張美勇 徐穎

摘要：為了解核桃樹使用多效唑后核桃仁中的殘留量，評估多效唑在核桃園中使用的安全性，于2019年分別以普通核桃品種‘香玲和‘元豐為試材，使用不同劑量（0.8～1.6 g·m-2）、不同濃度（1 000～2 000 mg·L-1）多效唑進(jìn)行土壤施入或葉面噴施，利用氣相色譜-質(zhì)譜法（GB 23200.8—2016）對多效唑在核桃仁中的最終殘留量進(jìn)行測定。結(jié)果表明，葉面噴施和土施處理的殘留量均小于0.5 mg·kg-1，其中大部分土施處理的殘留量低于0.01 mg·kg-1，葉面噴施處理的殘留量低于0.02 mg·kg-1。我國目前還沒有核桃仁多效唑殘留限量標(biāo)準(zhǔn)，若以最大殘留量≤0.5 mg·kg-1（我國現(xiàn)行花生仁殘留限量標(biāo)準(zhǔn)）為標(biāo)準(zhǔn)，土壤施入多效唑0.8～1.6 g·m-2或葉面噴施多效唑濃度不超過2 000 mg·L-1，噴施不多于3次，核桃仁中多效唑殘留量不超標(biāo)。

關(guān)鍵詞：核桃仁;多效唑;殘留量

中圖分類號：S664.1 ?文獻(xiàn)標(biāo)識號：A ?文章編號：1001-4942（2020）02-0137-03

Abstract In order to understand the residue of paclobutrazol in walnut kernels and evaluate the safety of paclobutrazol on walnut，two walnut cultivars ‘Xianglingand ‘Yuanfeng were used as materials，and different dosages （0.8～1.6 g·m-2） and concentrations（1 000～2 000 mg·L-1） of paclobutrazol were set for soil application and foliar spraying in 2019. The residue of paclobutrazol in walnut kernels was determined by GC-MS. The results showed that the residual amount of foliar and soil application was less than 0.5 mg·kg-1， and most of the soil and foliar treatments were less than 0.01 and 0.02 mg·kg-1 respectively. There is not the residue limit standard for paclobutrazol in walnut currently in China. If using the maximum residue limit ≤0.5 mg·kg-1 （the current standard of peanut residue in China） as standard， the residual amount of paclobutrazol in walnut kernels did not exceed the standard when soil application at 0.8～1.6 g·m-2 or foliar application at most 2 000 mg·L-1 for no more than 3 times in open field condition.

Keywords Walnut kernel;Paclobutrazol;Residue

山東省核桃栽培面積近17×104 hm2。然而，低產(chǎn)園占種植面積的30%以上，主要原因是栽培密度過大，樹形紊亂，通風(fēng)透光不良，病蟲害嚴(yán)重。為解決以上問題，必須進(jìn)行間伐和樹形改造修剪，大力推行寬行密株標(biāo)準(zhǔn)化生產(chǎn)，控制徒長枝的生長是關(guān)鍵措施之一。

多效唑（PP333，paclobutrazol）也稱氯丁唑，其分子式為C15H20N3OCl，是一種三唑類植物生長調(diào)節(jié)劑，主要通過抑制內(nèi)源GA的生物合成和生理效應(yīng)，延緩植物生長、抑制枝條伸長、促進(jìn)枝條增粗及成花坐果等，是一種高效低毒的三唑類化合物，尚無致畸、致癌、致突變的報道，允許攝入量（ADI）為0.1 mg·kg-1[1，2]。研究表明多效唑在落葉果樹蘋果、桃、櫻桃等和常綠果樹香蕉、荔枝、杧果等上施用，可控制營養(yǎng)生長、促進(jìn)成花，豐產(chǎn)穩(wěn)產(chǎn)[3-8]。但同時多效唑的殘留問題也引起人們的關(guān)注和擔(dān)心，因此，科研人員對多效唑在水稻、黃瓜、蕃茄、芒果上的殘留問題也進(jìn)行了研究[9-12]。核桃樹施用多效唑，可抑制營養(yǎng)生長，枝條增粗變短，抗寒性增強(qiáng)，冬季修剪量減少，促進(jìn)結(jié)實(shí)，提高產(chǎn)量等[13-17]，但是目前還未見多效唑在核桃仁中殘留的研究報道，缺乏限量標(biāo)準(zhǔn)。本研究進(jìn)行了核桃的多效唑葉面噴施濃度以及土壤施用劑量試驗(yàn)，并對其在核桃仁中的殘留進(jìn)行測定和分析，以期為多效唑在核桃上安全合理使用提供支撐。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)地及材料

