榮 輝，李葉芳，關(guān)文靈，杜文軍，周恒蒼

（1.云南農(nóng)業(yè)大學(xué)，云南 昆明 650201；2.云南省芳香生物工程技術(shù)研究中心，云南 昆明 650201）

花椒屬植物在我國(guó)分布范圍大，栽培歷史悠久[1]?，F(xiàn)代研究結(jié)果顯示，花椒各部位含有多種類型的資源性化學(xué)成分，在食品、醫(yī)療和工業(yè)等多個(gè)領(lǐng)域應(yīng)用廣泛。目前，市場(chǎng)上的一些食用花椒主要包括花椒Zanthoxylum bungeanum及花椒原變種Z.bungeanumvar.bungeanum（又名川椒、大紅袍等）、青花椒Z.schinifolium、兩面針Z.nitidumvar.nitidum、竹葉花椒Z.armatum和頂壇花椒Z.planispinumvar.dingtanensis等[2]。花椒屬植物含有揮發(fā)油、生物堿和香豆素等多種生物活性物質(zhì)，這些物質(zhì)在抑菌、抗蟲(chóng)和抗腫瘤等方面均有較大作用，藥用價(jià)值較高[3]?；ń窊]發(fā)油在食品和農(nóng)產(chǎn)品貯藏保鮮方面潛力較大[4]。此外，花椒還具有保持水土、防風(fēng)固沙和改善小氣候等功能，有著重要的生態(tài)價(jià)值[5-7]。

墨脫花椒Z.motuoense為落葉小喬木，僅產(chǎn)于西藏墨脫，常見(jiàn)于海拔1 100 m 的山地雜林中[8]。墨脫花椒香味獨(dú)特，具有木姜子的香味，深受藏區(qū)人民喜愛(ài)，主要用作烹飪調(diào)料，具有較高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值，目前已被列為墨脫縣鄉(xiāng)村精準(zhǔn)扶貧的經(jīng)濟(jì)林木樹(shù)種之一。然而長(zhǎng)期以來(lái)，當(dāng)?shù)厝酥饕杉吧摶ń烦鍪刍蜃约菏秤茫瑑H見(jiàn)零星人工種植（對(duì)野生植株的移植）。缺乏種苗已成為制約墨脫花椒產(chǎn)業(yè)發(fā)展的主要瓶頸。花椒主要的繁殖方式有播種[9]、扦插[10]、嫁接[11]和組培快繁等[12]。經(jīng)前期調(diào)查發(fā)現(xiàn)，墨脫花椒種子產(chǎn)量低，空殼率高，且有休眠習(xí)性，因此種子繁殖較為困難。扦插繁殖具有技術(shù)操作簡(jiǎn)便、能夠保持母本優(yōu)良性狀、結(jié)實(shí)早的優(yōu)點(diǎn)，是發(fā)展經(jīng)濟(jì)林木的主要繁殖途徑之一。目前，關(guān)于墨脫花椒繁殖方面的研究鮮見(jiàn)報(bào)道。本研究中以1年生墨脫花椒實(shí)生苗為試材，探究插穗木質(zhì)化程度、扦插季節(jié)、植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑種類及濃度和扦插基質(zhì)等因素對(duì)墨脫花椒扦插生根的影響，旨在為墨脫花椒扦插育苗體系的建立提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

在云南農(nóng)業(yè)大學(xué)園林園藝學(xué)院溫室大棚內(nèi)，選取高1.2 ～1.5 m 的1年生健壯墨脫花椒實(shí)生苗為試材。將實(shí)生苗莖段修剪成長(zhǎng)5 ～8 cm 的帶芽插穗，每個(gè)插穗保留半片葉子，上端剪成平口，下端剪成斜口。根據(jù)實(shí)生苗莖段木質(zhì)化程度，可將插穗分為上部未木質(zhì)化軟枝、中下部半木質(zhì)化半硬枝、基部木質(zhì)化硬枝，整株植株中以中下部半木質(zhì)化半硬枝數(shù)量為最多，約占75%。選擇整齊度基本一致的插穗備用。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

