李蔚 ，張立 ，彭金霞 ，何蘋(píng)萍 ，韋嬪媛 ，張興志 ，官俊良 ，卓曉菲 ，趙文彬 ，鄭惠芳 ，李瓊珍

（1.廣西大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，廣西 南寧 530004；2.廣西壯族自治區(qū)水產(chǎn)科學(xué)研究院，廣西水產(chǎn)遺傳育種與健康養(yǎng)殖重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣西 南寧 530021）

欽州大蠔，學(xué)名“香港牡蠣”（Crassostrea hongkongensis），屬于暖水性近岸生長(zhǎng)的貝類，其肉質(zhì)鮮美，營(yíng)養(yǎng)豐富，具有極高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值。欽州大蠔是廣西貝類養(yǎng)殖的主導(dǎo)品種，近年來(lái)，欽州大蠔大規(guī)模死亡的現(xiàn)象頻繁發(fā)生，對(duì)廣西大蠔養(yǎng)殖業(yè)造成極大的經(jīng)濟(jì)損失。因此，對(duì)欽州大蠔死亡規(guī)律進(jìn)行調(diào)查分析，具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。

貝類養(yǎng)殖是中國(guó)海水養(yǎng)殖業(yè)的重要組成部分，近年來(lái)，海水貝類死亡的情況時(shí)有發(fā)生，造成巨大經(jīng)濟(jì)損失，嚴(yán)重威脅貝類養(yǎng)殖行業(yè)的健康發(fā)展[1]。引起貝類死亡有多種原因，櫛孔扇貝的死亡原因主要有：病原微生物的流行、種質(zhì)退化、高密度養(yǎng)殖及養(yǎng)殖環(huán)境惡化[2]。李樹(shù)國(guó)等[3]發(fā)現(xiàn)鹽度、水溫劇變，引起餌料生物和微生物菌群發(fā)生變化，使文蛤產(chǎn)生脅迫反應(yīng)，活力減弱、攝食減少、抗病力下降且生理機(jī)能出現(xiàn)障礙，從而導(dǎo)致文蛤大批量死亡。廉偉等[4]研究發(fā)現(xiàn)長(zhǎng)牡蠣夏季高溫死亡的最直接環(huán)境因素是海水溫度高、溶解氧低。2018年9月在欽州港三墩養(yǎng)殖區(qū)發(fā)生大蠔大規(guī)模死亡，其主要原因是海區(qū)富營(yíng)養(yǎng)化[5]。

2010年大風(fēng)江海域發(fā)生牡蠣春季死亡事件，國(guó)家貝類產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系廣西貝類綜合試驗(yàn)站于2011年1月持續(xù)對(duì)大風(fēng)江海域的牡蠣生長(zhǎng)、性腺發(fā)育、病原體及海區(qū)鹽度等環(huán)境因子進(jìn)行檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)高鹽脅迫可能是2011年大風(fēng)江香港牡蠣春季死亡的主要原因。2017年5月及2019年4月在欽州港、大風(fēng)江及三墩島海域再次發(fā)生養(yǎng)殖大蠔春季大規(guī)模死亡，其死亡原因尚未見(jiàn)報(bào)道。通過(guò)對(duì)2次欽州大蠔春季死亡調(diào)查情況進(jìn)行分析，找出其死亡原因，為預(yù)防春季欽州大蠔規(guī)模性死亡提供依據(jù)。

1 調(diào)查內(nèi)容與方法

1.1 調(diào)查內(nèi)容

2017年5月27—28日對(duì)欽州港及大風(fēng)江發(fā)生大蠔大規(guī)模死亡情況進(jìn)行調(diào)查，2019年4月18—20日對(duì)欽州港、大風(fēng)江、三墩島發(fā)生的大蠔大規(guī)模死亡情況進(jìn)行調(diào)查，進(jìn)行病死率統(tǒng)計(jì)、死亡率分布調(diào)查等工作。

1.2 海區(qū)采樣及檢測(cè)

