胡波濤，周國燕，彭艷伶，寧瑤，趙秋云

（1.涼山健牧動(dòng)物科學(xué)研究所，四川 西昌 615000；2.四川省涼山州畜牧獸醫(yī)科學(xué)研究所，四川 西昌 615000；3.四川省西昌市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，四川 西昌 615000）

豬圓環(huán)病毒（PCV）是圓環(huán)病毒科圓環(huán)病毒屬，為無囊膜單股環(huán)狀負(fù)鏈DNA 病毒［1］，分為PCV1、PCV2和PCV3共3種血清型［1］。PCV1為豬體內(nèi)常在無致病性病原體［2］。PCV3為新發(fā)病原，在2016年從患有皮炎腎病綜合征（PDNS）和繁殖障礙的母豬及流產(chǎn)胎兒體內(nèi)首次鑒定得出［3］。PCV2 感染與斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征（PMWS）、豬皮炎與腎病綜合征（PRDC）、繁殖障礙（PRFD）和急性肺水腫（APE）等疾病的發(fā)生密切相關(guān)［1］，這類病稱為豬圓環(huán)病毒相關(guān)疾?。≒CVAD），嚴(yán)重危害生豬健康。當(dāng)前控制PCV2感染和流行的方法主要是應(yīng)用滅活疫苗和基因工程疫苗進(jìn)行免疫接種，而近幾年國內(nèi)外研究發(fā)現(xiàn)，疫苗免疫后的豬場會(huì)大量出現(xiàn)并流行PCV2基因亞型毒株，這給由PCV2 誘發(fā)的豬傳染病的防控帶來新的挑戰(zhàn)。筆者于2019 年6～10 月在四川省西昌市進(jìn)行了PCV2 感染情況調(diào)查，旨在為西昌市豬傳染病的防控提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 調(diào)查對(duì)象 本次調(diào)查對(duì)象為西昌市年出欄育肥豬100 頭及以上的豬場，其中年出欄量超1 000頭的豬場8個(gè)，年出欄量在500～1 000頭的豬場16 個(gè)，年出欄量低于500 頭的豬場8 個(gè)。將出欄1 000 頭以上的豬場定為A 類豬場，出欄500～1 000頭的豬場定為B類豬場，出欄低于500頭的豬場定為C 類豬場。分別統(tǒng)計(jì)接種了PCV疫苗與未接種PCV 疫苗豬群的豬圓環(huán)病毒II 型的感染情況。

1.2 樣本采集 2019 年6～10 月，對(duì)西昌市10個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)32 家養(yǎng)豬場的800 頭豬通過前腔靜脈采血的方式采集抗凝血（5 mL/頭）。因養(yǎng)殖場具體情況差異較大，采集標(biāo)本數(shù)略有差異。其中能繁母豬200 份，每個(gè)場采集10 份；育肥豬200 份，每個(gè)場采集5～20份；30日齡左右斷奶仔豬400份，每個(gè)場采集5～20份。所有樣本標(biāo)記清楚采集時(shí)間和地點(diǎn)，置于2～8 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3 檢測試劑盒 病毒基因組DNA 提取試劑盒和豬圓環(huán)病毒II型熒光PCR檢測試劑盒，均購自青島立見診斷技術(shù)發(fā)展中心。

1.4 方法 根據(jù)GB/T 21674-2008標(biāo)準(zhǔn)，參照試劑盒說明書進(jìn)行樣品處理和核酸提取，將提取好的DNA 檢測合格后，置于-20 ℃保存?zhèn)溆?。根?jù)豬圓環(huán)病毒II 型熒光PCR 檢測試劑盒說明書的方法配制熒光PCR 反應(yīng)體系（吸取18 μL PCV2 qPCR Buffer 與PCV2 qPCR mix 進(jìn)行復(fù)溶，然后加入2 μL 樣品DNA），同時(shí)按照豬圓環(huán)病毒II 型熒光PCR 檢測試劑盒的反應(yīng)程序進(jìn)行設(shè)置（94 ℃預(yù)變性3 min；94 ℃變性10 s，60 ℃退火30 s，共40 個(gè)循環(huán)；60 ℃收集FAM 熒光信號(hào)）。以上實(shí)驗(yàn)委托成都納比微特檢測技術(shù)服務(wù)有限公司檢測。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同規(guī)模養(yǎng)殖場的PCV2 感染狀況 本次檢測查明了西昌市各類豬場感染PCV2 的情況。結(jié)果見表1。