1.2.1 插穗木質(zhì)化程度對(duì)插穗生根的影響

在2019年3月10 日—4月10 日進(jìn)行試驗(yàn)。插穗木質(zhì)化程度處理分別標(biāo)記為A1（未木質(zhì)化）、A2（半木質(zhì)化）、A3（木質(zhì)化），扦插基質(zhì)選用細(xì)草炭土+珍珠巖（體積比1∶1）。扦插前選用500 mg/L IBA 處理插穗10 min。

1.2.2 扦插季節(jié)對(duì)插穗生根的影響

在2019年3月10 日—4月10 日和5月15 日—6月15 日進(jìn)行試驗(yàn)，分別標(biāo)記為B1（春季）和B2（夏季）處理。選取花椒苗植株基部插穗為試材，扦插基質(zhì)選用細(xì)草炭土+珍珠巖（體積比1∶1）。扦插前選用500 mg/L NAA 處理插穗10 min。

1.2.3 植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑種類及其濃度和基質(zhì)對(duì)插穗生根的影響

在2019年5月15 日—6月15 日進(jìn)行試驗(yàn)。選取花椒苗植株中下部插穗為試材。植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑種類（D）設(shè)置3 個(gè)處理，分別為D1（IBA）、D2（NAA）、D3（IBA+NAA）。植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑濃度（C）設(shè)置5 個(gè)處理，分別為C1（0 mg/L）、C2 （250 mg/L）、C3（500 mg/L）、C4（1 000 mg/L）、 C5（1 500 mg/L）。基質(zhì)（E）設(shè)置2 個(gè)處理，分別為E1（細(xì)草炭土+珍珠巖，體積比1∶1）和E2 （細(xì)椰糠）。生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑處理時(shí)間均為10 min。采用5×3×2 的析因設(shè)計(jì)，共計(jì)30 個(gè)處理。

1.3 扦插和管理方法

在溫室大棚的5 m×4 m×1.7 m 小拱棚中進(jìn)行試驗(yàn)。采用平插法，將插穗均勻插入650 mm× 410 mm×155 mm 的扦插框，插入深度為1/3 ～ 1/2 插穗長(zhǎng)。扦插完成后澆透水并在2 d 內(nèi)蓋好塑料薄膜和75%透光率的遮陽(yáng)網(wǎng)，保留少量通氣孔。后期根據(jù)拱棚內(nèi)溫度和濕度情況進(jìn)行管理，小拱棚內(nèi)溫度控制在25 ℃左右，空氣濕度在80%以上，基質(zhì)濕度以用手捏成團(tuán)感覺(jué)微微濕潤(rùn)為標(biāo)準(zhǔn)。溫濕度差異較大時(shí)，掀開(kāi)薄膜和遮陽(yáng)網(wǎng)通風(fēng)，或向小拱棚空氣中噴灑少許清水加濕。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

均采用完全隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)，對(duì)每個(gè)處理進(jìn)行獨(dú)立隨機(jī)分配，每個(gè)處理30 株插穗，重復(fù)3 次。1 個(gè)月后統(tǒng)計(jì)插穗生根情況，以根系長(zhǎng)度≥0.5 cm為有效根長(zhǎng)。

成活率=成活插穗數(shù)/總插穗數(shù)×100%；

生根率=生根插穗數(shù)/總插穗數(shù)×100%；

單株生根數(shù)=插穗生根總數(shù)/生根插穗數(shù)× 100%；

平均不定根長(zhǎng)=插穗生根總長(zhǎng)/生根插穗數(shù)× 100%；

平均最長(zhǎng)不定根長(zhǎng)=插穗最長(zhǎng)不定根長(zhǎng)之和/插穗最長(zhǎng)不定根長(zhǎng)總數(shù)×100%[13]；

根系效果指數(shù)=(根系數(shù)量×根系長(zhǎng)度)/總插穗數(shù)[14]。

試驗(yàn)獲得數(shù)據(jù)用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示，采用Excel2003 和SPSS25.0 軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析。在數(shù)據(jù)分析前對(duì)成活率和生根率進(jìn)行反正弦數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換對(duì)單株生根數(shù)、平均不定根長(zhǎng)、最長(zhǎng)不定根長(zhǎng)和根系效果指數(shù)進(jìn)行平方根數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換。