試驗(yàn)于2019年3—8月在山東省東平縣大羊鎮(zhèn)后魏雪村進(jìn)行。該區(qū)位于東平縣東北部的九頂山下，東經(jīng)116°39′，北緯36°10′;土壤為褐土，有機(jī)質(zhì)含量0.5%，pH值7.1。以4年生‘香玲和‘元豐核桃為試材（株行距為4 m×6 m），供試藥劑為山東豐倍爾生物科技有限公司的15%多效唑可濕性粉劑。

1.2 施用方法

根據(jù)多效唑常用的施用方法、濃度及次數(shù)[14-18]，設(shè)置整株葉面噴施和土壤施用兩種方式。

1.2.1 葉面噴施 設(shè)4個濃度處理，分別是清水（0）、1 000、1 500、2 000 mg·L-1，3次重復(fù)，共12株樹。將多效唑水溶液均勻噴到整株樹冠葉片上，首次噴施在一次梢長15 cm左右時進(jìn)行，間隔15 d，共噴3次。具體時間為2019年4月13、25日和5月11日。

1.2.2 土壤溝施 設(shè)4個劑量處理，分別為0、0.8、1.2、1.6 g·m-2。發(fā)芽期采用環(huán)狀溝土施，具體時間是2019年3月27日。

依據(jù)農(nóng)業(yè)部《農(nóng)藥登記殘留田間試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程》要求進(jìn)行試驗(yàn)操作。所有處理單株小區(qū)，3次重復(fù)。

1.3 多效唑殘留量檢測

1.3.1 試樣采取 試驗(yàn)樣品‘香玲和‘元豐核桃于2019年8月24日果實(shí)成熟時采收，每小區(qū)單株樹冠上、中、下和東、西、南、北各隨機(jī)采收2個生長正常、無病蟲害的果實(shí)，脫青皮后，按GB2763附錄A取樣。將切碎的核桃仁混勻均質(zhì)成勻漿，分成兩份裝入潔凈的盛樣容器內(nèi)，于-18℃冷凍保存。

1.3.2 測定方法 采用氣相色譜-質(zhì)譜法（GB23200.8—2016）。取20 g核桃仁樣品（精度0.01 g）于80 mL離心管中，加40 mL乙腈，用均質(zhì)器15 000 r/min勻漿提取1 min，加5 g氯化鈉，再勻漿提取1 min，放入離心機(jī)，3 000 r/min離心5 min，取上清液20 mL（相當(dāng)于10 g試樣量）。Envi-18柱放入固定架上，用10 mL乙腈預(yù)洗柱，雞心瓶下接，加入20 mL提取液，用15 mL乙腈洗柱，將提取液和洗滌液在40℃水浴中旋轉(zhuǎn)濃縮至約1 mL。在Envi-Carb柱中加入約2 cm無水硫酸鈉，連接在Sep-Pak氨丙基柱頂部，串聯(lián)柱下接雞心瓶放在固定架上。先用4 mL乙腈-甲苯溶液預(yù)洗柱，當(dāng)液面到達(dá)硫酸鈉的頂部時，迅速將樣品濃縮液轉(zhuǎn)移至凈化柱上，再每次用2 mL乙腈-甲苯溶液洗滌樣液瓶3次，并將洗滌液移入柱中。在串聯(lián)柱上加上50 mL貯液器，用25 mL乙腈-甲苯溶液洗滌串聯(lián)柱，收集所有流出物于雞心瓶中，并在40℃水浴中旋轉(zhuǎn)濃縮至約0.5 mL。每次加入5 mL正己烷在40℃水浴中旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，進(jìn)行溶劑交換二次，致樣液體積約為1 mL，加40 μL內(nèi)標(biāo)溶液混勻，用于氣相色譜-質(zhì)譜測定。

色譜柱為DB-1701（30 m×0.25 mm×0.25 μm）石英毛細(xì)管柱，進(jìn)口溫度290℃;進(jìn)口流量1.2 mL·min-1;柱溫40℃ 1 min，然后30℃·min-1升至130℃，5℃·min-1升至250℃，10℃·min-1升至300℃，保持5 min。

離子源溫度230℃，GC-MS接口溫度280℃，進(jìn)樣口溫度290℃，1個定量離子，2～3個定性離子，無分流進(jìn)樣。

1.4 數(shù)據(jù)分析

采用鄧肯氏新復(fù)極差法（SSR）做相應(yīng)試驗(yàn)數(shù)據(jù)的統(tǒng)計分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 葉面噴施多效唑在核桃仁中的殘留量分析

葉面噴施不同濃度多效唑，各處理的核桃仁中均有微量殘留，最高殘留量為0.01663 mg·kg-1，但處理間無顯著差異，且沒有遞增規(guī)律（表1）。說明葉面噴施1 000、1 500、2 000 mg·L-1多效唑，4月中旬首次噴施，噴施3次，間隔15 d左右，兩品種核桃仁的多效唑殘留量均在檢測限以下。

