柴安芳　畢盼盼　安宇佳

摘要：目的 探討淫羊藿提取物對去卵巢骨質疏松大鼠骨代謝的影響。方法 建立去勢模型，將雌性大鼠隨機分為5組， 其中假手術組和去卵巢對照組給予相應等體積去離子水，劑量組分別給予不同劑量淫羊藿提取物（20.8mg/kg.bw、41.6mg/kg.bw、125mg/kg.bw）;灌胃3個月后處死，測量股骨重量、骨密度、骨鈣含量。結果 經(jīng)口給予大鼠不同劑量的淫羊藿提取物樣品三個月后，模型成立前提下，與去卵巢對照組大鼠相比，去卵巢高劑量組大鼠股骨鈣含量顯著增加（P<0.01）;中、高劑量組大鼠股骨中點骨密度和股骨遠心端骨密度均顯著增加（P<0.05，P<0.01）。結論 單味淫羊藿提取物有增加大鼠骨密度作用，提示淫羊藿提取物可以預防絕經(jīng)后骨質疏松癥。

關鍵詞：動物實驗;淫羊藿;骨密度;骨質疏松

骨質疏松癥（ Osteoporosis， OP） 是老年人的一種常見病， 已嚴重危害著老年人的身體健康。以骨量減少、骨微結構破壞， 導致骨脆性增加、容易發(fā)生骨折為特征。中草藥治療絕經(jīng)后骨質疏松癥已成為國內醫(yī)學界的研究熱點。 淫羊藿為小檗科植物淫羊藿、箭葉淫羊藿、柔毛淫羊藿或朝鮮淫羊藿的干燥葉?！吨腥A人民共和國藥典》記載辛、甘，溫。歸肝、腎經(jīng)。具有補腎陽，強筋骨，祛風濕的功效，主要有效成分之一是淫羊藿苷[1] 。

本試驗建立去勢雌性大鼠動物模型， 探究淫羊藿提取物預防骨質疏松作用，結果報道如下。

1材料和方法

1.1 樣品：淫羊藿提取物，棕色粉末。含淫羊藿苷5%。

1.2 實驗動物：SPF級健康Wistar雌性大鼠。體重300g左右。實驗環(huán)境溫度22℃±2℃，相對濕度50%±10%。

1.3飼料配方：按《保健食品檢驗與評價技術規(guī)范》2003年版推薦配方進行飼料配制。

1.4 主要儀器與試劑：動物解剖器械、動物天平、雙能X線骨密度測量儀、烘箱。碳酸鈣標準溶液、氫氧化鉀、EDTA溶液等。

1.5實驗方法

1.5.1 卵巢切除術及術后飼養(yǎng)：

大鼠經(jīng)30mg/kg.bw劑量腹腔注射戊巴比妥鈉溶液，待麻醉完全后切除雙側卵巢，術后連續(xù)3d肌注2萬U青霉素。假手術對照組大鼠操作同上，但不結扎輸卵管、不剪除卵巢。手術后觀察7天，之后以灌胃方式分別給予各組大鼠相應受試物和溶劑。給各組大鼠飼喂配制飼料，自由飲去離子水。

1.5.2劑量設置與受試物給予方式 ??雌性大鼠經(jīng)適應性飼養(yǎng)7天后，按體重將其隨機分為假手術對照組、去卵巢對照組、去卵巢低劑量組、去卵巢中劑量組、去卵巢高劑量組。淫羊藿提取物各劑量組大鼠每日食用量分別為20.8mg/kg.bw、41.6mg/kg.bw、125mg/kg.bw。經(jīng)灌胃每日一次給予大鼠相應受試物，灌胃體積均按1mL/100g.bw計。去卵巢對照組和假手術對照組給予等體積去離子水灌胃。連續(xù)給予受試物3個月后測定各項指標。