采用模糊數(shù)學(xué)法隸屬函數(shù)，根據(jù)各指標(biāo)隸屬函數(shù)值，計(jì)算各因素處理組合的平均隸屬函數(shù)值對(duì)各因素處理組合進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)[15]。各指標(biāo)的隸屬函數(shù)值（Ui）計(jì)算公式為

Ui=(xi-xmin)/(xmax-xmin)。

式中：xi為指標(biāo)i的測(cè)定值，xmax為全部處理指標(biāo)i的最大值，xmin為全部處理指標(biāo)i的最小值。

2 結(jié)果與分析

2.1 單因素試驗(yàn)

2.1.1 插穗木質(zhì)化程度對(duì)插穗生根的影響

扦插1 個(gè)月后，不同木質(zhì)化程度插穗的扦插生根指標(biāo)及其多重比較結(jié)果見(jiàn)表1。由表1 可知，不同木質(zhì)化程度插穗的6 項(xiàng)生根指標(biāo)變化規(guī)律一致，即木質(zhì)化插穗（A3）各項(xiàng)指標(biāo)最高，半木質(zhì)化插穗（A2）次之，未木質(zhì)化插穗（A1）最低，三者之間均存在顯著差異（P＜0.05）。生根插穗的狀態(tài)如圖1 所示。在扦插過(guò)程中，由于扦插初期基質(zhì)濕度和空氣濕度過(guò)大，上部未木質(zhì)化插穗全部腐爛死亡，導(dǎo)致其各項(xiàng)指標(biāo)均為0。綜合各項(xiàng)指標(biāo)來(lái)看，木質(zhì)化插穗生根效果最好，其原因可能是下部插穗木質(zhì)化程度較高，不易腐爛，內(nèi)部?jī)?chǔ)存營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)較多，更有利于生根。

表1 不同木質(zhì)化程度墨脫花椒插穗的生根指標(biāo)?Table 1 Rooting indexes in Z.motuoense cuttings at different lignification levels

2.1.2 扦插季節(jié)對(duì)插穗生根的影響

在不同季節(jié)進(jìn)行扦插的插穗生根指標(biāo)及其多重比較結(jié)果見(jiàn)表2。由表2可知，春季（B1）和夏季（B2）扦插的插穗成活率間和生根率間不存在顯著差異，說(shuō)明扦插季節(jié)對(duì)插穗的成活率和生根率影響不大。而夏季扦插插穗的其他4 項(xiàng)指標(biāo)均高于春季扦插，單株生根數(shù)在兩者間存在顯著差異，平均不定根長(zhǎng)、最長(zhǎng)不定根長(zhǎng)和根系效果指數(shù)在兩者間存在極顯著差異（P＜0.01）。與春季扦插插穗相比，夏季扦插插穗的成活率提高2.22 百分點(diǎn)，生根率提高3.34百分點(diǎn)，單株生根數(shù)多0.7 條，平均不定根長(zhǎng)提高0.34 cm，最長(zhǎng)不定根長(zhǎng)提高0.5 cm，根系效果指數(shù)提高0.035 7。綜合來(lái)看，夏季較春季更適合墨脫花椒扦插，這可能與夏季溫度更高有關(guān)，較高的溫度有利于生根，此外，夏季插穗營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)更多，生長(zhǎng)更加旺盛也可能是原因之一。

圖1 墨脫花椒插穗生根狀態(tài)Fig.1 Rooting status in Z.motuoense cutting

表2 不同季節(jié)扦插墨脫花椒插穗的生根指標(biāo)Table 2 Rooting indexes in Z.motuoense cuttings in different seasons

2.2 析因試驗(yàn)

2.2.1 植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑濃度對(duì)插穗生根的影響

不同植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑濃度處理中墨脫花椒插穗的各生根指標(biāo)及其方差分析和多重比較結(jié)果見(jiàn)表3。由方差分析結(jié)果可知，單因素效應(yīng)中，植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑濃度（C）對(duì)插穗5 項(xiàng)生根指標(biāo)的影響均達(dá)到極顯著水平。

