王丹 趙瑞珍 李小黎

摘要 目的：通過(guò)探討血管性癡呆（VD）大鼠腦內(nèi)單胺神經(jīng)遞質(zhì)變化，研究益腎調(diào)氣法對(duì)VD大鼠的干預(yù)機(jī)制。方法：選購(gòu)雄性Wistar大鼠，通過(guò)曠場(chǎng)試驗(yàn)分為正常組、卒中組。MCAO法制備缺血性腦卒中模型，常規(guī)飼養(yǎng)28 d后經(jīng)水迷宮試驗(yàn)篩選VD大鼠，并隨機(jī)分為觀察組和模型組。正常組和模型組灌胃蒸餾水，觀察組灌胃頤腦解郁方，干預(yù)4周。灌胃第1、2、4周對(duì)各組大鼠行水迷宮檢測(cè);第4周灌胃后取材，采用高效液相檢測(cè)大鼠右側(cè)海馬、前額葉皮質(zhì)5-HT、NE、DA含量。結(jié)果：與正常組比較，模型組大鼠1、2、4周跳臺(tái)潛伏期縮短、錯(cuò)誤次數(shù)增加、水迷宮潛伏期明顯延長(zhǎng)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）;與模型組比較，觀察組第2、4周水迷宮潛伏期縮短，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），第4周跳臺(tái)潛伏期延長(zhǎng)、錯(cuò)誤次數(shù)減少，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。模型組皮質(zhì)及海馬NE、DA、5-HT含量較正常組降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），觀察組海馬DA含量較模型組升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。結(jié)論：益腎調(diào)氣法可改善VD大鼠學(xué)習(xí)記憶能力，其作用機(jī)制可能與調(diào)節(jié)大鼠腦內(nèi)NE、DA及5-HT含量相關(guān)。

關(guān)鍵詞 血管性癡呆;頤腦解郁方;去甲腎上腺素;多巴胺;5-羥色胺;益腎調(diào)氣法;動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

Abstract Objective：To study the intervention mechanism of tonifying kidney and regulating qi method on vascular dementia（VD）rats by investigating the changes of monoamine neurotransmitters in the brain of VD rats.Methods：Male Wistar rats were selected and divided into a normal group and a stroke group by open field test.MCAO method was used to prepare ischemic stroke model.After 28 d of routine feeding，VD rats were screened by water maze test and randomly divided into a treatment group and a model group.The normal group and the model group were infused with distilled water，and the treatment group was infused with Yinao Jieyu Formula for 4 weeks.At the 1st，2nd and 4th weeks of gavage，the rats in each group were tested for water maze，and at the 4th week after gavage，the material was taken and the contents of 5-HT，NE，DA in the right hippocampus and prefrontal cortex of rats was detected by high-performance liquid.Results：Compared with the normal group，the latent period of 1，2 and 4 weeks of platform jumping were shortened，the number of errors increased，and the latent period of water maze was significantly prolonged（P<0.01）.Compared with the model group，the latent period of water maze at 2 and 4 weeks of treatment group was shortened（P<0.01），and the latent period of platform jumping at 4 weeks was prolonged and the number of errors decreased（P<0.01）.The content of NE，DA，5-HT in the cortex and hippocampus of the model group was lower than that in the normal group（P<0.01），and the hippocampal DA content in the treatment group was higher than that in the model group（P<0.01）.Conclusion：The tonifying kidney and regulating qi treatment can improve the learning and memory ability of VD rats，and its mechanism may be related to the content of NE，DA and 5-HT in the rat brain.

