高文瑞

摘 要：本文主要基于既定標(biāo)準(zhǔn)優(yōu)化了用氣相色譜法測(cè)定食用油脂肪酸測(cè)定的前處理方法，以HCl-甲醇法在80 ℃水浴狀態(tài)下實(shí)現(xiàn)食用油甲酯化，利用毛細(xì)管柱氣相色譜進(jìn)行分析，通過(guò)外標(biāo)法進(jìn)行脂肪酸甲酯含量定量測(cè)定。在優(yōu)化前處理方法之后，食用油脂肪酸的前處理操作更加便捷，且效率也更高，靈活性較強(qiáng)，可在很大程度上滿(mǎn)足食用油脂肪酸測(cè)定需求。

關(guān)鍵詞：食用油;脂肪酸;氣相色譜法;前處理

油脂基本組成是甘油三酯，一分子甘油三酯則包含一分子甘油與三分子脂肪酸。脂肪酸在保持人體健康中發(fā)揮著關(guān)鍵性作用。營(yíng)養(yǎng)學(xué)與生物臨床醫(yī)學(xué)研究表明，在飲食中脂肪酸構(gòu)成、含量與多種疾病的發(fā)病率息息相關(guān)。因此快速有效測(cè)定食用油脂肪酸構(gòu)成與含量，有助于合理建議人們健康飲食[1-2]。

1 脂肪酸及其測(cè)定方法分析

在油脂中，脂肪酸是最為基礎(chǔ)的組成部分，對(duì)于人體健康維持發(fā)揮著關(guān)鍵性作用。因此，通過(guò)對(duì)脂肪酸測(cè)定方法進(jìn)行優(yōu)化改良，可為食用油脂肪酸組成分析提供更為便捷有效的方式。而且基于各種類(lèi)型食用油的實(shí)際測(cè)定，獲取脂肪酸分布特性，可在一定程度為指導(dǎo)人們科學(xué)健康膳食奠定堅(jiān)實(shí)依據(jù)，同時(shí)對(duì)于油脂類(lèi)食物品質(zhì)評(píng)估，建議人們合理健康飲食具有良好現(xiàn)實(shí)意義。

對(duì)于不同類(lèi)型食用油而言，其中存有不同類(lèi)型的脂肪酸，大概一共有40多種，其是脂類(lèi)的重要構(gòu)成部分。其中不飽和脂肪酸是人體內(nèi)的一種脂肪酸，是人體必備，可以劃分為2種，即單不飽和與多不飽和脂肪酸。單不飽和脂肪酸主要是油酸，而多不飽和脂肪酸即亞油酸、亞麻酸、花生四烯酸與DHA等等，人體無(wú)法自主生成亞油酸與亞麻酸，需要通過(guò)平日飲食攝取。人們?nèi)粘Ｊ褂弥参镉涂蔀槿梭w補(bǔ)充不能自主生成的脂肪酸?；陔p鍵位置劃分多不飽和脂肪酸，可分為ω-3系列與ω-6系列，其中ω-6系列包括亞油酸與花生四烯酸，ω-3系列包括DHA。ω-3系列不飽和脂肪酸在大腦與腦神經(jīng)中發(fā)揮著重要作用，是主要供給營(yíng)養(yǎng)成分，一旦攝入不充足，會(huì)直接影響嬰幼兒智力的正常發(fā)育，也會(huì)降低成年人的記憶力與思維能力。目前，脂肪酸測(cè)定最為成熟有效的方法依舊是氣相色譜-火焰離子化檢測(cè)器法。具體分析過(guò)程包含基于有機(jī)溶劑提取樣品甘油三酯，然后皂化與甲酯化，再色譜分析，通過(guò)色譜保存時(shí)間進(jìn)行定性，基于峰面積定量[3-4]。

2 食用油脂肪酸測(cè)定用氣相色譜法的前處理方法優(yōu)化

2.1 材料

美國(guó)Agilent公司生產(chǎn)的氣相色譜儀配置FID檢測(cè)器;美國(guó)Millipore公司生產(chǎn)的純水機(jī);常州博遠(yuǎn)實(shí)驗(yàn)分析儀器公司生產(chǎn)的水浴鍋;北京八方世紀(jì)科技有限公司生產(chǎn)的氮吹儀。MREDA公司生產(chǎn)的甲醇、正己烷;廣州化學(xué)試劑公司生產(chǎn)的鹽酸、無(wú)水硫酸鈉（分析純）。德國(guó)Dr.Ehrenstorfer GmbH公司的脂肪酸甲酯混標(biāo)。

2.2 方法

2.2.1 條件

主機(jī)選用GC6890N;檢測(cè)器選用FID;色譜柱選擇HP-88;載氣選用氮?dú)?載氣流量則選擇1.5 mL/min;進(jìn)樣體積選擇1.0 μL;進(jìn)樣口溫度選擇270 ℃;檢測(cè)器溫度選擇280 ℃;柱溫選擇100 ℃;分流比選擇100∶1;程序升溫詳細(xì)則柱溫初始狀態(tài)以100 ℃保持13 min之后，上升到180 ℃繼續(xù)保持6 min，上升為200 ℃保持20 min以后，持續(xù)上升到230 ℃保持10.5 min。

2.2.2 樣品前處理

稱(chēng)取0.52 g試樣放置在具塞試管內(nèi)，添加6 mL鹽酸甲醇溶液，用氮?dú)膺M(jìn)行封層，在80 ℃狀態(tài)下進(jìn)行2 h水浴，冷卻到室溫狀態(tài)，添加4 mL正己烷與1.5 mL蒸餾水，搖晃均勻混合，放置，以獲取上層溶液過(guò)無(wú)水硫酸鈉柱，以正己烷洗滌后，放置在玻璃管內(nèi)，利用40 ℃氮?dú)獯档浇咏稍餇顟B(tài)，將6 mL正己烷定容之后，上機(jī)處理分析。