由表3 可知，除成活率外的4 項(xiàng)生根指標(biāo)隨著植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑濃度的增大呈現(xiàn)先上升、后下降的趨勢(shì)。在植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑質(zhì)量濃度為1 000 mg/L 時(shí)，生根率、單株生根數(shù)、平均不定根長(zhǎng)和最長(zhǎng)不定根長(zhǎng)4 項(xiàng)指標(biāo)均達(dá)到最大，顯著高于其余4個(gè)處理。在植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑質(zhì)量濃度為250、500和1 500 mg/L 時(shí)，這4 項(xiàng)指標(biāo)顯著高于對(duì)照處理（蒸餾水處理）。對(duì)照處理的插穗成活率最高，除了在扦插管理中插穗由于腐爛死亡外，生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑對(duì)插穗可能還存在一定毒害作用，導(dǎo)致插穗成活率降低，均顯著低于對(duì)照處理，且4 個(gè)處理間均不存在顯著差異。對(duì)照處理另外4 項(xiàng)生根指標(biāo)均為0，可見(jiàn)蒸餾水處理插穗的生根效果并不理想，在1個(gè)月內(nèi)不能誘導(dǎo)墨脫花椒插穗形成不定芽。綜合來(lái)看，質(zhì)量濃度250 ～1 500 mg/L 的生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑均能提高插穗生根效果，但質(zhì)量濃度過(guò)高會(huì)有一定抑制作用，以1 000 mg/L 為最佳。

表3 不同植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑濃度處理中墨脫花椒插穗的生根指標(biāo)?Table 3 Rooting indexes in Z.motuoense cuttings in treatments of different plant growth regulator concentrations

2.2.2 植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑種類對(duì)插穗生根的影響

不同植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑種類處理中墨脫花椒插穗的各生根指標(biāo)及其方差分析和多重比較結(jié)果見(jiàn)表4。由方差分析結(jié)果可知，單因素效應(yīng)中，植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑種類（D）對(duì)插穗成活率的影響達(dá)到顯著水平，對(duì)其余4 項(xiàng)指標(biāo)的影響達(dá)到極顯著水平。

表4 不同植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑種類處理中墨脫花椒插穗的生根指標(biāo)Table 4 Rooting indexes in Z.motuoense cuttings in treatments of different plant growth regulator types

由表4 可知，以NAA 和IBA+NAA 處理插穗的成活率顯著高于IBA 處理，以NAA 處理成活率最高。與NAA 相比，IBA 可能對(duì)插穗成活率有一定抑制作用，這可能與其對(duì)插穗的毒害作用有關(guān)。在各處理中，生根率和單株生根數(shù)表現(xiàn)一致，各處理按照其效應(yīng)由高到低排序依次為IBA+NAA、NAA、IBA，且單株生根數(shù)在三者間均存在顯著差異。在各處理中，平均不定根長(zhǎng)和最長(zhǎng)不定根長(zhǎng)表現(xiàn)一致，各處理按照其效應(yīng)由高到低排序依次為IBA+NAA、IBA、NAA，且平均不定根長(zhǎng)在三者間均存在顯著差異。由此可知，IBA 會(huì)降低插穗的成活率，單獨(dú)使用NAA 處理插穗的生根率和單株生根數(shù)高于單獨(dú)使用IBA 處理，而單獨(dú)使用IBA 處理插穗的平均不定根長(zhǎng)和最長(zhǎng)不定根長(zhǎng)高于單獨(dú)使用NAA 處理，說(shuō)明NAA 更有利于墨脫花椒插穗不定根的形成，IBA 更有利于不定根的伸長(zhǎng)生長(zhǎng)，二者混合使用產(chǎn)生的效應(yīng)最大，不定根發(fā)生與伸長(zhǎng)效果均優(yōu)于單獨(dú)使用的處理。可見(jiàn)，以IBA+NAA 處理插穗效果最好。

2.2.3 基質(zhì)對(duì)插穗生根的影響

不同基質(zhì)處理中墨脫花椒插穗的各生根指標(biāo)及其方差分析和多重比較結(jié)果見(jiàn)表5。由表5 可知，細(xì)椰糠處理中插穗的5 項(xiàng)生根指標(biāo)均高于細(xì)草炭土+珍珠巖處理。由方差分析結(jié)果可知，單因素效應(yīng)中，基質(zhì)（E）對(duì)除單株生根數(shù)外4 項(xiàng)指標(biāo)的影響均達(dá)到極顯著水平。其原因可能是細(xì)草炭 土+珍珠巖的保水性較好，透氣性較差，水分過(guò)多導(dǎo)致成活率低，不定根也不易發(fā)生與伸長(zhǎng)，而細(xì)椰糠保濕效果適宜，透氣性較好，更有利于插穗生根。