現(xiàn)場(chǎng)采集發(fā)病海區(qū)的水樣，進(jìn)行水質(zhì)檢測(cè)，檢測(cè)其pH值、溶解氧、重金屬、農(nóng)藥殘留等指標(biāo)；采集海區(qū)正常牡蠣、死亡牡蠣，進(jìn)行解剖，利用稀釋涂布平板計(jì)數(shù)法檢測(cè)大蠔體內(nèi)細(xì)菌是否超標(biāo)；將牡蠣鰓及其他軟體組織涂片，并在顯微鏡下觀察，判斷其體內(nèi)是否含有寄生蟲(chóng)病原。

1.3 數(shù)據(jù)處理

根據(jù)安裝在發(fā)病區(qū)的水質(zhì)監(jiān)控探頭監(jiān)測(cè)海水水質(zhì)變化數(shù)據(jù)，利用Origin 8.0作圖分析發(fā)病海區(qū)歷年的溫度、鹽度變化趨勢(shì)。對(duì)蠔排進(jìn)行GPS定位，并以同一張蠔排上大蠔抽樣計(jì)數(shù)的方式，每張蠔排隨機(jī)抽取兩串，統(tǒng)計(jì)每串死亡與成活的牡蠣個(gè)體數(shù)后取平均值計(jì)算出病死率。

2 結(jié)果分析

2.1 水質(zhì)檢測(cè)及病害檢測(cè)

按照GB 3097—1997海水水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)及海水養(yǎng)殖用水NY 5052—2001水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)，海水中的pH值及溶解氧均在標(biāo)準(zhǔn)范圍內(nèi)，且未發(fā)現(xiàn)重金屬及農(nóng)藥殘留超標(biāo)等情況。死亡牡蠣消化道中的細(xì)菌密度與正常牡蠣相比，無(wú)明顯差異，均在牡蠣攜帶細(xì)菌的正常范圍內(nèi)；死亡牡蠣均無(wú)寄生蟲(chóng)病原感染。

2.2 溫度變化趨勢(shì)

欽州港及大風(fēng)江歷年的海水溫度見(jiàn)圖1，2017年5月發(fā)生大蠔大規(guī)模死亡的欽州港及大風(fēng)江溫度分別為26.9～30.1℃、26.4～30.6℃；欽州港海域未發(fā)生大蠔大規(guī)模死亡的2016年5月及2018年5月溫度范圍分別是26.1～29.6℃、25.9～31.4℃；大風(fēng)江海域未發(fā)生大蠔大規(guī)模死亡的2016年5月溫度范圍是26.3～32.1℃。2017年5月發(fā)生大蠔大規(guī)模死亡時(shí)欽州港與大風(fēng)江的溫度與同海區(qū)正常年份的溫度無(wú)明顯差異。

大風(fēng)江歷年的海水溫度變化見(jiàn)圖2，2019年3月發(fā)生大規(guī)模死亡海區(qū)的溫度為17.4～24.7℃；大風(fēng)江海域未發(fā)生大蠔大規(guī)模死亡的2016年3月、2017年3月及2018年3月溫度范圍分別是16.5～28.3℃、17～24.7℃及14.8～26.8℃。2016年3月及2018年3月有3 d的溫度差異明顯，但未造成大規(guī)模死亡，推測(cè)高溫不是造成2019年3月大風(fēng)江大蠔死亡的主要原因。

2.3 鹽度變化趨勢(shì)

圖1 歷年5月欽州港及大風(fēng)江的溫度變化趨勢(shì)

圖2 歷年3月大風(fēng)江的溫度變化趨勢(shì)