Keywords Vascular dementia; Yinao Jieyu Formula; Norepinephrine; Dopamine; 5-hydroxytryptamine;Tonifying kidney and regulating qi method; Animal experiments

血管性癡呆（Vascular Dementia，VD）是腦卒中后常見(jiàn)并發(fā)癥之一，該病發(fā)生率高，臨床表現(xiàn)為記憶、認(rèn)知功能障礙，屬于嚴(yán)重認(rèn)知障礙的腦血管疾病[1]。中醫(yī)歸屬“多忘”“癡呆”“呆病”等范疇，目前對(duì)于卒中后向VD轉(zhuǎn)變的機(jī)制尚未有明確結(jié)論。近年來(lái)，國(guó)內(nèi)外學(xué)者從神經(jīng)遞質(zhì)對(duì)VD的發(fā)病機(jī)制進(jìn)行了深入探討，其含量的變化與學(xué)習(xí)記憶關(guān)系密切[2-3]，本研究在前期研究的基礎(chǔ)上通過(guò)觀察血管性癡呆大鼠模型中藥干預(yù)前后的行為學(xué)及前額葉皮質(zhì)、海馬不同腦區(qū)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)濃度3個(gè)方面的變化情況，探討頤腦解郁方對(duì)腦缺血后VD大鼠的作用機(jī)制，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 動(dòng)物 健康雄性Wistar大鼠（200±10）g，SPF級(jí)，6周齡，動(dòng)物許可證：SCXK（京）2016-0006，購(gòu)于北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司。大鼠適應(yīng)性預(yù)養(yǎng)1周，自由攝食和飲水，動(dòng)物房室溫（23±1）℃（冷、熱應(yīng)激除外），相對(duì)濕度50%～60%，光照周期晝夜各12 h（6：00～18：00光照;18：00～6：00黑暗）。

1.1.2 藥物 頤腦解郁方顆粒（由郁金、刺五加等藥物組成，由北京康仁堂藥業(yè)有限公司提供，北京中醫(yī)藥大學(xué)第三附屬醫(yī)院制成顆粒）。配比成419 mg/kg混懸液（即1劑配方顆粒加100 mL蒸餾水）相當(dāng)于成人劑量的7倍計(jì)算，存貯在4 ℃的冰箱中備用，再臨用前加熱。

1.1.3 試劑與儀器 尼龍栓線（北京沙東生物技術(shù)有限公司，貨號(hào)：2838-A4）、戊巴比妥鈉（美國(guó)Sigma公司，貨號(hào)P3761-5），去甲腎上腺素試劑（美國(guó)Sigma公司，貨號(hào)：A9512）、多巴胺試劑（美國(guó)Sigma公司，貨號(hào)：H8502）、5-羥色胺試劑（美國(guó)Sigma公司，貨號(hào)：H7752）。電子天平（珠恒電子有限公司監(jiān)制，型號(hào)：JCS-11002A）、Morris水迷宮（北京中醫(yī)藥大學(xué)中醫(yī)學(xué)院，型號(hào)：KW-MWM）大鼠跳臺(tái)儀（中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院，型號(hào)：DZY-DG-8S）、高效液相色譜儀（美國(guó)ESA公司，型號(hào)：Model 5600A）、8通道庫(kù)侖電化學(xué)檢測(cè)器（美國(guó)ESA公司，型號(hào)：Model 5300A），美國(guó)EAS公司軟件（美國(guó)ESA公司，型號(hào)：Version3.1）、超速低溫離心機(jī)（美國(guó)Sigma公司，型號(hào)：2K15）、超聲波發(fā)生器（美國(guó)Sigma公司，型號(hào)：MJ-300）。

1.2 方法

1.2.1 動(dòng)物分組與模型制備

1.2.1.1 分組 購(gòu)入雄性Wistar大鼠65只，飼養(yǎng)1周，采用Open-filed評(píng)分隨機(jī)分為正常組10只、腦卒中模型組55只。用MCAO法制備缺血性腦卒中模型，MCAO術(shù)中死亡9只，術(shù)后1周死亡7只，28 d后經(jīng)Morris水迷宮篩選出20只VD大鼠進(jìn)入實(shí)驗(yàn)，隨機(jī)分為模型組、觀察組，正常組10只，模型組10只，觀察組10只。