2.2.4 多因素交互作用對(duì)插穗生根的影響

多因素交互作用下墨脫花椒插穗生根指標(biāo)的方差分析結(jié)果見(jiàn)表6。由表6 可知，兩因素交互作用中，植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑濃度×植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑種類（C×D）對(duì)插穗生根指標(biāo)的影響最大，對(duì)生根率、單株生根數(shù)、平均不定根長(zhǎng)和最長(zhǎng)不定根長(zhǎng)的影響均達(dá)到極顯著水平；其次為植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑濃度×基質(zhì)（C×E），對(duì)生根率、平均不定根長(zhǎng)和最長(zhǎng)不定根長(zhǎng)的影響均達(dá)到極顯著水平；植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑種類×基質(zhì)（D×E）交互作用最小，對(duì)生根率和平均不定根長(zhǎng)的影響達(dá)到極顯著水平，對(duì)最長(zhǎng)不定根長(zhǎng)的影響達(dá)到了顯著水平。在植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑濃度、植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑種類、基質(zhì)三因素的交互作用（C×D×E）中，對(duì)生根率、平均不定根長(zhǎng)和最長(zhǎng)不定根長(zhǎng)的影響達(dá)到極顯著水平。以上分析結(jié)果表明，插穗生根指標(biāo)主要受3個(gè)主因素效應(yīng)和植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑濃度×植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑種類交互作用的影響。

表5 不同基質(zhì)處理中墨脫花椒插穗的生根指標(biāo)Table 5 Rooting indexes in Z.motuoense cuttings in treatments of different substrates

表6 多因素交互作用下墨脫花椒插穗生根指標(biāo)的方差分析結(jié)果（F 值）Table 6 Results of variance analysis on rooting indexes in Z.motuoense cuttings under interaction of various factors (F value)

2.3 各因素組合中插穗生根效果的綜合評(píng)價(jià)

由于不同處理中各項(xiàng)生根指標(biāo)差異較大，為了全面客觀地反映各組合的扦插效果，采用隸屬函數(shù)法進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)。在30 個(gè)處理組合中取平均隸屬函數(shù)值排名前10 位的處理（表7）。由表7可知，排名前10 的因素組合中，1 000 mg/L 植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑處理占5 個(gè)，其中3 個(gè)占據(jù)前3 位，1 500 mg/L 植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑處理占3 個(gè)，500 mg/L 植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑處理占2 個(gè)，表明植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑質(zhì)量濃度在500 ～1500 mg/L 時(shí)，插穗生根效果均較好。生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑類型中，IBA+NAA 處理占4 個(gè)，NAA 處理和IBA 處理各占3 個(gè)，綜合來(lái)看IBA+NAA 處理效果更好?；|(zhì)中，細(xì)椰糠效果明顯好于細(xì)草炭土+珍珠巖，以細(xì)椰糠為基質(zhì)的處理在前10 名中占8 個(gè)。各因素組合中，植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑質(zhì)量濃度為1 000 mg/L、植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑種類為IBA+NAA、基質(zhì)為細(xì)椰糠組合的平均隸屬函數(shù)值最大（0.707 9），各項(xiàng)生根指標(biāo)的隸屬函數(shù)值在前10 名中均最大。因此，進(jìn)行墨脫花椒扦插時(shí)，選擇1 000 mg/L IBA+NAA 處理插穗，并以細(xì)椰糠為基質(zhì)效果最佳。

表7 各因素組合對(duì)墨脫花椒插穗生根效果影響的隸屬函數(shù)綜合評(píng)價(jià)?Table 7 Comprehensive evaluation of effects of different factor combinations on rooting of cuttings in Z.motuoense by using membership function method