表1 各類養(yǎng)殖場PCV2核酸檢測結(jié)果 份

由表1 可知，西昌市小型養(yǎng)豬場均存在不同程度的PCV2 感染，不同規(guī)模場的帶毒狀況差異很大，A 類場感染率為42.17%，B 類場感染率為69.52%，C類場感染率達(dá)79.61%?？梢娫摬《镜母腥厩闆r與養(yǎng)殖場的飼養(yǎng)管理和生物安全防控水平密切相關(guān)。本次檢測未發(fā)現(xiàn)PCV2陰性場，各飼養(yǎng)階段豬群的PCV2 感染率達(dá)61.5%～70.0%，表明各場的PCV2帶毒情況都比較嚴(yán)重。

2.2 接種PCV疫苗與未接種PCV疫苗豬群的抗原檢測結(jié)果 檢測發(fā)現(xiàn)，接種豬圓環(huán)疫苗與未接種豬圓環(huán)疫苗豬群的PCV2 感染率差異極大，詳見表2。

由表2可知，進(jìn)行疫苗免疫的豬群感染PCV2的幾率大大降低，接種豬圓環(huán)疫苗的能繁母豬、仔豬和育肥豬的感染率為36.61%、31.00%、25.00%，而未接種豬圓環(huán)疫苗的能繁母豬、仔豬和育肥豬的感染率上升到82.94%、92.00%、89.28%，表明豬圓環(huán)疫苗能夠在一定程度上提高豬群的免疫力，降低豬群的感染率。本次調(diào)查還發(fā)現(xiàn)西昌市內(nèi)小型豬場圓環(huán)病毒疫苗的保護(hù)率普遍偏低，可能是由于疫苗毒株本身的基因亞型與部分豬場PCV2 感染情況不完全相符，也有可能是與部分豬場的免疫程序?qū)嵤┎坏轿?、未能確保免疫效果等原因有關(guān)，有待通過進(jìn)一步的試驗(yàn)查明。

表2 接種豬圓環(huán)疫苗與未接種豬圓環(huán)疫苗豬群的抗原檢測結(jié)果 份

3 結(jié)論

本次檢測表明，西昌市中小豬場的PCV2 帶毒嚴(yán)重，感染普遍。若不實(shí)施有效防控，極有可能導(dǎo)致豬圓環(huán)病毒病的廣泛流行。常態(tài)化做好豬場PCV2的定期檢測，查明其感染情況，據(jù)此實(shí)施PCV2 綜合防控十分必要。若有條件，可采用基因檢測進(jìn)一步查明本地區(qū)流行毒株的基因類型，選擇相應(yīng)疫苗進(jìn)行免疫接種，達(dá)到有效防制本病的目的。

豬圓環(huán)病毒不僅可直接導(dǎo)致豬群發(fā)病，而且會(huì)導(dǎo)致豬群發(fā)生免疫抑制，降低其免疫抵抗力，引起豬群易發(fā)、多發(fā)其他疾病。豬場傳染病的混合感染常常同PCV2密切相關(guān)。豬圓環(huán)病毒病目前尚無特效治療藥物，因此做好豬圓環(huán)病毒病的免疫預(yù)防，加強(qiáng)養(yǎng)豬場的生物安全管理和飼養(yǎng)管理就顯得尤為重要。