1.2.1.2 模型制備 1）缺血性腦卒中（Ischemic Stroke，IS）大鼠模型制備：制備IS模型[4]，大鼠稱重后，用1%戊巴比妥鈉溶液5 mL/kg腹腔注射麻醉。沿頸正中線開(kāi)口約1.5 cm，鈍性分離兩側(cè)肌肉及腺體，暴露右側(cè)頸總動(dòng)脈、頸外動(dòng)脈、頸內(nèi)動(dòng)脈，在頸總動(dòng)脈近心端開(kāi)一小口，插入尼龍栓線至頸內(nèi)動(dòng)脈，當(dāng)栓線插入距頸總動(dòng)脈分叉1.8～2.0 cm處并有輕微阻力時(shí)即可。造模成功后的大鼠待2 h后將栓線輕輕抽出0.5～1.0 cm，使血液再灌注。2）參考Longa 5分制法，其中0分表示無(wú)神經(jīng)損傷癥狀;1分表示不能完全伸展對(duì)側(cè)前爪;2分表現(xiàn)為向?qū)?cè)轉(zhuǎn)圈;3分表現(xiàn)為向?qū)?cè)傾倒;4分表現(xiàn)為不能自發(fā)行走，意識(shí)喪失，分值越高，說(shuō)明大鼠行為障礙越嚴(yán)重。對(duì)術(shù)后2 h再灌注后大鼠，待其麻醉清醒后進(jìn)行評(píng)分，將評(píng)分小于等于1分及大于等于4分大鼠剔除，不予納入。大鼠于缺血再灌注2 h后出現(xiàn)行走轉(zhuǎn)圈、對(duì)側(cè)前肢蜷曲或走向?qū)?cè)傾倒的體征者可納入，無(wú)此體征或者2 h后仍不清醒者，棄去。3）制備建立MCAO模型后，對(duì)大鼠進(jìn)行常規(guī)飼養(yǎng)，于28 d后行水迷宮評(píng)價(jià)[5-6]，（實(shí)驗(yàn)組大鼠平均逃避潛伏期-正常組組大鼠平均逃避潛伏期）/實(shí)驗(yàn)組大鼠平均逃避潛伏期>20%定為VD鼠進(jìn)入實(shí)驗(yàn)。

1.2.2 給藥方法 VD模型組灌胃蒸餾水，觀察組灌胃中藥頤腦解郁方，灌胃劑量10 mL/kg，1次/d，持續(xù)4周。

1.2.3 檢測(cè)指標(biāo)與方法

1.2.3.1 宏觀表征像觀察 于每周灌胃前1 d觀察各組大鼠的表征像，包括觀察各組大鼠的行為活動(dòng)（如活動(dòng)度、攻擊行為、探索行為、修飾行為等）、精神狀態(tài)、以及毛發(fā)色澤、糞便質(zhì)地以及舌質(zhì)舌色等一般情況的變化。

