楊昌彪 付春艷 羅廷武

關(guān)鍵詞：QuECHERS;LC-MS/MS;快速檢測(cè);番茄;農(nóng)藥殘留

隨著生活水平的提高，人們的飲食消費(fèi)需求逐漸從解決溫飽向質(zhì)量安全、營(yíng)養(yǎng)方向轉(zhuǎn)變。農(nóng)藥殘留是現(xiàn)階段關(guān)于農(nóng)產(chǎn)品的一個(gè)關(guān)注熱點(diǎn)，由于農(nóng)產(chǎn)品具有保質(zhì)期短、不易保存等特點(diǎn)，因此在監(jiān)管過程中須要快速對(duì)其質(zhì)量安全指標(biāo)進(jìn)行快速檢測(cè)分析，以便于執(zhí)法。但目前國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)所規(guī)定的對(duì)農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留進(jìn)行的檢測(cè)方法前處理過程繁瑣，不易快速篩查，且因標(biāo)準(zhǔn)制定較早，新藥上市后，國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)方法更新滯后，不利于對(duì)產(chǎn)品進(jìn)行快速篩查。

目前檢測(cè)農(nóng)藥殘留的方法眾多，常見的有氣相色譜法（GC）[1]、液相色譜法（LC）[2]、氣質(zhì)聯(lián)用法[3]、液質(zhì)聯(lián)用（LC-MS）法[4]等。不同的檢測(cè)方法及標(biāo)準(zhǔn)各有優(yōu)缺點(diǎn)，前處理過程繁瑣及儀器分析時(shí)間長(zhǎng)是這些方法常見的突出問題，不易于大批量樣品的快速檢測(cè)分析。黃霞等建立了柑橘中常見的50種農(nóng)藥殘留的氣相色譜/質(zhì)譜（GC/MS）檢測(cè)方法，平均回收率為 72.0%～118.2%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）為1.7%～19.7%[5]。劉冰等采用QuEChERS（quick、easy、cheap、effective、rugged、safe）方法對(duì)試樣進(jìn)行前處理后，再采用質(zhì)譜法進(jìn)行農(nóng)藥殘留檢測(cè)分析，建立了同時(shí)測(cè)定蔬菜水果中31種農(nóng)藥殘留的方法，回收率在72%～128%之間，RSD為4.2%～9.9%[6]。余璐等將茶葉樣品用乙腈提取后，采用石墨化碳黑（Carb）-乙二胺基-N-丙基（PSA）萃取小柱進(jìn)行凈化，然后通過儀器檢測(cè)比對(duì)分析，建立了茶葉中204種農(nóng)藥殘留的超高效液相色譜-四極桿-飛行時(shí)間質(zhì)譜（UPLC-Q-TOF/MS）快速篩查法[7]。本研究建立了番茄中多種農(nóng)藥殘留分析方法，旨在為水果蔬菜中農(nóng)藥殘留的快速篩查分析提供一定的技術(shù)方法支撐。

1 材料與方法

1.1 主要儀器、試劑與材料

液相色譜質(zhì)譜儀[Aglient1200-6410，安捷倫科技（中國(guó)）有限公司];電子天平[BSA124S-CW，賽多利斯科學(xué)儀器（北京）有限公司];低速離心機(jī)（湘儀L550，湖南湘儀實(shí)驗(yàn)室儀器開發(fā)有限公司）;高速離心機(jī)（TG16W，長(zhǎng)沙平凡儀器儀表有限公司）。

甲醇、乙腈（Merck公司產(chǎn)品）;農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品（抗蚜威、3-羥基克百威、噻蟲啉、克百威、甲萘威、甲霜靈、嘧霉胺、咪鮮胺、殺撲磷、滅線磷、馬拉硫磷、氯唑磷、三唑磷、蟲酰肼、苯醚甲環(huán)唑、治螟磷、二甲戊靈、阿維菌素），由農(nóng)業(yè)農(nóng)村部環(huán)境保護(hù)科研監(jiān)測(cè)所提供;番茄樣品為市售。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 樣品前處理 稱取15.00 g番茄樣品置于50 mL塑料離心管中，加入15 mL 1%醋酸乙腈溶液，渦旋，超聲提取15 min，加入鹽析包及小磁石，迅速搖勻后，置于冰水中快速冷卻，然后劇烈振搖 10 min，在4 000 r/min條件下離心5 min，靜置片刻，吸取1.5 mL離心上清液置于2 mL QuEchERS凈化管中，渦漩振蕩1 min，在12 000 r/min條件下離心2 min，過0.22 μm有機(jī)相濾膜，備用。

1.2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線配制 稱取5個(gè)陰性樣品，按照“1.2.1”節(jié)中的方法進(jìn)行處理，取8 mL進(jìn)行凈化，離心后合并凈化液，用于標(biāo)準(zhǔn)溶液配制。分別取18種濃度均為100 μg/mL的農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品0.50 mL置于10 mL容量瓶中，用甲醇定容，得到濃度為 5.00 μg/mL 的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，取濃度為 5.00 μg/mL 的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液0.4 mL置于10 mL容量瓶中，用甲醇定容，得到200 ng/mL稀釋液。然后分別取 200 ng/mL 稀釋液0.15、0.50、1.00、2.00、2.50 mL 置于5 mL容量瓶，用空白基質(zhì)定容，得濃度分別為0.006、0.020、0.040、0.080、0.10 μg/mL的溶液。