2017年春季降雨量較小，雨量的偏少可能導(dǎo)致海區(qū)長(zhǎng)時(shí)間處于高鹽狀態(tài)。由圖3可知，發(fā)生大蠔大規(guī)模死亡的欽州港及大風(fēng)江的鹽度范圍分別是18～25和20～30，且大風(fēng)江的鹽度長(zhǎng)時(shí)間高于25。欽州港海域未發(fā)生大蠔大規(guī)模死亡的2016年5月、2018年5月鹽度分別為15.9～25.1和17.5～29.3，與2017年5月無(wú)明顯差異；大風(fēng)江海域未發(fā)生大規(guī)模死亡的2016年5月的鹽度為16.4～22.2，明顯低于2017年5月。因此，2017年5月大風(fēng)江的大蠔大規(guī)模死亡可能是鹽度長(zhǎng)時(shí)間高于正常值所致。

2019年4月大風(fēng)江發(fā)生大蠔大規(guī)模死亡，其歷年的鹽度變化見(jiàn)圖4，2019年3月1—23日鹽度范圍為18.9～25.5，根據(jù)自動(dòng)鹽度計(jì)顯示，從3月24日起大風(fēng)江的鹽度維持在25～27。同一海區(qū)，未發(fā)生大蠔大規(guī)模死亡的2016年3月23—31日鹽度為18.4～22.3，2018 年 3 月鹽度在 22.3～26.7，且長(zhǎng)期低于25。大風(fēng)江從2019年3月23日起的海水鹽度明顯高于2016及2018年3月的鹽度，因此，2019年3月大風(fēng)江的大蠔大規(guī)模死亡可能是鹽度長(zhǎng)時(shí)間高于正常值所致。

圖3 歷年5月大風(fēng)江及欽州港海域鹽度變化趨勢(shì)

圖4 歷年3月大風(fēng)江海域鹽度變化趨勢(shì)

2.4 死亡規(guī)律分析

2.4.1 病死率統(tǒng)計(jì) 欽州港及大風(fēng)江，2017年5月10日部分大蠔開(kāi)始死亡，5月16日起爆發(fā)性死亡；大風(fēng)江2019年4月5日開(kāi)始出現(xiàn)大蠔死亡，4月9日起大規(guī)模死亡。由表1可知，2017年5月欽州港36%蠔排的大蠔病死率大于60%，大風(fēng)江81%蠔排的病死率在60%以上，大風(fēng)江的病死率高于欽州港；2019年3—4月欽州港19%蠔排的大蠔病死率大于60%，大風(fēng)江41%蠔排的病死率在60%以上，三墩96%蠔排的病死率在60%以上，三墩的病死率最高，其次是大風(fēng)江，欽州港的死亡率最小。

2.4.2 病死率分布規(guī)律由2017年5月欽州港及大風(fēng)江大蠔病死率分布圖可知（圖5），越靠近出?？?，鹽度越高，大蠔病死率越高。2019年4月欽州港及大風(fēng)江各抽查點(diǎn)的鹽度均在20以上，大蠔病死率分布呈現(xiàn)相同的規(guī)律（圖6），即越靠近出?？?，鹽度越高，大蠔病死率越高；而三墩島位于外海海區(qū)，抽查點(diǎn)的鹽度在25～29之間，大蠔病死率在90%以上（圖7）。

表1 大蠔死亡程度占比

3 討論

3.1 大蠔死亡與病害無(wú)關(guān)

該研究中的死亡牡蠣體內(nèi)攜帶細(xì)菌在正常范圍且無(wú)寄生蟲(chóng)病原感染，因此，這2次牡蠣大規(guī)模死亡與細(xì)菌性疾病、主要致死寄生蟲(chóng)病原無(wú)關(guān)。