1.2.3.2 行為學(xué)測(cè)試 1）Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)[7]（Water Maze Test，WMT）在安靜、恒溫的暗室進(jìn)行，室溫（23±1）℃、水溫（22±1）℃。水迷宮的直徑1.8 m，水深情況31 cm，水迷宮分為4個(gè)象限，平臺(tái)放置于任1象限內(nèi)1/3處，平臺(tái)低于水面1 cm，位置保持不變。實(shí)驗(yàn)分5 d進(jìn)行，前4 d訓(xùn)練1次/d，第5天測(cè)試。前4 d為定位航行實(shí)驗(yàn)，為：每只大鼠實(shí)驗(yàn)4次/d，每次從4個(gè)象限隨機(jī)選取1個(gè)，并將大鼠放置水中，每只動(dòng)物1個(gè)象限只能使用1次;單次游泳時(shí)限60 s;記錄大鼠尋找、爬到平臺(tái)所用時(shí)間，為逃避潛伏期。再讓動(dòng)物在平臺(tái)上停留30 s后，進(jìn)行下次的方向訓(xùn)練;如果60 s內(nèi)沒(méi)有找到水面下隱藏在的站臺(tái)，則實(shí)驗(yàn)者再將大鼠引至平臺(tái)地方;平臺(tái)上個(gè)再停留30 s后，進(jìn)行下一方向訓(xùn)練。當(dāng)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行到第5天，撤平臺(tái)后進(jìn)行空間探索試驗(yàn)（Spatial probe），于定位航行實(shí)驗(yàn)后24 h后，撤除站臺(tái)，從對(duì)側(cè)象限放入大鼠，使其游泳60 s，記錄逃避潛伏期及穿越平臺(tái)位置次數(shù)。2）跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)跳臺(tái)裝置為15 cm×30 cm×30 cm的被動(dòng)條件反應(yīng)箱，將直徑和高度都為4.5 cm大小的橡皮墊置于箱內(nèi)底部一角作為被動(dòng)回避電擊反應(yīng)的安全區(qū)。實(shí)驗(yàn)時(shí)先將大鼠放入箱中訓(xùn)練3 min，接通36 V交流電，記大鼠5 min內(nèi)被電擊的錯(cuò)誤次數(shù)，為大鼠學(xué)習(xí)測(cè)試的成績(jī)。24 h后進(jìn)行記憶測(cè)試，測(cè)試時(shí)直接將大鼠放置于安全平臺(tái)上，立即通電并記錄每只大鼠第1次錯(cuò)誤次數(shù)和跳下安全區(qū)的時(shí)間潛伏期），作為記憶測(cè)試成績(jī)。入組大鼠在造模結(jié)束后分別于1、2、4周進(jìn)行行為學(xué)測(cè)試，包括跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)、Morris水迷宮測(cè)試。

1.2.3.3 大鼠右側(cè)前皮質(zhì)及海馬NE、DA、5-HT含量測(cè)定 完成行為學(xué)測(cè)試后，將大鼠斷頭而處死，在冰上迅速剝離出右側(cè)前額葉皮質(zhì)、海馬，微量秤稱重，將組織質(zhì)量控制在20～50 mg，加入0.4 mL預(yù)冷的工作內(nèi)標(biāo)液，于冰浴下快速勻漿，靜置10 min，4 ℃條件下14 000 g離心15 min，取上清液，用0.20 μm濾膜過(guò)濾，取100 μL上樣測(cè)定或-80 ℃保存檢測(cè)NE、DA、5-HT的含量。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)研究數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示;不符合正態(tài)分布，用四分位數(shù)描述。符合正態(tài)分布且方差齊時(shí)，在多組間采用單因素方差分析比較，同組間比較則選取LSD檢驗(yàn);方差不齊時(shí)采用Weltch檢驗(yàn)。數(shù)據(jù)不符合正態(tài)分布，采用非參數(shù)分析;重復(fù)測(cè)量數(shù)據(jù)，符合球形檢驗(yàn)，采用重復(fù)測(cè)量方差分析，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組宏觀表征像觀察 VD組大鼠造模結(jié)束后，在灌胃1、2、4周節(jié)點(diǎn)觀察發(fā)現(xiàn)，VD模型大鼠無(wú)明顯變化，大部分靜默少動(dòng)，進(jìn)食飲水較多、梳理行為較少，糞便稀溏。與之比較，灌胃4周后VD觀察組自發(fā)活動(dòng)、梳理行為增多、體質(zhì)量稍減輕，糞便成形。

2.2 各組VD大鼠行為學(xué)變化

2.2.1 各組VD大鼠不同時(shí)間點(diǎn)跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)結(jié)果比較 灌胃1、2、4周后與正常組比較，VD模型組及VD觀察組潛伏期均顯著低于正常組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）;于灌胃4周時(shí)與VD模型組比較，VD觀察組潛伏期時(shí)間顯著升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）;灌胃1、2、4周時(shí)與正常組比較，VD模型組錯(cuò)誤次數(shù)增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）;治療后VD觀察組與VD模型組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。見(jiàn)表1。