1.2.3 色譜條件 色譜柱：Agilent Zorbax-C18柱（3.0 mm×100 mm，2.7 μm）;流動(dòng)相用0.1%甲酸乙腈（A）和0.002 mol/L乙酸銨水溶液（B）進(jìn)行梯度洗脫，淋洗梯度：0～1 min（95%+5%）;1.0～1.5 min（50%+50%）;1.5～3.0 min（40%+60%）;3～5 min（5%+95%）;5～7 min（5%+95%）;7～8 min（95%+5%）。流速為0.3 mL/min，進(jìn)樣量為10 μL，柱溫40 ℃。

1.2.4 質(zhì)譜條件 離子檢測(cè)方式為多反應(yīng)離子檢測(cè)（MRM）和子離子掃描，極性為正離子（positive），離子化方式為電噴霧離子化（ESI），毛細(xì)管電壓為 4 000 V，干燥氣溫度為330 ℃，干燥氣流速為 8.0 L/min，霧化氣壓力為40 psi。其他質(zhì)譜條件詳見表1。

2 結(jié)果與分析

2.1 LC-MS/MS總離子流圖

在“1.2.3”“1.2.4”節(jié)條件下測(cè)得，18種農(nóng)藥總離子流圖和樣品空白圖見圖1，不同農(nóng)藥提取離子色譜見圖2。

因儀器的靈敏度較高，低含量目標(biāo)物受到的干擾較大，須用不同基質(zhì)對(duì)同類樣品提取目標(biāo)物進(jìn)行基質(zhì)配標(biāo)校正，以降低基質(zhì)效應(yīng)，保證結(jié)果的準(zhǔn)確性。從圖1可以看出，該方法在5.5 min內(nèi)即可完成對(duì)18種農(nóng)藥殘留的檢測(cè)，因目標(biāo)化合物保留時(shí)間比較接近，所以總離子流圖出現(xiàn)峰重疊現(xiàn)象，但提取離子色譜圖后，峰型良好，不影響定性、定量分析結(jié)果，同時(shí)，氯唑磷和三唑磷保留時(shí)間與母離子基本相同，因此通過優(yōu)化后可用質(zhì)荷比（m/z）為286的離子峰輔助氯唑磷定性。

2.2 檢測(cè)方法的線性范圍及檢出限

通過基質(zhì)配標(biāo)，上儀器分析后，不同化合物在0.006～0.100 μg/mL濃度范圍內(nèi)的線性方程及相關(guān)系數(shù)見表2。同時(shí)，按3倍信噪比（S/N）計(jì)算檢測(cè)方法檢出限。

2.3 檢測(cè)方法的回收率及實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的變異系數(shù) 稱取18份陰性樣品，設(shè)置3個(gè)添加水平（8、50、100 μg/kg），每個(gè)水平設(shè)6個(gè)平行，檢測(cè)結(jié)果見表2。

從表2可以看出，采用本研究方法檢測(cè)18種農(nóng)藥殘留得到的回歸方程線性良好，相關(guān)系數(shù)均在 0.995 9～0.999 9間，不同添加水平的回收率均在70.1%～128.9%，變異系數(shù)在0.2%～12.6%，回收率及變異系數(shù)滿足實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制規(guī)范要求，證明了本研究方法具有可行性。

3 結(jié)論

通過Quechers前處理技術(shù)與LC-MS/MS結(jié)合的方法，建立了對(duì)番茄中18種農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)的方法，采用3個(gè)添加水平的農(nóng)藥對(duì)該方法進(jìn)行驗(yàn)證，結(jié)果表明，該方法測(cè)定的結(jié)果穩(wěn)定，靈敏度高，重復(fù)性好，能滿足日常檢測(cè)工作需要。

參考文獻(xiàn)：

[1]吳福中，王錦海，劉志紅，等. 氣相色譜法測(cè)定蔬菜中7種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留[J]. 中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào)，2009，25（19）：59-61.

[2]馬紀(jì)偉，閆冬良. HPLC法測(cè)定獼猴桃中氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量[J]. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2008，36（26）：11195-11196.

[3]趙曉萌，于同泉，朱高群，等. 氣相色譜-質(zhì)譜法檢測(cè)蔬菜和水果中35種農(nóng)藥殘留[J]. 色譜，2005，23（3）：328.

[4]鄧立剛，李增梅，郭長(zhǎng)英，等. 超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定蔬菜中7種氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留[J]. 食品科學(xué)，2011，32（6）：221-224.

[5]黃 霞，宋 瑩，張耀海，等. QuEChERS-GC/MS快速檢測(cè)柑橘中50種農(nóng)藥殘留[J]. 食品科學(xué)，2011，32（18）：268-273.

[6]劉 冰，劉全科，周 揚(yáng)，等. QuEChERS/LC-MS-MS快速測(cè)定蔬菜水果中31種氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留[J]. 湖北植保，2016（4）：31-34.

[7]余 璐，宋 偉，呂亞寧，等. 超高效液相色譜-四極桿-飛行時(shí)間質(zhì)譜法快速篩查茶葉中的204種農(nóng)藥殘留[J]. 色譜，2015，33（6）：597-612.王發(fā)勇，牛紹輝，徐 超，等. 基于煙片結(jié)構(gòu)和保香加工的潤(rùn)葉參數(shù)模式篩選[J].