3 結(jié)論與討論

本研究結(jié)果表明，以墨脫花椒莖段為試驗(yàn)材料，可建立起高效的扦插繁殖體系，進(jìn)行無(wú)性系育苗。扦插時(shí)，選擇墨脫花椒植株莖段下部木質(zhì)化的硬枝為插穗，扦插生根效果最好。在夏季時(shí)進(jìn)行扦插效果好于春季。析因試驗(yàn)結(jié)果表明，插穗生根指標(biāo)主要受植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑濃度及其種類和基質(zhì)3 個(gè)主因素效應(yīng)和植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑濃度×植 物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑種類交互作用的影響。采用隸屬函數(shù)法綜合評(píng)價(jià)墨脫花椒扦插生根效果，結(jié)果顯示：以細(xì)椰糠為基質(zhì)，1 000 mg/L 的IBA+NAA 混合液浸泡插穗10 min，最有利于墨脫花椒插穗生根。

植物扦插生根是一個(gè)復(fù)雜的生理形態(tài)變化過(guò)程。從插穗的解剖結(jié)構(gòu)來(lái)看，其不定根的發(fā)育可分為3 個(gè)階段：第1 階段為不定根誘導(dǎo)階段，解剖結(jié)構(gòu)表現(xiàn)為細(xì)胞脫分化形成根原始體；第2 階段為不定根形成階段，即根原始體分化成可見(jiàn)的根原基；第3 階段為不定根表達(dá)階段，即根原基發(fā)育成不定根并突出莖外成裸眼可見(jiàn)的不定根[16-18]。在這3個(gè)階段中，插穗內(nèi)部營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、激素和相關(guān)酶均起著重要作用。插穗內(nèi)部營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)是其生根的基礎(chǔ)，其中糖類和氮素化合物是維持插穗前期生長(zhǎng)和后期生根的主要物質(zhì)，而糖類中的可溶性糖類是生根所必需的物質(zhì)[19]。總體上，插穗中可溶性糖含量呈現(xiàn)“下降—升高—下降—升高”的趨勢(shì)[20-22]。在扦插初期，植物需要消耗能量，導(dǎo)致可溶性糖含量下降；不定根誘導(dǎo)階段，插穗基部呼吸作用增強(qiáng)，淀粉被水解成可溶性糖；不定根形成與伸長(zhǎng)階段，可溶性糖含量提高，供給根系生長(zhǎng)發(fā)育所需能量；不定根突出莖外后，植株成活進(jìn)行光合作用，可溶性糖含量增加。在插穗生根過(guò)程中，內(nèi)源激素的作用機(jī)制復(fù)雜，其中生長(zhǎng)素在不定根形成調(diào)控過(guò)程中起關(guān)鍵作用，是誘導(dǎo)不定根形成的主要激素[23]， 體現(xiàn)在IAA能誘導(dǎo)愈傷組織和根原基的形成[24-25]。 POD、IAAO、PPO 等與插穗不定根的發(fā)生有關(guān)。POD 調(diào)節(jié)生長(zhǎng)素的合成與代謝，促進(jìn)細(xì)胞壁形成[26]；IAAO 能夠降解IAA，從而影響插穗生 根[27]；PPO 主要是能夠催化IAA 形成一種生根輔助因子，從而影響生根[28]。

在本試驗(yàn)中，不同木質(zhì)化程度插穗的生根效果不一致。基部木質(zhì)化硬枝插穗的生根效果最好，上部尚未木質(zhì)化插穗，枝條幼嫩，在扦插過(guò)程中易腐爛死亡，生根率低。有研究結(jié)果顯示，植物內(nèi)源生長(zhǎng)素在頂芽合成后運(yùn)輸積累在植株基部，此外，光合作用產(chǎn)生的有機(jī)物質(zhì)合成后也會(huì)朝植株基部運(yùn)輸，導(dǎo)致其內(nèi)源生長(zhǎng)素和有機(jī)物質(zhì)含量最高[29-30]，更有利于不定根的發(fā)生。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，墨脫花椒基部木質(zhì)化枝條具有更高的生根率，該現(xiàn)象是否與其內(nèi)源激素積累有關(guān)尚待深入研究。