3.2 溫度對(duì)大蠔生長(zhǎng)及死亡的影響

貝類屬于變溫動(dòng)物，因此，溫度是影響貝類各項(xiàng)生理活動(dòng)的重要環(huán)境因子[6]。隨著溫度的升高，貝類的各器官活動(dòng)性提高，酶的活性作用增強(qiáng)，當(dāng)超過(guò)極限溫度時(shí)，會(huì)引起生理功能紊亂，導(dǎo)致貝類的死亡[7]。香港牡蠣的最適生長(zhǎng)溫度是22℃，其攝食和代謝在水溫18～28℃之間處于較適宜水平[8]。許多研究表明，水溫的波動(dòng)會(huì)影響貝類的性腺發(fā)育[9-10]，於鋒等[11]研究發(fā)現(xiàn)香港牡蠣性腺的發(fā)育與海水溫度有密切的關(guān)系，25℃是牡蠣性腺保持活躍的成熟排放期的下限。因此，海水長(zhǎng)時(shí)間保持高溫，有可能造成大蠔代謝紊亂、精卵排放受到抑制，導(dǎo)致大蠔死亡。因此，2017年5月欽州海域的海水溫度在26℃以上，有可能造成大蠔死亡；但同一海區(qū)，不同抽查點(diǎn)的溫度差異不大，病死率卻有差別，推測(cè)溫度不是造成大蠔大規(guī)模死亡的主要原因。

圖5 2017年5月欽州港及大風(fēng)江大蠔病死率分布

圖6 2019年3-4月欽州港及大風(fēng)江大蠔病死率分布

圖7 2019年3—4月三墩島大蠔病死率分布

3.3 鹽度對(duì)大蠔生長(zhǎng)及死亡的影響

鹽度是一種與海水貝類滲透壓密切相關(guān)的環(huán)境因子，貝類為適應(yīng)環(huán)境滲透壓而改變各項(xiàng)生理活動(dòng)，從而影響其生長(zhǎng)發(fā)育、新陳代謝及其存活[12]。香港牡蠣的適宜鹽度范圍為5～25，最適鹽度范圍10～20，對(duì)低鹽度有較強(qiáng)的抗性，但對(duì)高鹽度的耐受性弱[13]。該次調(diào)查分析結(jié)果表明，當(dāng)海水鹽度高于25，持續(xù)12 d后，大蠔開(kāi)始陸續(xù)死亡，持續(xù)時(shí)間16 d后，大蠔開(kāi)始大規(guī)模死亡；同一海域不同抽查點(diǎn)的大蠔病死率不同，鹽度越高病死率越高。

鹽度能通過(guò)調(diào)控代謝強(qiáng)度、激素水平等影響水生生物的性腺發(fā)育[14-15]，於鋒等[11]研究表明，高鹽度會(huì)使精卵的排放受到抑制，性腺出現(xiàn)過(guò)熟或退化形變。正常情況下，海水鹽度都處于一個(gè)較平穩(wěn)的高低鹽度輪流出現(xiàn)的狀態(tài)，淡水注入和漲潮時(shí)海水的倒灌讓海區(qū)有激烈的水體交換，使得營(yíng)養(yǎng)鹽相對(duì)豐富[16]，有利于牡蠣的生長(zhǎng)發(fā)育和正常精卵的排放。2017年5月及2019年3—4月降雨量趨少，造成海水鹽度長(zhǎng)期高于25。3—5月正值牡蠣性腺成熟期，養(yǎng)殖區(qū)海水鹽度持續(xù)偏高，促使牡蠣的性腺長(zhǎng)期保持熟化的應(yīng)激狀態(tài)，精卵無(wú)法通過(guò)較低鹽度的刺激，得到有效排放和緩解，可能是導(dǎo)致牡蠣死亡的主要原因。

4 結(jié)論與建議

廣西欽州大蠔春季大規(guī)模死亡的主要原因可能是長(zhǎng)時(shí)間受到高鹽脅迫，導(dǎo)致精卵排放受到影響等。

在春季需要密切監(jiān)測(cè)養(yǎng)殖海域的鹽度變化，觀察欽州大蠔性腺發(fā)育情況。若養(yǎng)殖海域的海水鹽度持續(xù)偏高，持續(xù)時(shí)間超過(guò)12 d后，應(yīng)擇機(jī)實(shí)施人工降雨，并加強(qiáng)水資源應(yīng)急調(diào)度，提高江河入海徑流量，緩解養(yǎng)殖區(qū)域海水持續(xù)高鹽情況；或臨時(shí)遷移部分蠔排至鹽度較低海域。