觀察牙齦出血情況。分為6級(jí):1級(jí)為0分，牙齦健康；2級(jí)為1分，牙齦顏色有炎性改變，探診不出血；3級(jí)為2分，探診后牙齦有點(diǎn)狀出血；4級(jí)為3分，探診出血并沿齦緣擴(kuò)散；5級(jí)為4 分，探診出血并溢出齦溝；6 級(jí)為5分，牙齦自發(fā)出血。⑤牙齦指數(shù)（GI）:檢查舌側(cè)邊緣齦、頰側(cè)近中齦乳頭、頰側(cè)邊緣齦及頰側(cè)遠(yuǎn)中齦乳頭4個(gè)區(qū)域，分別記錄各區(qū)域炎癥情況。共分為4級(jí):1級(jí)為0分，牙齦正常；2級(jí)為1分，牙齦輕度炎癥；3級(jí)為2分，牙齦中度炎癥；4級(jí)為3分，牙齦重度炎癥。計(jì)算每個(gè)牙和每位受檢者（4個(gè)牙位得分之和）的分值。

6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 利用SPSS 23.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)數(shù)資料采用［例（%）］表示，行卡方檢驗(yàn)；正態(tài)分布的計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，行t檢驗(yàn)；Pearson 檢驗(yàn)對(duì)Vaspin、Apelin、Chemerin水平與各牙周臨床指數(shù)進(jìn)行相關(guān)性分析，Logistic回歸分析CP患者發(fā)生CHD 的危險(xiǎn)因素。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

1 兩組一般資料比較 試驗(yàn)組和NC 組在性別、年齡上差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），試驗(yàn)組有吸煙史和高血壓史的人數(shù)顯著多于NC 組（P＜0.05），見(jiàn)表1。

表1 兩組研究對(duì)象一般資料比較

2 兩組血清Vaspin、Apelin、Chemerin水平比較 與NC 組比較，試驗(yàn)組Vaspin、Apelin 水平較低，Chemerin水平較高（P＜0.05），見(jiàn)表2。

表2 兩組血清Vaspin、Apelin、Chemerin水平比較（μg／L）

3 兩組PD、PAL、PI、BI、GI指數(shù)比較 與NC組比較，試驗(yàn)組PD、PAL、PI、BI、GI指數(shù)較高（P＜0.05），見(jiàn)表3。

表3 兩組各牙周臨床指數(shù)比較（±s）

表3 兩組各牙周臨床指數(shù)比較（±s）

組 別 n PD（mm） PAL（mm）PI BI GI試驗(yàn)組 80 3.69±0.75 4.46±1.15 2.14±0.69 3.49±0.51 3.28±0.78 NC組 80 2.06±0.23 0.00±0.00 0.00±0.00 1.78±0.31 0.59±0.13 t值 — 18.585 34.688 27.740 25.627 30.427 P 值 — ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001

4 CP 合并CHD 患者血清Vaspin、Apelin、Chemerin水平與PD、PAL、PI、BI、GI指數(shù)相關(guān)性分析 CP合并CHD 患者血清Vaspin水平與PD、PAL、PI、BI、GI指數(shù)呈負(fù)相關(guān)（P＜0.05）；血清Apelin水平與PD、PAL、PI、BI、GI指數(shù)呈負(fù)相關(guān)（P＜0.05）；血清Chemerin水平與PD、PAL、PI、BI、GI指數(shù)呈正相關(guān)（P＜0.05）。見(jiàn)表4。

表4 試驗(yàn)組患者血清Vaspin、Apelin、Chemerin水平與各牙周臨床指數(shù)相關(guān)性分析

5 CP患者發(fā)生CHD 危險(xiǎn)因素的Logistic分析 多因素Logistic回歸分析結(jié)果顯示年齡、高血壓史、吸煙史、Chemerin高水平均為影響CP患者發(fā)生CHD的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，Vaspin、Apelin高水平為獨(dú)立保護(hù)因素（P＜0.05），見(jiàn)表5。

表5 CP患者發(fā)生CHD 危險(xiǎn)因素的Logistic分析

討 論

有研究者認(rèn)為，無(wú)論任何病因?qū)е碌穆匝装Y都與心血管疾病風(fēng)險(xiǎn)的增加有關(guān)［9］。Ziebolz等［10］研究發(fā)現(xiàn)，終末期冠心病患者最終需要通過(guò)心臟移植手術(shù)的患者合并慢性牙周炎的比率超過(guò)90%。程景明［11］研究對(duì)比冠心病患者中患有慢性牙周炎和牙周健康的人數(shù)時(shí)，發(fā)現(xiàn)兩者人數(shù)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。近期研究表達(dá)，慢性牙周炎已成為冠心病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素［12］。諸多證據(jù)表明慢性牙周炎與冠心病有較強(qiáng)的相關(guān)性。關(guān)于兩者之間的聯(lián)系或者發(fā)生機(jī)制如何，目前尚不清楚，為了解釋兩者之間是由何種方式產(chǎn)生的聯(lián)系，研究者大多偏向以下幾種生物機(jī)制:炎癥和免疫機(jī)制、血栓機(jī)制、血脂機(jī)制、胰島素抵抗機(jī)制等［13］。

