李群 韓利紅

摘要：目的 探討肺泡灌洗液（BALF）檢出白細(xì)胞（WBC）吞噬細(xì)菌現(xiàn)象對鑒別RICU下呼吸道感染患者致病菌與定植菌的應(yīng)用價(jià)值。方法 收集我院呼內(nèi)重癥監(jiān)護(hù)室（RICU）收治的下呼吸道感染的108例患者，給予BALF收集、涂片、培養(yǎng)檢查，統(tǒng)計(jì)分析BALF涂片吞噬細(xì)菌現(xiàn)象與患者臨床癥狀、細(xì)菌培養(yǎng)的一致性對于鑒別致病菌和定植菌的輔助診斷作用。結(jié)果 108例患者中有基礎(chǔ)疾病患者占86.1%;有感染指征患者占77.7%;標(biāo)本進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)前抗菌藥物使用率占90.7%。吞噬細(xì)菌組有32例，與其相應(yīng)培養(yǎng)結(jié)果一致率達(dá)87.5%，且定為致病菌比例為87.5%，均明顯高于對照組（P<0.05）。結(jié)論BLAF涂片檢出WBC細(xì)菌吞噬或伴行現(xiàn)象能夠?qū)ο潞粑栏腥镜腞ICU患者感染的病原菌為致病菌還是定植菌進(jìn)行有效鑒別，可在臨床推廣。

關(guān)鍵詞：BALF;白細(xì)胞吞噬細(xì)菌;致病菌;定植菌

【中圖分類號】R322.3?? 【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A??? 【文章編號】2107-2306（2020）02-115-02

肺部感染為呼吸科臨床上最為常見的疾病，隨著醫(yī)療技術(shù)的發(fā)展及抗生素大量應(yīng)用，RICU患者中多重耐藥菌如大腸埃希菌、銅綠假單胞菌、鮑曼不動桿菌等的出現(xiàn)呈逐漸上升趨勢，如何區(qū)分培養(yǎng)出的細(xì)菌為致病菌還是定植菌成為臨床診治的難點(diǎn)^[1]。白細(xì)胞（WBC）吞噬異物（包括病菌）是機(jī)體的一種非特異性免疫防御機(jī)制，可以作為判斷細(xì)菌為感染病原菌最為客觀和直接的證據(jù)^[2-3]。相對于痰涂片，肺泡灌洗液（BALF）中鏡檢觀察WBC有無吞噬細(xì)菌現(xiàn)象來辨認(rèn)致病菌或定植菌更為準(zhǔn)確^[4]。本文詣在探討B(tài)ALF檢出WBC吞噬細(xì)菌在鑒別ICU下呼吸道感染患者致病菌與定植菌的應(yīng)用價(jià)值。

1材料與方法

1.1一般資料 收集2018.12.01-2019.12.31我院RICU住院收治的下呼吸道感染患者108例，排除標(biāo)準(zhǔn)：支氣管鏡操作禁忌癥;合并嚴(yán)重的心、肝、腎功能不全;凝血功能障礙;精神類疾病者等。

1.2方法

1.2.1BALF標(biāo)本留取及鏡檢：患者取仰臥位， 2%利多卡因進(jìn)行局部麻醉，選擇病變段支氣管，給予分次注入生理鹽水共60-120ml，進(jìn)行負(fù)壓吸引，回抽率大于30%，灌洗標(biāo)本用無菌容器收集。送檢量10-20ml，室溫2h內(nèi)送至微生物實(shí)驗(yàn)室。將送檢的BALF標(biāo)本細(xì)胞離心機(jī)制片，自然干燥之后用火焰固定，然后進(jìn)行革蘭染色、鏡檢。觀察鏡下微生物染色性質(zhì)和形態(tài)，同時觀察有無WBC吞噬或伴行細(xì)菌現(xiàn)象，若有此現(xiàn)象則記錄被吞噬的細(xì)菌染色性質(zhì)和形態(tài)等， 并記錄吞噬細(xì)胞占全部中性粒細(xì)胞的比例，大于5%可視為陽性結(jié)果。將有WBC吞噬或伴行細(xì)菌的標(biāo)本分為吞噬細(xì)菌組;未見WBC吞噬或伴行細(xì)菌的標(biāo)本分為對照組。

1.2.2BALF標(biāo)本培養(yǎng)：采用三區(qū)劃線法將肺泡灌洗液標(biāo)本分別接種在血平板、巧克力平板和中國藍(lán)平板上，35℃5%CO2孵育箱中培養(yǎng)18-24h，篩選培養(yǎng)分離的可疑菌落，用微量生化管以及配套鑒定卡鑒定。藥物敏感性試驗(yàn)采取紙片擴(kuò)散法或最低抑菌濃度法。

1.2.3臨床資料收集? 查閱電子病歷，包括患者年齡、性別、有無基礎(chǔ)疾病、感染癥狀（發(fā)熱、咳嗽咳痰、胸悶等）以及輔助檢查血常規(guī)、炎性指標(biāo)、胸部影像等，患者BALF培養(yǎng)前抗菌藥物使用情況、培養(yǎng)后根據(jù)藥物敏感性試驗(yàn)結(jié)果用藥后感染癥狀及輔助檢查的改變。

患者具有感染指征且根據(jù)藥物敏感性試驗(yàn)結(jié)果指導(dǎo)抗生素應(yīng)用有效則定為致病菌;患者無感染指征或有感染指征但是根據(jù)藥物敏感性試驗(yàn)結(jié)果指導(dǎo)抗生素應(yīng)用無效定為定植菌。