2.2.2 各組VD組大鼠不同時(shí)間點(diǎn)Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)結(jié)果比較 灌胃1周后與正常組比較，模型組大鼠逃避潛伏期的時(shí)間延長(zhǎng)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;與VD模型組比較，VD觀察組逃避潛伏期時(shí)間沒(méi)有延長(zhǎng)，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）;灌胃2周后與正常組比較，模型組逃避潛伏期時(shí)間明顯延長(zhǎng)，2組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），與模型組比較，觀察組逃避潛伏期縮短，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;灌胃4周后與正常組比較，模型組的逃避潛伏期明顯延長(zhǎng)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）;與模型組比較，觀察組逃避潛伏期明顯縮短，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。見(jiàn)表2。

2.2.3 各組右側(cè)前額葉皮質(zhì)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)含量變化比較 與正常組比較，VD模型組NE、DA、5-HT含量均顯著性降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）;與VD模型組比較，VD觀察組無(wú)明顯變化，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。見(jiàn)表3。

2.2.4 各組右側(cè)海馬NE、DA、5-HT含量變化比較? 與正常組比較，VD模型組NE、DA、5-HT含量均顯著降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）;與模型組比較，VD觀察組DA含量明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。VD觀察組的NE、5-HT呈升高趨勢(shì)，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。見(jiàn)表4。

3 討論

血管性癡呆（VD）是腦血管病變導(dǎo)致顱腦局灶性神經(jīng)功能損害引起的以認(rèn)知功能障礙為特征的一組臨床綜合征[8]。歸于中醫(yī)學(xué)的“癡呆”“呆病”“多忘”等范疇。中醫(yī)上，腦卒中后，腎精虧虛，不足以充盛腦髓，髓海虧虛元神失養(yǎng)[9]，則反應(yīng)遲鈍、出現(xiàn)神情淡漠、思維緩慢、記憶力減退等癥狀;肝腎同源，因腎精不足可致肝血虧虛;肝失疏泄，氣機(jī)不暢，故可見(jiàn)情緒低落、胸悶不舒等癥狀，隨著病程遷延，因虛致實(shí)，痰瘀互結(jié)，腎虛基礎(chǔ)上，上蒙清竅，使病情更加纏綿難愈。導(dǎo)師通過(guò)總結(jié)多年來(lái)的臨床經(jīng)驗(yàn)，提出血管性癡呆在發(fā)生發(fā)展過(guò)程中，腎虛是其發(fā)病的基礎(chǔ)，氣機(jī)失調(diào)則為發(fā)病之誘因[10]為卒中后精神疾患的基本病機(jī)。治療以益腎調(diào)氣法譴方而成之頤腦解郁方是導(dǎo)師唐啟盛教授臨床多年經(jīng)驗(yàn)的總結(jié)，臨床取得了較好的療效，但其作用靶點(diǎn)尚不清楚。