2.3 結(jié)果討論

2.3.1 前處理優(yōu)化

針對(duì)樣品進(jìn)行前處理進(jìn)行優(yōu)化，即改良裝置，利用水浴鍋替代既有冷凝回流器;優(yōu)化甲酯化方法，利用HCl-甲醇法替代既有NaOH-甲醇法。

首先，裝置改良。利用冷凝回流器進(jìn)行前處理，操作流程繁雜，溶劑用量過(guò)大，耗費(fèi)時(shí)間比較長(zhǎng)，且需要專(zhuān)門(mén)安排人員留守。但是優(yōu)化之后，利用水浴鍋進(jìn)行前處理，不僅操作流程簡(jiǎn)潔，溶劑用量非常少，而且不需要專(zhuān)門(mén)人員留守，在很大程度上節(jié)約了人力、物力、財(cái)力。

其次，方法優(yōu)化。食用油成分是相對(duì)質(zhì)量不同脂肪酸的甘油三酯，其弱極性突出，這就決定了其需要先進(jìn)行衍生，才能夠應(yīng)用到色譜分析中去，甲酯化是最常用的理想化衍生法。因此需要選擇濃度合適的HCl-甲醇溶液，在甲酯化時(shí)，以適度延長(zhǎng)水浴時(shí)間，直接代替三氟化硼甲醇，甲酯化顯著效果，有效保障了試驗(yàn)安全。最后通過(guò)色譜峰面積對(duì)甲酯化程度進(jìn)行衡量分析，得知食用油在6 mL HCl-甲醇溶液內(nèi)反應(yīng)2 h即最佳甲酯化條件。

2.3.2 結(jié)果分析

分析HCl-甲醇不同添加量對(duì)于食用油樣品酯化效果的影響，平行測(cè)定3次取均值。分別選取2、4、6、8 mL與10 mL添加量，其轉(zhuǎn)化率分別為72%、84%、100%、90%與88%，由此可以看出，在添加6 mL HCl-甲醇溶液時(shí)，食用油酯化效果最優(yōu)。

對(duì)比分析添加三氟化硼甲醇溶液與延長(zhǎng)水浴時(shí)間對(duì)于食用油酯化的影響，效果基于總脂肪酸轉(zhuǎn)化率表征，并設(shè)定最高為100%，分別選取0.5、1、1.5、2 h與2.5 h水浴時(shí)間，添加三氟化硼時(shí)，轉(zhuǎn)化率分別為80%、90%、95%、100%與93%;不添加三氟化硼時(shí)，轉(zhuǎn)化率分別為77%、88%、94%、99%與89%。由此可以看出，在水浴2 h的時(shí)候，食用油酯化效果最佳，是否添加三氟化硼效果差異并不顯著，而由于三氟化硼帶有劇毒性，所以選擇不添加，在水浴2 h時(shí)，酯化效果最優(yōu)。

2.3.3 實(shí)例測(cè)定結(jié)果

依據(jù)以上方式以花生食用油為例，基于優(yōu)化前處理?xiàng)l件反復(fù)多次平行處理，加以測(cè)定，得出棕櫚酸保持時(shí)間為39 min、RSD值為1.3%、均含量比為12.1%;亞油酸保持時(shí)間為50 min、RSD值為1.0%、均含量比為34.4%;硬脂酸保持時(shí)間為45 min、RSD值為3.2%、均含量比為3.9%;油酸保持時(shí)間為47 min、RSD值為0.6%、均含量比為43.5%;山俞酸保持時(shí)間為62 min、RSD值為3.5%、均含量比為2.7%;花生酸保持時(shí)間為52 min、RSD值為3.9%、均含量比為1.6%;α-亞麻酸保持時(shí)間為55 min、RSD值為4.2%、均含量比為1.0%;EPA保持時(shí)間保持時(shí)間為74 min、RSD值為5.2%、均含量比為1.3%。

3 結(jié)語(yǔ)

綜上所述，以食用油為對(duì)象，通過(guò)HCl-甲醇法基于80 ℃水浴狀態(tài)，甲酯化處理分析食用油，根據(jù)GC-FID法進(jìn)行食用油脂肪酸分析法優(yōu)化改進(jìn)，此方法靈活性良好，操作流程簡(jiǎn)單，可滿(mǎn)足食用油脂肪酸定性測(cè)定與定量測(cè)定需求，可以應(yīng)用到食用油質(zhì)量檢測(cè)工作中。

參考文獻(xiàn)

[1]鄒琴，陳德斌，姚創(chuàng)，等.氣相色譜法測(cè)定食用油中37種脂肪酸的前處理改良[J].廣東化工，2018，45（14）：208-210.

[2]邱若風(fēng)，黃忠平，王麗麗.在線(xiàn)熱輔助甲基化-氣相色譜法分析棉籽仁中的脂肪酸組成[J].色譜，2018，36（9）：925-930.

[3]張向杰，郜晨，翁劍，等.食用油不同烹飪條件下反式脂肪酸（TFA）含量變化的研究[J].食品安全導(dǎo)刊，2019，（6）：180-184.

[4]李譚瑤，楊靜玥，范翔，等.氣相色譜-質(zhì)譜法測(cè)定新鮮食用蘑菇中37種脂肪酸[J].中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2017，27（14）：2002-2008.