2.2 土施多效唑在核桃仁中的殘留量分析

由表2看出，土壤施用不同劑量的多效唑在兩個品種核桃仁中均有微量殘留，最高殘留量為0.01194 mg·kg-1。隨多效唑施用劑量的增加，各處理間并未有明顯的遞增規(guī)律，與對照無顯著差異。說明土壤施用0.8、1.2、1.6 g·m-2多效唑處理，核桃仁的多效唑殘留量均在檢測限以下。

3 討論與結(jié)論

很多國家對多效唑最大殘留限量（MRL）作了規(guī)定，歐盟2019年1月18日修訂實(shí)施的樹堅果殘留限量標(biāo)準(zhǔn)為0.01 mg·kg-1;瑞典禁止在果樹上使用多效唑[19]。目前我國尚沒有多效唑在核桃仁中的殘留限量標(biāo)準(zhǔn)，參照中國花生仁殘留限量標(biāo)準(zhǔn)MRL≤0.5 mg·kg-1（GB 2763—2016），本試驗(yàn)中，土施和整株葉面噴施不同劑量多效唑后核桃仁的殘留量≤0.5 mg·kg-1，對核桃仁安全。參 考 文 獻(xiàn)：

[1] 朱蕙香，張宗儉，陳虎保.常用植物生長調(diào)節(jié)劑應(yīng)用指南[M].北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2002.

[2] 肖宜華.多效唑和烯效唑?qū)?種海洋微藻生長及抗氧化作用影響的研究[D].青島：中國海洋大學(xué)，2008.

[3] 黃海，曹尚銀，方金豹，等.多效唑?qū)μ覙渖L和結(jié)果的影響[J]. 果樹科學(xué)，1991，8（3）：151-158.

[4] Chanana Y R，Gill K S. Effect of soil application of paclo-butrazol on growth of Earli Grande peach trees[J]. India J. Hort.，2007，64（2）：211-212.

[5] Navitej S，Chanana Y R. Effect of paclobutrazol and spacing on growth and yield of Shan-e-Punjab cv. of peach[J]. India J. Hort.，2007，64（4）：456-458.

[6] 黃宏芬，呂烈武.多效唑在幾種熱帶果樹上的研究進(jìn)展[J].現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技，2009（6）：25-26.

[7] 王存.多效唑在植物生產(chǎn)上的應(yīng)用現(xiàn)狀[J].熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)，2009，29（2）：67-72.

[8] 韋明兵，韋瑞霞.多效唑在果樹上的應(yīng)用[J].北京農(nóng)業(yè)，2009（3）：51-54.

[9] 郭利軍，范鴻雁，何凡，等.芒果常用植物生長調(diào)節(jié)劑毒性和殘留研究進(jìn)展[J].中國果樹，2014（3）：78-81.

[10] 李玲，潘瑞熾.多效唑在水稻和花生可食部分及土壤中殘留量的研究[J].作物學(xué)報，1997，23（6）：707-711.

[11] Magnitskiy S V，Pasian C C，Bennett M A，et al. Effects of soaking cucumber and tomato seeds in paclobutrazol solutions on fruit weight，fruit size，and paclobutrazol level in fruits[J].HortScience，2006，41（6）：1446-1448.

[12] Sharm A D， Awashi M D. Uptake of soil applied paclobutrazol in mango and its persistence in fruit and soil[J].Chemosphere，2005，60（2）：164-169.

[13] 朱麗華，曹慶昌，李明亮.多效唑?qū)颂疑L發(fā)育的影響及其生理基礎(chǔ)[J].林業(yè)科學(xué)研究，1993，6（5）：531-535.

[14] 張美勇，徐穎，劉化朝.多效唑?qū)颂抑l抗寒性的影響[J].落葉果樹，2000（5）：10-11.

[15] 張美勇，徐穎，姚子棟，等.多效唑?qū)υ鐚?shí)核桃夏剪促發(fā)枝條生長結(jié)果的影響[J].山東農(nóng)業(yè)科學(xué)，2007（2）：58-60.

[16] 龐靜，彭明俊，李小琴，等.多效唑?qū)颂壹藿用缒举|(zhì)化的影響[J].中國南方果樹，2011，40（5）：67-68.

[17] 彭海龍，賴騰躍，廖運(yùn)紅，等.PP333不同施用方式及濃度對早實(shí)核桃生長發(fā)育的比較研究[J].四川林業(yè)科技，2014，35（2）：25-29.

[18] 朱麗華，李明亮，曹慶昌.多效唑在核桃上的應(yīng)用效果研究[J].林業(yè)科學(xué)研究，1994，7（1）：33-36.

[19] 宋瑩，張耀海，黃霞，等.氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法快速檢測水果中的多效唑殘留[J].分析化學(xué)，2011，39（8）：1270-1273.