本次研究中就VD組大鼠而言，與正常組比較，VD模型大鼠整體表現(xiàn)為精神疲憊、喜倦臥懶動(dòng)、眼神無(wú)光，對(duì)外界刺激反應(yīng)低下，便質(zhì)稀溏，口鼻色稍暗，舌潤(rùn)澤，舌色淡紅，在1、2、4周節(jié)點(diǎn)上，VD模型組大鼠跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)潛伏期時(shí)間較正常組均明顯縮短，錯(cuò)誤次數(shù)明顯增加，而水迷宮逃避潛伏期時(shí)間明顯延長(zhǎng)，較好地模擬了血管性癡呆患者認(rèn)知功能及學(xué)習(xí)、記憶能力下降等核心臨床表現(xiàn)，經(jīng)中藥頤腦解郁方治療4周后，觀察組大鼠跳臺(tái)潛伏期時(shí)間延長(zhǎng)，2、4周時(shí)水迷宮逃避潛伏期時(shí)間縮短，提示中藥頤腦解郁方可以有效改善大鼠學(xué)習(xí)及記憶能力。腦血管病變后隨著病程的延長(zhǎng)，癡呆大鼠的逃避潛伏期時(shí)間（空間學(xué)習(xí)）及穿越平臺(tái)次數(shù)（記憶能力）也逐漸下降。與臨床血管性癡呆患者不同階段出現(xiàn)的反應(yīng)遲鈍、思維混亂、記憶模糊、智力障礙等癥狀表現(xiàn)類似。因此結(jié)合多次行為學(xué)研究可以更好地探索出卒中后精神疾患模型大鼠的精神狀況，而不同時(shí)間點(diǎn)行為學(xué)結(jié)果均均證實(shí)中藥頤腦解郁方能在血管性癡呆不同階段對(duì)大鼠表征像、行為學(xué)進(jìn)行有效調(diào)節(jié)，這為我們進(jìn)一步探討頤腦解郁方對(duì)這一疾患發(fā)生發(fā)展過(guò)程中單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的干預(yù)作用奠定了良好的基礎(chǔ)。

神經(jīng)遞質(zhì)作為連接腦內(nèi)神經(jīng)元化學(xué)突觸之間的信使，主要充當(dāng)信息傳遞功能。其作用機(jī)制為通過(guò)與其突觸后受體結(jié)合而產(chǎn)生神經(jīng)生物學(xué)效應(yīng)。本研究主要的單胺神經(jīng)遞質(zhì)NE、DA、5-HT有廣泛的活性，其神經(jīng)纖維上行，可投射至額葉、海馬，在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中起著重要的調(diào)節(jié)作用，共同協(xié)調(diào)的前額葉皮質(zhì)是Papez環(huán)路的起始部位，海馬是Papez環(huán)路的重要組成部分，與學(xué)習(xí)、記憶方面等功能相關(guān)[11-13]，額葉被認(rèn)為在認(rèn)知功能、行為和決策能力起重要作用。本次研究的IS大鼠模型均為右側(cè)腦組織缺血壞死，右側(cè)海馬明顯灌注不足，與左側(cè)比較，引起更為顯著的變化[14]，故取大鼠右側(cè)海馬、前額葉皮質(zhì)作為觀察標(biāo)本。

NE神經(jīng)元參與中樞系統(tǒng)的記憶學(xué)習(xí)，經(jīng)調(diào)節(jié)突觸而出現(xiàn)減少干擾刺激的傳入，能更好地記錄及保存有效信息[15];DA在調(diào)節(jié)額葉記憶功能方面起著主要作用[16];5-HT調(diào)節(jié)大腦的智能方面發(fā)揮著極其重要的作用[17]。本研究結(jié)果表明，NE、DA、5-HT均有不同程度地降低，提示當(dāng)大腦缺血缺氧時(shí)，腦組織中的遞質(zhì)含量減少，從而引起記憶功能的改變[18]。本次研究觀察組VD大鼠海馬區(qū)相關(guān)神經(jīng)遞質(zhì)含量較模型組增加，提示大腦海馬區(qū)域神經(jīng)遞質(zhì)的減少與VD的發(fā)病可能相關(guān)。

本研究結(jié)果顯示，NE、DA、5-HT作為最主要的單胺類神經(jīng)遞質(zhì)不僅參與了大腦行為的調(diào)控，還與情感障礙、學(xué)習(xí)和認(rèn)知障礙相關(guān)。頤腦解郁方可以改善血管性癡呆大鼠的學(xué)習(xí)及記憶力下降，其作用機(jī)制可能改善大鼠腦內(nèi)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)DA的含量有關(guān)。由此可見(jiàn)，本研究初步驗(yàn)證了單胺類神經(jīng)遞質(zhì)能是頤腦解郁方發(fā)揮作用的一個(gè)靶點(diǎn)，但具體機(jī)制仍需進(jìn)一步的探討和研究。

參考文獻(xiàn)

[1]李鴻梅.缺血性腦卒中后血管性癡呆的影響因素分析[J].中國(guó)醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2015，26（1）：48-51.