1.5.3體重測定：每周測定大鼠體重一次，并據(jù)此調整灌胃量。

1.5.4骨鈣含量測定：大鼠喂養(yǎng)3個月后處死，剝離出左、右側股骨。取右側股骨于105℃烤箱中烤至恒重，稱量骨干重。然后進行粉碎、研磨、消化。用化學法（EDTA滴定法）測定骨鈣含量。

1.5.5骨密度測定：用骨密度測量儀測量大鼠左側股骨中點及股骨遠心端的骨密度。

1.6實驗數(shù)據(jù)統(tǒng)計：采用SPSS統(tǒng)計軟件進行各實驗組與對照組的單因素方差分析和組間比較。

2 結果

2.1 樣品對大鼠體重的影響

由表1可見，各組大鼠初始體重差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。實驗結束時，假手術對照組大鼠體重略低，但與去卵巢對照組大鼠相比，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）;其余各組間大鼠體重差異均無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。

2.2樣品對大鼠股骨重量和股骨鈣含量的影響

由表2可見，與去卵巢對照組比，各組大鼠股骨重量差異均無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。去卵巢對照組骨鈣含量顯著低于假手術對照組，表明模型成立。去卵巢高劑量組大鼠股骨鈣含量顯著高于去卵巢對照組（P<0.01）。

2.3 樣品對大鼠股骨骨密度的影響

由表3可見，去卵巢對照組大鼠股骨中點和遠心端骨密度均明顯低于假手術對照組（P<0.01）。表明模型成立。與去卵巢對照組大鼠相比，去卵巢中、高劑量組大鼠股骨中點骨密度顯著增高（P<0.05，P<0.01）;去卵巢中、高劑量組大鼠股骨遠心端骨密度顯著增高（P<0.05，P<0.01）。

3討論

近年來， 許多學者對腎虛與骨密度或骨礦含量的關系進行了研究， 闡明腎虛與骨密度或骨礦含量的降低顯著相關 [2]。這些研究結果與中醫(yī)“腎主骨”理論是相吻合的， 證實了腎虛是骨質疏松癥的主要病機， 因此近年來中醫(yī)藥防治骨質疏松癥多從補腎入手。而淫羊藿甘溫助陽， 有補腎壯陽之功效， 《本草綱目》稱其有 “益精氣、強筋骨、補腰膝”作用， 許多用于防治骨質疏松癥的中藥復方中都含有淫羊藿。淫羊藿主要有效成分為黃酮類化合物，代表為淫羊藿苷，大量的試驗已證實淫羊藿的抗骨質疏松作用與其所含的黃酮類物質有關。其作用機制主要體現(xiàn)在：可通過保護性腺，從而抑制骨吸收和促進骨形成，防止骨量丟失[3];可通過阻斷與花生四烯酸代謝有關的環(huán)氧化酶，顯示抗炎作用[4];含有較豐富的銅、錳、鋅，等。為探討采用單味補腎中藥淫羊藿的提取物治療骨質疏松癥的作用，本試驗通過建立去勢模型，經(jīng)口給予大鼠不同劑量的淫羊藿提取物三個月后，觀察大鼠骨代謝指標。結果?淫羊藿提取物可提高去勢大鼠骨鈣含量及骨密度，提示單味淫羊藿提取物對預防骨質疏松有一定作用。

參考文獻

1 葉麗卡， 李國秀， 陳妍妍， 等.HPLC 法測定生物樣品中淫羊藿苷的濃度.藥物分析雜志， 1998 ， 18（1）：15

2 趙玉堂， 劉凱軍， 李金花 等.骨礦含量與腎虛、腎主骨關系的研究. 中國骨質疏松雜志.1996; 2 （ 3） ： 19～21.

3馬慧萍，賈正平，葛欣，等.淫羊藿總黃酮抗大鼠試驗性骨質疏松作用研究[ J].華西藥學雜志，2002，17（3）163～ 167.

4原達雄.淫羊藿浸膏抗炎作用的藥理研究[J].國外醫(yī)藥·植物藥分冊，1997，12（6）：272.