1.3統(tǒng)計(jì)方法

采用SPSS 19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，定性資料用率表示，率之間比較用χ² 檢驗(yàn)。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1患者的臨床資料

108例患者中男性55例，女性43例，平均年齡70.3歲;有基礎(chǔ)疾病患者占86.1%;有感染指征患者占77.7%;標(biāo)本進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)前抗菌藥物使用率占90.7%。患者臨床資料見表1。

2.2不同分組的BALF涂片標(biāo)本與細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果一致性比較

其中吞噬細(xì)菌組有32例，與其相應(yīng)培養(yǎng)結(jié)果一致率達(dá)87.5 %，對照組有76例，與培養(yǎng)結(jié)果一致率為59.2 %，兩個組之間比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05），兩組涂片與細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果一致性比較見表2。

2.3? 不同分組的BALF涂片標(biāo)本與細(xì)菌感染率和定植率關(guān)系的比較

吞噬細(xì)菌組涂片標(biāo)本中檢出的致病菌比例為87.5%，對照組標(biāo)本中定植菌比例為60.6%，兩個組之間比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05）。BALF結(jié)果與細(xì)菌致病和定植關(guān)系見表3。

3討論

痰涂片中檢出WBC吞噬細(xì)菌或伴行細(xì)菌，對下呼吸道感染的病原學(xué)診斷具有重要價(jià)值，提示我們有進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)的必要性^[5]。常規(guī)取痰方法操作較簡單，標(biāo)本易獲得，但病原菌檢出率低、易污染定植菌。而BLAF在采集痰標(biāo)本時，有效降低或避免了口咽部污染， 從肺段直接灌洗收集痰標(biāo)本，無創(chuàng)、敏感、可靠、直接，不易受雜菌的污染使病原菌的檢出率和標(biāo)本的合格率都得到顯著提高。

本研究表明，BALF涂片細(xì)菌吞噬組患者的鏡檢結(jié)果與細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果一致率明顯高于對照組，這說明在臨床上BALF鏡檢若檢出WBC吞噬細(xì)菌，則表明該標(biāo)本對應(yīng)的患者伴有呼吸道致病菌感染等可能性較大，提示抗生素治療時需重視細(xì)菌培養(yǎng)的藥敏結(jié)果。但本研究中還存在一小部分鏡檢結(jié)果與培養(yǎng)結(jié)果不一致的現(xiàn)象，考慮原因?yàn)?BALF涂片WBC吞噬細(xì)菌現(xiàn)象是機(jī)體免疫系統(tǒng)與微生物共同作用的結(jié)果，當(dāng)機(jī)體免疫力強(qiáng)時細(xì)菌被清除，培養(yǎng)結(jié)果就為陰性;當(dāng)機(jī)體免疫力極弱時，白細(xì)胞數(shù)目大幅度減少，吞噬細(xì)菌現(xiàn)象減少或消失，但細(xì)菌在培養(yǎng)基中可大量繁殖，結(jié)果為陽性。其他一些原因還有：標(biāo)本收集人員未采集到有效部位、檢驗(yàn)人員經(jīng)驗(yàn)不足、不可避免的誤差等。本研究還認(rèn)為，BALF涂片細(xì)菌吞噬組患者檢測出致病菌幾率明顯高于對照組，由此說明BALF涂片細(xì)菌吞噬現(xiàn)象與致病菌感染關(guān)系密切。結(jié)合患者易感因素（如免疫抑制、人工管道、應(yīng)用廣譜抗生素等）、臨床癥狀、檢查等情況，BALF涂片見WBC吞噬或伴行細(xì)菌現(xiàn)象對鑒別致病菌和定植菌有較好的提示作用，為臨床醫(yī)生正確認(rèn)識培養(yǎng)結(jié)果、正確判斷下呼吸道感染并合理使用抗菌藥物提供了依據(jù)。

綜上所述，BALF涂片檢出WBC細(xì)菌吞噬或伴行現(xiàn)象能夠?qū)ο潞粑栏腥镜腞ICU患者感染的病原菌為致病菌還是定植菌進(jìn)行有效鑒別，能夠有效避免定植菌濫用抗生素減少臨床抗生素使用強(qiáng)度，減少患者醫(yī)療花費(fèi)，使抗感染的經(jīng)驗(yàn)治療轉(zhuǎn)為目標(biāo)導(dǎo)向治療，提高重癥感染患者救治成功率，具有重要的臨床指導(dǎo)意義。

參考文獻(xiàn)

[1]? SUZAKI A. Contribution of rapid diagnostic test [ 1] in the treatment of infectious diseases [J]. Rinsho Biseibutshu Jinsoku Shindan Kenkyukai Shi， 2014，24（2）：57-61.

[2]? 孫敬，陳會，余理智等。痰液培養(yǎng)定植菌與病原茵判斷方法的探討[J].江西醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)，2006， 24（6）：485-488.

[3]? 張璐，王玉青，趙磊，等.ICU患者下呼吸道感染病原菌與耐藥性分析[J]. 中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2016，26 （14）：31-33.

[4]? 鄒蘭科， 鄧忠天， 陳麗娜，等. 肺泡灌洗液和痰病原菌培養(yǎng)對下呼吸道感染的診斷價(jià)值分析[J].解放軍預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志，2019，37（5）：19-20.

[5]? 曹慧玲，杭 鳴，趙蘇瑛，等.痰涂片檢查白細(xì)胞吞噬細(xì)菌在下呼吸道感染診斷中的價(jià)值[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué).2018，33（2）：115-118.

作者簡介：李群（1989.1-），女，漢族，籍貫河南洛陽，碩士，住院醫(yī)師，研究方向：呼吸內(nèi)科