[2]Zhang XQ，Li L，Huo JT，et al.Effects of repetitive transcranial magnetic stimulation on cognitive function and cholinergic activity in the rat hippocampus after vascular dementia[J].Neural Regen Res，2018，13（8）：1384-1389.

[3]Kwon KJ，Kim MK，Lee EJ，et al.Effects of donepezil，an acetylcholinesterase inhibitor，on neurogenesis in a rat model of vascular dementia[J].J Neurol Sci，2014，347（1-2）：66-77.

[4]范瑞娟，羅亞非，孫玉鳳.新式線栓法建立大鼠局灶性腦缺血再灌注模型的建立[J].中國(guó)民族民間醫(yī)藥，2014，31（6）：26-27.

[5]李冬梅，唐啟盛，李小黎，等.腦卒中后大鼠模型精神癥狀組群的改變及中藥的干預(yù)作用[J].北京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2011，34（6）：391-395.

[6]趙子珺，趙瑞珍，張媛，等.頤腦解郁方對(duì)缺血性腦卒中及卒中后抑郁、焦慮、癡呆大鼠宏觀表征變化的干預(yù)作用[J].世界中醫(yī)藥，2018，13（12）：3085-3090，3094.

[7]張媛.頤腦解郁方對(duì)腦出血后抑郁、焦慮、癡呆大鼠腦功能影像的干預(yù)作用研究[D].北京：北京中醫(yī)藥大學(xué)，2018.

[8]Vinters HV，Zarow C，Borys E，et al.Review：Vascular dementia： clinicopathologic and genetic considerations[J].Neuropathol Appl Neurobiol，2018，44（3）：247-266.

[9]王永炎，沈紹功，唐啟盛，等.今日中醫(yī)內(nèi)科：上卷[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2000：304-305.

[10]朱明瑾，唐啟盛.益腎調(diào)氣法治療血管性癡呆的理論探討[J].四川中醫(yī)藥雜志，2017，35（4）：53-55.

[11]Cordeiro M S，Zamfir M，Longo G，et al.Noradrenergic fiber sprouting and altered transduction in neuropathicprefrontalcortex[J].BrainStructFunct，2018，223（3）：1149-1164.

[12]李君，高維娟，路國(guó)兵，等.補(bǔ)陽(yáng)還五湯對(duì)血管性癡呆大鼠海馬GluR1蛋白及mRNA達(dá)的影響[J].中國(guó)病理生理雜志，2010，34（5）：901-906.

[13]Hong Y P，Lee H C，Kim H T.Treadmill exercise after social isolation increases the levels of NGF，BDNF，and synapsin I to induce survival of neurons in the hippocampus，and improves depression-like behavior[J].J Exerc Nutrition Biochem，2015，19（1）：11-18.

[14]Di Marco LY，Venneri A，F(xiàn)arkas E，et al.Vascular dysfunction in the pathogenesis of Alzheimer′s disease—a review of endothelium-mediated mechanisms and ensuing vicious circles[J].Neurobiology of Disease，2015，82（1）：593-606.

[15]李俊仙，肖紅玲，王霞，等.中藥治療血管性癡呆的實(shí)驗(yàn)研究進(jìn)展[J].中西醫(yī)結(jié)合心腦血管病雜志，2010，8（1）：89-90.

[16]金惠銘.病理生理學(xué)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2014：270-274.

[17]張會(huì)珍，梁玉磊，張雪靜，等.不同時(shí)間電針對(duì)血管性癡呆小鼠行為學(xué)及海馬單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的影響[J].針刺研究，2014，39（2）：42-147.

[18]彭艷，白雪，李陶，等.加味益氣聰明湯對(duì)血管性癡呆大鼠行為學(xué)及皮層區(qū)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的影響[J].河南中醫(yī)，2018，38（12）：1829-1832.