研究表明，脂肪細(xì)胞可分泌血清Vaspin等脂肪細(xì)胞因子，具有明顯的抗炎癥反應(yīng)作用，有利于保持斑塊的穩(wěn)定，對(duì)體內(nèi)血管平滑肌細(xì)胞生長(zhǎng)和冠狀動(dòng)脈粥樣硬化的形成有一定抑制作用［14］。對(duì)于冠狀動(dòng)脈粥樣硬化的形成以及心血管事件具有重要的影響。羅慶慧等［15］對(duì)比觀察冠心病患者血清中Vaspin水平變化時(shí)發(fā)現(xiàn)，無(wú)論是急性心梗死組、不穩(wěn)定型心絞痛組還是穩(wěn)定性心絞痛組，其血清中Vaspin水平均顯著低于健康對(duì)照組，并且Vaspin水平與Gensini積分呈負(fù)相關(guān)，說(shuō)明冠心病患者血清Vaspin與冠狀動(dòng)脈狹窄程度有關(guān)。研究表明Apelin 具有心肌保護(hù)作用，可介導(dǎo)血管再生，改善心肌缺血，改善循環(huán)障礙等一系列心血管效應(yīng)［16］。曾文平等［17］研究發(fā)現(xiàn)冠心病患者血清Apelin水平顯著低于對(duì)照組，認(rèn)為Apelin水平變化與冠心病發(fā)生發(fā)展有關(guān)，參與了冠狀動(dòng)脈粥樣硬化的生理過(guò)程。Chemerin是脂肪因子家族的成員之一，具有趨化白細(xì)胞的功能，可募集表達(dá)Chemerin受體的炎性細(xì)胞聚集于組織的受損部位發(fā)生炎癥反應(yīng)［18］。近期研究發(fā)現(xiàn)，Chemerin可能與冠狀動(dòng)脈斑塊形成有關(guān)，參與了血管重構(gòu)過(guò)程［19］。閆曉紅等［20］研究發(fā)現(xiàn)，冠心病患者血清中Chemerin水平隨著冠狀動(dòng)脈病變程度加劇而上升，并且發(fā)現(xiàn)單支病變患者高水平Chemerin具有明顯的促炎癥作用。Ozcan等［21］研究發(fā)現(xiàn)，牙周炎患者唾液中Chemerin含量顯著上升，提示Chemerin與牙周炎發(fā)生有關(guān)，與上述結(jié)果一致。本研究發(fā)現(xiàn)，Vaspin、Apelin在CP 合并CHD 患者血清中下降，Chemerin則上 升，提 示Vaspin、Apelin、Chemerin 與CP 合 并CHD 有關(guān)，其水平高低可反應(yīng)CP 合并CHD 患者冠狀動(dòng)脈病變。

慢性牙周炎直接導(dǎo)致牙周臨床指標(biāo)的變化，牙周臨床指標(biāo)可反映慢性牙周炎的病變程度。肖燕等［22］研究CP合并CHD 患者時(shí)發(fā)現(xiàn)，經(jīng)過(guò)治療改善后的患者牙周臨床指標(biāo)均有顯著下降，本研究結(jié)果與之相似，PD、PAL、PI、BI、GI指標(biāo)相對(duì)于對(duì)照組均顯著升高。進(jìn)一步對(duì)CP 合并CHD 患者血清中Vaspin、Apelin、Chemerin水平與牙周臨床指標(biāo)進(jìn)行相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)，Vaspin、Apelin 與PD、PAL、PI、BI、GI 呈 負(fù) 相 關(guān)，Chemerin水平與PD、PAL、PI、BI、GI呈正相關(guān)，提示血清中Vaspin、Apelin、Chemerin水平與牙周臨床指標(biāo)可同時(shí)反映CP 合并CHD 患者病情嚴(yán)重程度。同時(shí)本研究顯示Chemerin高水平為影響慢性牙周炎患者發(fā)生冠心病的危險(xiǎn)因素，Vaspin高水平、Apelin 高水平為獨(dú)立保護(hù)因素，提示血清Vaspin、Apelin、Chemerin水平可能作為判斷CP合并CHD 患者冠狀動(dòng)脈病變的輔助指標(biāo)。

綜上所述，CP 合并CHD 患者血清Vaspin、Apelin水平較低、Chemerin水平較高，與患者牙周指數(shù)有關(guān)，均為CP患者發(fā)生CHD 的影響因素。本研究不足之處在于樣本量不足，需擴(kuò)大樣本量進(jìn)一步研究。