在進(jìn)行析因試驗(yàn)時(shí)，取中下部莖段為插穗。結(jié)果顯示，插穗生根指標(biāo)主要受植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑種類及其濃度和基質(zhì)3 個(gè)主因素效應(yīng)和植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑濃度×植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑種類交互作用的影響。植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑濃度效應(yīng)呈現(xiàn)“低促高抑”的現(xiàn)象，這在其他植物扦插生根研究中也有體現(xiàn)[31]。 選擇植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑種類時(shí)，單獨(dú)使用IBA 處理插穗，提高不定根長(zhǎng)和最長(zhǎng)不定根長(zhǎng)的效果好于單獨(dú)使用NAA 處理，這與陸秀君等[32]經(jīng)研究得出的美國(guó)紅楓扦插結(jié)果一致；單獨(dú)使用NAA 處理插穗，提高生根率和生根數(shù)的效果好于單獨(dú)使用IBA 處理。Cristofori 等[33]經(jīng)分析認(rèn)為，這是由于在生長(zhǎng)素中IBA 對(duì)乙烯誘導(dǎo)能力較低，低濃度乙烯能促進(jìn)根系的伸長(zhǎng)，而NAA 能夠在植物體內(nèi)轉(zhuǎn)化成IBA，再與酚類物質(zhì)結(jié)合形成一種酚酸類復(fù)合物，這種物質(zhì)能促進(jìn)根原基的形成[34]?；旌鲜褂肐BA 和NAA 處理插穗后，插穗的各項(xiàng)生根指標(biāo)顯著高于單獨(dú)使用IBA 和NAA 的處理，說(shuō)明兩者混合后可能會(huì)互補(bǔ)，不僅可以促進(jìn)不定根的伸長(zhǎng)生長(zhǎng)還可能提高生根數(shù)量。這2 種植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑混合使用的生根效果好于單一使用的現(xiàn)象在其他植物扦插上也得到了驗(yàn)證[35-37]。

基質(zhì)是插穗成活和生根的重要因素，對(duì)于扦插效果的影響主要在于其保濕性、保溫性、透氣性及pH 等[38]。本研究結(jié)果顯示，以細(xì)椰糠為基質(zhì)進(jìn)行扦插，插穗的生根效果優(yōu)于以細(xì)草炭土+珍珠巖為基質(zhì)，主要體現(xiàn)在插穗的成活率和生根率更高，單株生根數(shù)更多，平均不定根長(zhǎng)和最長(zhǎng)不定根長(zhǎng)更長(zhǎng)。細(xì)椰糠質(zhì)地疏松，孔隙大，透氣性較好，吸水性強(qiáng)，底部保水性好[39-40]；細(xì)草炭土有機(jī)質(zhì)豐富，保水性極好，透氣性差；珍珠巖具有一定的保水效果，透氣性較強(qiáng)。細(xì)草炭土和珍珠巖的混合基質(zhì)不適合墨脫花椒插穗生根，說(shuō)明需進(jìn)一步研究二者最佳基質(zhì)配比。根據(jù)隸屬函數(shù)綜合評(píng)價(jià)結(jié)果來(lái)看，選擇1 000 mg/L IBA+NAA處理墨脫花椒插穗，且以細(xì)椰糠為基質(zhì)，插穗生根效果最佳。

溫度是插穗生根的一個(gè)重要外部因素。對(duì)于大多數(shù)植物來(lái)說(shuō)，適宜的溫度能促進(jìn)其生長(zhǎng)發(fā)育，較低的溫度會(huì)誘導(dǎo)植物休眠。本研究結(jié)果顯示，在夏季進(jìn)行扦插，插穗的各項(xiàng)生根指標(biāo)顯著高于在春季進(jìn)行扦插，可能是因?yàn)檩^高的溫度促進(jìn)植物體內(nèi)POD、IAAO、PPO 等酶的活性，加快了插穗中的各種代謝活動(dòng)，進(jìn)而影響生根[38,41]。此外，隨著植株生長(zhǎng)，夏季插穗體內(nèi)會(huì)積累更多的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，能為不定根的形成提供足夠的能量。

一般將插穗生根類型分為3 種：皮部生根型、愈傷組織生根型、混合生根型。多數(shù)植物為混合生根型，混合生根型植物較單一生根型更容易生根[16]。從試驗(yàn)結(jié)果來(lái)看，墨脫花椒插穗絕大多數(shù)為基部愈傷組織生根，極少數(shù)在皮部產(chǎn)生不定根。綜合來(lái)看，墨脫花椒插穗為混合生根型。